| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第14-29页 |
| 1.1 南瓜 | 第14-15页 |
| 1.1.1 南瓜概述 | 第14页 |
| 1.1.2 南瓜营养成分的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 南瓜籽 | 第15-19页 |
| 1.2.1 南瓜籽简介 | 第15页 |
| 1.2.2 南瓜籽营养成分的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.3 南瓜籽药用价值 | 第18-19页 |
| 1.3 植物抗真菌蛋白 | 第19-23页 |
| 1.3.1 病程相关蛋白 | 第19-20页 |
| 1.3.2 植物防御素 | 第20-21页 |
| 1.3.3 核糖体失活蛋白 | 第21页 |
| 1.3.4 脂转移蛋白 | 第21-22页 |
| 1.3.5 类亲环素蛋白 | 第22页 |
| 1.3.6 2s白蛋白类 | 第22页 |
| 1.3.7 其他抗真菌蛋白 | 第22-23页 |
| 1.4 色谱技术在蛋白纯化中的应用 | 第23-26页 |
| 1.4.1 凝胶过滤色谱 | 第24页 |
| 1.4.2 离子交换色谱 | 第24-25页 |
| 1.4.3 亲和色谱 | 第25-26页 |
| 1.4.4 疏水相互作用色谱和反相色谱 | 第26页 |
| 1.5 南瓜抗真菌蛋白的研究进展 | 第26-27页 |
| 1.6 本课题的意义及内容 | 第27-29页 |
| 2 材料与仪器 | 第29-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.1 原料及其来源 | 第29页 |
| 2.1.2 菌种 | 第29页 |
| 2.2 试剂 | 第29-30页 |
| 2.3 主要仪器 | 第30-32页 |
| 3 试验方法 | 第32-44页 |
| 3.1 试验流程 | 第32-33页 |
| 3.2 含抗真菌蛋白不同南瓜籽品种及提取方法的筛选 | 第33-34页 |
| 3.2.1 不同方法提取南瓜籽蛋白质含量的比较 | 第33-34页 |
| 3.2.2 不同南瓜籽品种的筛选 | 第34页 |
| 3.3 南瓜籽抗真菌蛋白分离纯化 | 第34-36页 |
| 3.3.1 南瓜籽抗真菌蛋白的粗提 | 第34页 |
| 3.3.2 硫酸铵的分级沉淀 | 第34-35页 |
| 3.3.3 透析 | 第35页 |
| 3.3.4 抗菌活性的测定 | 第35页 |
| 3.3.5 色谱分离纯化 | 第35-36页 |
| 3.4 抗真菌蛋白性质鉴定及生物活性测定 | 第36-43页 |
| 3.4.1 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第36页 |
| 3.4.2 SDS聚丙烯酰胺电泳分析 | 第36-38页 |
| 3.4.3 基质辅助激光解析串联飞行时间质谱鉴定分析 | 第38-39页 |
| 3.4.4 氨基酸组成分析 | 第39页 |
| 3.4.5 抗真菌活性的测定 | 第39页 |
| 3.4.6 抑真菌半抑制浓度(IC_(50))的测定 | 第39-40页 |
| 3.4.7 抑制细菌活性的测定 | 第40-41页 |
| 3.4.8 对温度敏感性测定 | 第41页 |
| 3.4.9 对pH敏感性测定 | 第41页 |
| 3.4.10 对紫外线敏感性测定 | 第41页 |
| 3.4.11 含糖量测定 | 第41页 |
| 3.4.12 抗氧化性的测定 | 第41-42页 |
| 3.4.13 类超氧化物歧化酶活性 | 第42-43页 |
| 3.5 数据处理分析 | 第43-44页 |
| 4 结果与分析 | 第44-72页 |
| 4.1 含抗真菌蛋白不同南瓜籽品种及提取方法的筛选 | 第44-47页 |
| 4.1.1 不同提取方法的筛选 | 第44页 |
| 4.1.2 不同南瓜籽品种的筛选 | 第44-47页 |
| 4.2 南瓜籽抗真菌蛋白的分离纯化 | 第47-56页 |
| 4.2.1 硫酸铵分级沉淀组分抗菌活性和分子量分布考察 | 第47-48页 |
| 4.2.2 40%～55%饱和硫酸铵沉淀组分对SP-Sepharose柱纯化条件筛选 | 第48-52页 |
| 4.2.3 对40%～55%、55%～95%饱和硫酸铵沉淀组分纯化 | 第52-56页 |
| 4.3 南瓜籽抗真菌蛋白组分SP3性质鉴定及生物活性测定 | 第56-72页 |
| 4.3.1 纯度鉴定和分子量标定 | 第56-57页 |
| 4.3.2 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定 | 第57-58页 |
| 4.3.3 各组分蛋白含量的测定 | 第58-59页 |
| 4.3.4 氨基酸组成分析 | 第59-60页 |
| 4.3.5 SP3组分蛋白的体外抗菌活性 | 第60-66页 |
| 4.3.6 SP3抗真菌蛋白对温度敏感性测定 | 第66-67页 |
| 4.3.7 SP3抗真菌蛋白对pH敏感性的测定 | 第67-68页 |
| 4.3.8 SP3抗真菌蛋白对紫外线敏感性的测定 | 第68页 |
| 4.3.9 糖含量测定 | 第68-69页 |
| 4.3.10 SP3抗真菌蛋白的抗氧化活性 | 第69-70页 |
| 4.3.11 SP3蛋白的类SOD活性 | 第70页 |
| 4.3.12 小结 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 附录 | 第84-89页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第89页 |
