摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
1 引言 | 第11-33页 |
·立题背景及意义 | 第11-12页 |
·金葡菌的简介 | 第12-15页 |
·金葡菌的发现历史 | 第12页 |
·金葡菌的基本特征 | 第12页 |
·金葡菌的致病性 | 第12-13页 |
·金葡菌的流行病学 | 第13页 |
·金葡菌食物中毒 | 第13-14页 |
·与金葡菌食物中毒相关的食物 | 第14-15页 |
·金葡菌污染的控制 | 第15页 |
·金葡菌检测方法研究现状 | 第15-20页 |
·传统分离鉴定方法 | 第15-16页 |
·快速鉴别培养基 | 第16-17页 |
·微型化生化试剂盒 | 第17页 |
·免疫学检测方法 | 第17页 |
·分子生物学检测方法 | 第17-19页 |
·其他检测方法 | 第19-20页 |
·环介导等温扩增(LAMP)技术 | 第20-32页 |
·LAMP 法的概述 | 第20页 |
·LAMP 法的特点 | 第20-21页 |
·LAMP 法的引物设计 | 第21-23页 |
·LAMP 法的基本原理 | 第23-27页 |
·LAMP 的反应体系 | 第27-28页 |
·LAMP 法产物的检测方法 | 第28-29页 |
·LAMP 法的应用 | 第29-32页 |
·研究内容 | 第32-33页 |
2 材料与方法 | 第33-46页 |
·试验材料与仪器 | 第33-35页 |
·试验菌株 | 第33页 |
·仪器与设备 | 第33-34页 |
·主要培养基 | 第34页 |
·生化试剂 | 第34-35页 |
·试验样品 | 第35页 |
·试验方法 | 第35-36页 |
·菌种的保藏、活化和培养 | 第35-36页 |
·细菌DNA 模板的提取 | 第36页 |
·LAMP 引物设计、反应体系及主要操作 | 第36-38页 |
·引物设计 | 第36-37页 |
·LAMP 和PCR 反应体系 | 第37-38页 |
·LAMP 和PCR 主要操作程序 | 第38页 |
·LAMP 反应条件优化 | 第38-39页 |
·适宜镁离子浓度选择 | 第38页 |
·Bst DNA 聚合酶对试验结果的影响 | 第38-39页 |
·适宜dNTPs 浓度选择 | 第39页 |
·反应时间的优化 | 第39页 |
·反应温度的优化 | 第39页 |
·引物对LAMP 反应的影响分析 | 第39页 |
·甜菜碱LAMP 反应的影响 | 第39页 |
·LAMP 引物特异性的检测 | 第39-40页 |
·金葡菌的灵敏度检测 | 第40页 |
·LAMP 反应的灵敏度检测 | 第40页 |
·PCR 反应的灵敏度检测 | 第40页 |
·LAMP 扩增产物的分析 | 第40-41页 |
·LAMP 扩增产物的可视结果分析 | 第40页 |
·LAMP 扩增产物的凝胶成像分析 | 第40页 |
·LAMP 扩增产物酶切结果分析 | 第40-41页 |
·人工污染食品中金葡菌基因组DNA 提取方法比较 | 第41-44页 |
·溶剂提取热裂解法 | 第41页 |
·FDA 提取DNA 法 | 第41-42页 |
·化学试剂法 | 第42页 |
·溶剂提取酶解法 | 第42页 |
·试剂盒法 | 第42-43页 |
·FTA 滤膜法 | 第43页 |
·蛋白酶K 法 | 第43-44页 |
·普通热裂解法 | 第44页 |
·人工污染金葡菌食品的检测试验 | 第44-45页 |
·人工污染肉及肉制品样品中金葡菌DNA 的提取、检测 | 第44页 |
·人工污染乳品样品中金葡菌DNA 的提取、检测 | 第44-45页 |
·实际样品检测试验 | 第45-46页 |
3 结果与分析 | 第46-59页 |
·LAMP 反应条件的优化 | 第46-50页 |
·镁离子浓度的优化 | 第46页 |
·Bst DNA 聚合酶的优化 | 第46-47页 |
·dNTPs 浓度的优化 | 第47-48页 |
·反应时间的优化 | 第48-49页 |
·反应温度的优化 | 第49页 |
·引物缺省试验 | 第49-50页 |
·甜菜碱对LAMP 反应的影响 | 第50页 |
·LAMP 引物特异性的研究 | 第50-51页 |
·LAMP 扩增产物的分析 | 第51-52页 |
·食品中金葡菌DNA 提取方法的比较 | 第52-54页 |
·LAMP 和PCR 检测金葡菌的灵敏度 | 第54-55页 |
·人工污染食品中金葡菌检出限的研究 | 第55-58页 |
·实际食品样品LAMP 检测试验 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-63页 |
·环介导等温扩增(LAMP)方法检测金葡菌方法学评价 | 第59页 |
·靶基因的选择 | 第59页 |
·LAMP 引物的确定 | 第59-60页 |
·LAMP 反应条件的优化 | 第60-61页 |
·DNA 聚合酶 | 第60页 |
·镁离子浓度 | 第60-61页 |
·dNTPs 浓度 | 第61页 |
·温度对LAMP 的影响 | 第61页 |
·食品中金葡菌提取方法的比较 | 第61-62页 |
·LAMP 方法实际样品检测试验 | 第62页 |
·LAMP 方法发展展望 | 第62-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录A | 第71-72页 |
硕士期间发表学术论文 | 第72-73页 |
作者简介 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |