摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第10-15页 |
1 食源性疾病 | 第10页 |
2 沙门氏菌食源性疾病及其污染食品情况 | 第10-12页 |
3 食品污染沙门氏菌的检测方法 | 第12页 |
4 环介导等温扩增技术 | 第12-13页 |
5 本研究内容与意义 | 第13-15页 |
5.1 本研究目的及意义 | 第13-14页 |
5.2 本研究主要内容 | 第14-15页 |
5.2.1 实验内容 | 第14页 |
5.2.2 技术路线 | 第14-15页 |
第二章 南昌市售冷冻鸡肉沙门氏菌污染情况的调查 | 第15-25页 |
1 材料与仪器 | 第15-17页 |
1.1 样品来源 | 第15页 |
1.2 主要仪器 | 第15-16页 |
1.3 主要试剂 | 第16页 |
1.4 主要培养基 | 第16-17页 |
2 实验方法 | 第17-19页 |
2.1 国标检测法 | 第17-18页 |
2.1.1 前增菌 | 第17页 |
2.1.2 增菌 | 第17页 |
2.1.3 分离 | 第17页 |
2.1.4 生化实验 | 第17-18页 |
2.2 菌株的分子生物学鉴定 | 第18-19页 |
2.2.1 16S rDNA扩增 | 第18页 |
2.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第18页 |
2.2.3 16S rDNA测序 | 第18-19页 |
3 结果与分析 | 第19-24页 |
3.1 选择性培养基菌落形态 | 第19页 |
3.2 生化试验结果 | 第19页 |
3.3 革兰氏染色结果 | 第19-20页 |
3.4 16S rDNA序列的PCR的扩增结果 | 第20页 |
3.5 16S rDNA序列的测序及分析 | 第20-23页 |
3.6 细菌 16s rDNA序列同源性分析树 | 第23页 |
3.7 沙门氏菌污染的调查 | 第23-24页 |
3.7.1 阳性样品的检出情况 | 第23-24页 |
3.7.2 阳性样品的分布情况 | 第24页 |
4 本章小结 | 第24-25页 |
第三章 Rti-LAMP快速检测鸡肉中沙门氏菌方法的建立 | 第25-34页 |
1 材料与仪器 | 第25-26页 |
1.1 实验菌株与原料 | 第25页 |
1.2 主要材料与试剂 | 第25-26页 |
1.3 仪器与设备 | 第26页 |
2 实验方法 | 第26-28页 |
2.1 引物设计与合成 | 第26-27页 |
2.2 细菌培养、计数及基因组DNA提取 | 第27页 |
2.3 Rti- LAMP反应 | 第27页 |
2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
2.5 鸡肉样品沙门氏菌的人工污染 | 第27-28页 |
2.6 鸡肉样品细菌DNA的提取 | 第28页 |
2.7 市场鸡肉样品沙门氏菌污染的检测 | 第28页 |
3 结果与分析 | 第28-33页 |
3.1 菌液稀释倍数与吸光度值的关系 | 第28-29页 |
3.2 Rti-LAMP的建立 | 第29-30页 |
3.3 Rti-LAMP对模拟沙门氏菌污染鸡肉样品的检测 | 第30-32页 |
3.4 Rti-LAMP法对实际鸡肉样品的检测 | 第32-33页 |
4 本章小结 | 第33-34页 |
第四章 非预增菌Rti-LAMP快速检测鸡肉中沙门氏菌方法的建立及应用 | 第34-44页 |
1 材料 | 第34-36页 |
1.1 实验菌株与原料 | 第34页 |
1.2 主要试剂 | 第34-35页 |
1.3 实验仪器 | 第35页 |
1.4 主要试剂及缓冲溶液的配制 | 第35页 |
1.5 引物设计与合成 | 第35-36页 |
2 实验方法 | 第36-38页 |
2.1 细菌培养 | 第36页 |
2.2 封闭活性炭的制备 | 第36页 |
2.3 封闭活性炭的扫描电镜表征 | 第36-37页 |
2.4 封闭活性炭用量的优化 | 第37页 |
2.5 封闭活性炭吸附可溶性组分的评价 | 第37页 |
2.6 鸡肉样品沙门氏菌的人工污染 | 第37页 |
2.7 鸡肉样品细菌高效回收、精制前处理 | 第37页 |
2.8 细菌DNA的制备 | 第37-38页 |
2.9 Rti- LAMP反应 | 第38页 |
2.10 琼脂糖凝胶电泳 | 第38页 |
2.11 市场鸡肉样品沙门氏菌污染的对比检测 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-43页 |
3.1 封闭活性炭处理菌液后的细菌回收率 | 第38-39页 |
3.2 活性炭的扫描电镜结果 | 第39页 |
3.3 非预增菌Rti-LAMP的检测灵敏性 | 第39-41页 |
3.4 非预增菌Rti-LAMP法与国标法对比检测市售鸡肉 | 第41-43页 |
4 本章小结 | 第43-44页 |
第五章 总结与展望 | 第44-45页 |
1 总结 | 第44页 |
2 展望 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简历 | 第51页 |