| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-26页 |
| ·副溶血弧菌的简介 | 第16-18页 |
| ·生物学特性 | 第16-17页 |
| ·生化特性和鉴定方法 | 第17页 |
| ·流行病学特性 | 第17-18页 |
| ·副溶血弧菌主要毒力因子及致病性 | 第18-21页 |
| ·溶血性毒素 | 第18-20页 |
| ·粘附因子 | 第20页 |
| ·尿素酶 | 第20页 |
| ·侵袭因子 | 第20-21页 |
| ·副溶血弧菌的检测方法 | 第21-25页 |
| ·常规检测方法 | 第21页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第21-24页 |
| ·免疫学检测方法 | 第24-25页 |
| ·本课题研究目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 锦州笔架山海岸水产品中副溶血弧菌分子流行病学调查 | 第26-38页 |
| ·前言 | 第26页 |
| ·实验材料与仪器 | 第26-28页 |
| ·样品和菌株 | 第26页 |
| ·仪器与设备 | 第26-27页 |
| ·培养基和试剂 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-31页 |
| ·样品的采集与处理 | 第28页 |
| ·细菌的分离培养 | 第28页 |
| ·副溶血弧菌的初步筛选 | 第28页 |
| ·生化试验 | 第28-29页 |
| ·分子生物学检测 | 第29-31页 |
| ·副溶血弧菌的保存 | 第31页 |
| ·实验结果与讨论 | 第31-36页 |
| ·分离菌株的培养特性 | 第31-32页 |
| ·初筛结果 | 第32-33页 |
| ·生化试验结果 | 第33页 |
| ·16S r RNA检测结果 | 第33-34页 |
| ·分离菌株的同源性分析 | 第34-35页 |
| ·副溶血弧菌的检出率 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-38页 |
| 第三章 副溶血弧菌水产品分离株的毒力调查 | 第38-44页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·实验材料与仪器 | 第38-39页 |
| ·样品和菌株 | 第38页 |
| ·仪器与设备 | 第38-39页 |
| ·培养基和试剂 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·引物的选取 | 第39页 |
| ·毒力基因的PCR反应 | 第39页 |
| ·水产品分离株的神奈川溶血试验 | 第39-40页 |
| ·水产品分离株的尿素酶试验 | 第40页 |
| ·实验结果与讨论 | 第40-43页 |
| ·tdh毒力基因检测结果 | 第40-41页 |
| ·trh毒力基因检测结果 | 第41-42页 |
| ·神奈川溶血试验结果 | 第42页 |
| ·尿素酶试验结果 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 副溶血弧菌巢式PCR快速检测方法的建立及应用 | 第44-62页 |
| ·前言 | 第44页 |
| ·实验材料与仪器 | 第44-46页 |
| ·样品和菌株 | 第44页 |
| ·仪器与设备 | 第44-45页 |
| ·培养基和试剂 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-51页 |
| ·副溶血弧菌的复苏培养 | 第46页 |
| ·基因组DNA的抽提 | 第46页 |
| ·引物的设计 | 第46页 |
| ·巢式PCR反应体系 | 第46-47页 |
| ·巢式PCR反应程序 | 第47-48页 |
| ·巢式PCR反应条件优化 | 第48-49页 |
| ·巢式PCR扩增产物的分析 | 第49-50页 |
| ·巢式PCR反应体系的特异性试验 | 第50页 |
| ·巢式PCR反应体系的敏感性试验 | 第50-51页 |
| ·巢式PCR反应体系的人工污染试验 | 第51页 |
| ·巢式PCR的初步应用 | 第51页 |
| ·实验结果与讨论 | 第51-61页 |
| ·两种DNA抽提方法的比较 | 第51页 |
| ·外引物退火温度对结果的影响 | 第51-52页 |
| ·内引物退火温度对结果的影响 | 第52-53页 |
| ·DNA添加量对巢式PCR反应结果影响 | 第53页 |
| ·引物添加量对巢式PCR反应结果影响 | 第53-54页 |
| ·Mg2+添加量对巢式PCR反应结果的影响 | 第54页 |
| ·d NTPs添加量对巢式PCR反应结果影响 | 第54-55页 |
| ·r Taq DNA聚合酶添加量对巢式PCR反应结果影响 | 第55-56页 |
| ·副溶血弧菌巢式PCR反应体系及反应条件确定 | 第56页 |
| ·副溶血弧菌巢式PCR扩增产物的检测 | 第56-57页 |
| ·测序结果 | 第57页 |
| ·巢式PCR反应体系特异性 | 第57-58页 |
| ·副溶血弧菌纯培养物的敏感性 | 第58-59页 |
| ·副溶血弧菌DNA浓度的敏感性 | 第59-60页 |
| ·巢式PCR反应体系的人工污染试验 | 第60页 |
| ·巢式PCR的初步应用结果 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第五章 结论、创新点和展望 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第62页 |
| ·锦州笔架山海岸水产品中副溶血弧菌分子流行病学调查 | 第62页 |
| ·副溶血弧菌水产品分离株的毒力调查 | 第62页 |
| ·副溶血弧菌巢式PCR快速检测方法的建立及应用 | 第62页 |
| ·创新点 | 第62-63页 |
| ·展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-76页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
