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利用细胞表面展示系统改造大肠杆菌利用木聚糖

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 文献综述第7-18页
   ·半纤维素及其利用第7-11页
     ·半纤维素与木聚糖的结构第8-9页
     ·木聚糖酶第9-10页
     ·一体化生物加工过程第10-11页
   ·大肠杆菌对半纤维素的利用第11-13页
     ·半纤维素的生物转化第11-12页
     ·大肠杆菌的表面展示与蛋白分泌第12-13页
   ·微生物细胞表面展示技术研究进展第13-17页
     ·噬菌体展示系统第14页
     ·细菌展示系统第14-16页
     ·酵母表面展示系统第16-17页
   ·选题背景及主要技术路线第17-18页
第二章 实验材料及方法第18-34页
   ·实验材料第18-23页
     ·菌种和质粒第18-19页
     ·实验仪器及设备第19-20页
     ·实验药品与试剂第20-21页
     ·培养基第21-22页
     ·溶液第22-23页
   ·实验方法第23-34页
     ·菌体培养与发酵第23-24页
     ·CaCl_2法-大肠杆菌化转感受态第24-25页
     ·大肠杆菌染色体 DNA 的提取第25页
     ·大肠杆菌质粒的提取(碱裂法)第25-26页
     ·PCR 扩增基因第26-27页
     ·PCR 产物纯化回收第27-28页
     ·DNA 的酶切、去磷酸化和连接第28-29页
     ·琼脂糖凝胶电泳第29页
     ·DNA 片段的切胶回收及纯化第29-30页
     ·发酵液菌体浓度和葡萄糖的测定第30页
     ·木聚糖的酸水解第30页
     ·DNS 法测定还原糖第30-31页
       ·绘制木糖标准曲线第30-31页
       ·还原糖浓度测定第31页
     ·酶活的测定第31-32页
       ·木聚糖内切酶活性测定第31-32页
       ·木糖苷酶活性测定第32页
     ·免疫荧光反应第32-34页
第三章 实验结果与讨论第34-67页
   ·大肠杆菌细胞表面展示系统的构建第34-56页
     ·构建表达载体质粒 pAB第34-40页
     ·构建细胞表面展示质粒第40-47页
     ·构建三基因共表达细胞表面展示质粒 pAB7B3BA第47-52页
     ·构建展示系统和分泌系统的组合质粒 pAB7O3 和 pAB3O7第52-56页
   ·细胞表面展示菌株的表征第56-59页
     ·测序结果第56-57页
     ·酶活测定第57-58页
     ·免疫荧光反应第58-59页
   ·工程菌株的发酵验证第59-67页
     ·细胞表面展示系统菌株的发酵验证第59-60页
     ·发酵优化第60-63页
     ·展示策略和分泌策略的发酵比较第63-67页
第四章 结论与展望第67-69页
   ·实验主要结论第67-68页
   ·展望第68-69页
参考文献第69-74页
发表论文和参加科研情况说明第74-75页
致谢第75页

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