摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-18页 |
·半纤维素及其利用 | 第7-11页 |
·半纤维素与木聚糖的结构 | 第8-9页 |
·木聚糖酶 | 第9-10页 |
·一体化生物加工过程 | 第10-11页 |
·大肠杆菌对半纤维素的利用 | 第11-13页 |
·半纤维素的生物转化 | 第11-12页 |
·大肠杆菌的表面展示与蛋白分泌 | 第12-13页 |
·微生物细胞表面展示技术研究进展 | 第13-17页 |
·噬菌体展示系统 | 第14页 |
·细菌展示系统 | 第14-16页 |
·酵母表面展示系统 | 第16-17页 |
·选题背景及主要技术路线 | 第17-18页 |
第二章 实验材料及方法 | 第18-34页 |
·实验材料 | 第18-23页 |
·菌种和质粒 | 第18-19页 |
·实验仪器及设备 | 第19-20页 |
·实验药品与试剂 | 第20-21页 |
·培养基 | 第21-22页 |
·溶液 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-34页 |
·菌体培养与发酵 | 第23-24页 |
·CaCl_2法-大肠杆菌化转感受态 | 第24-25页 |
·大肠杆菌染色体 DNA 的提取 | 第25页 |
·大肠杆菌质粒的提取(碱裂法) | 第25-26页 |
·PCR 扩增基因 | 第26-27页 |
·PCR 产物纯化回收 | 第27-28页 |
·DNA 的酶切、去磷酸化和连接 | 第28-29页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
·DNA 片段的切胶回收及纯化 | 第29-30页 |
·发酵液菌体浓度和葡萄糖的测定 | 第30页 |
·木聚糖的酸水解 | 第30页 |
·DNS 法测定还原糖 | 第30-31页 |
·绘制木糖标准曲线 | 第30-31页 |
·还原糖浓度测定 | 第31页 |
·酶活的测定 | 第31-32页 |
·木聚糖内切酶活性测定 | 第31-32页 |
·木糖苷酶活性测定 | 第32页 |
·免疫荧光反应 | 第32-34页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第34-67页 |
·大肠杆菌细胞表面展示系统的构建 | 第34-56页 |
·构建表达载体质粒 pAB | 第34-40页 |
·构建细胞表面展示质粒 | 第40-47页 |
·构建三基因共表达细胞表面展示质粒 pAB7B3BA | 第47-52页 |
·构建展示系统和分泌系统的组合质粒 pAB7O3 和 pAB3O7 | 第52-56页 |
·细胞表面展示菌株的表征 | 第56-59页 |
·测序结果 | 第56-57页 |
·酶活测定 | 第57-58页 |
·免疫荧光反应 | 第58-59页 |
·工程菌株的发酵验证 | 第59-67页 |
·细胞表面展示系统菌株的发酵验证 | 第59-60页 |
·发酵优化 | 第60-63页 |
·展示策略和分泌策略的发酵比较 | 第63-67页 |
第四章 结论与展望 | 第67-69页 |
·实验主要结论 | 第67-68页 |
·展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |