| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 1 前言 | 第10-32页 |
| ·普洱茶概述 | 第10-13页 |
| ·普洱茶 | 第10-11页 |
| ·普洱茶功效 | 第11-12页 |
| ·普洱茶的渥堆发酵过程 | 第12-13页 |
| ·微生物群落生态学研究方法 | 第13-20页 |
| ·传统可培养方法 | 第14页 |
| ·分子生物学方法 | 第14-20页 |
| ·PCR-DGGE技术简介 | 第20-28页 |
| ·环境微生物总DNA的提取 | 第20-21页 |
| ·聚合酶链式(PCR)反应 | 第21页 |
| ·DGGE原理及应用 | 第21-28页 |
| ·普洱茶发酵过程中微生物研究现状 | 第28-29页 |
| ·本研究的内容和意义 | 第29-32页 |
| ·主要内容 | 第29-30页 |
| ·本研究的意义 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-43页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·普洱茶原料 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| ·溶剂配置 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-43页 |
| ·总DNA提取方法的比较 | 第32-36页 |
| ·PCR扩增策略探讨 | 第36-41页 |
| ·DGGE条件的选择与优化 | 第41页 |
| ·DGGE图谱分析 | 第41-42页 |
| ·DGGE凝胶条带序列分析 | 第42-43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-70页 |
| ·普洱茶发酵过程中微生物总DNA提取方法的研究 | 第43-46页 |
| ·DNA粗提产物片断大小和相对产量比较 | 第43-44页 |
| ·普洱茶发酵微生物总DNA粗提物纯度比较 | 第44页 |
| ·16S rDNA扩增结果评价 | 第44-45页 |
| ·18S rDNA扩增结果评价 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46页 |
| ·带GC发卡结构目的片段的PCR扩增策略 | 第46-50页 |
| ·真菌NS31/Glol区Touchdown PCR和Nested PCR | 第46-47页 |
| ·细菌V3可变区Touchdown PCR和Nested PCR | 第47-48页 |
| ·PCR扩增产物的DGGE分析 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| ·DGGE条件的选择与优化 | 第50-52页 |
| ·凝胶变性梯度范围的确定 | 第50-51页 |
| ·电泳时间的确定 | 第51-52页 |
| ·真菌菌群的多样性分析 | 第52-61页 |
| ·微生物总DNA的提取结果 | 第52页 |
| ·18S rDNA扩增优化 | 第52-54页 |
| ·带GC发夹结构的PCR扩增优化 | 第54-56页 |
| ·真菌PCR反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第56-59页 |
| ·DGGE条带的回收及序列测定分析 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| ·细菌菌群的多样性分析 | 第61-70页 |
| ·微生物总DNA的提取结果 | 第61页 |
| ·16S rDNA扩增优化 | 第61-63页 |
| ·带GC发夹结构的V3 可变区扩增 | 第63-64页 |
| ·细菌PCR反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第64-66页 |
| ·DGGE条带的回收及序列测定分析 | 第66-70页 |
| 4 结论 | 第70-72页 |
| 5 展望 | 第72-73页 |
| 6 参考文献 | 第73-82页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第82-83页 |
| 8 致谢 | 第83页 |
