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三重PCR快速检测婴幼儿奶粉中的病原菌

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-22页
   ·立题意义与背景第9-10页
   ·本研究所涉及的三种食源性病原菌第10-13页
     ·阪崎肠杆菌第10-11页
     ·金黄色葡萄球菌第11-12页
     ·蜡样芽胞杆菌第12-13页
   ·食源性病原菌检测技术的研究进展第13-20页
     ·传统检测方法第13-14页
     ·免疫学检测方法第14-15页
     ·分子生物学检测方法第15-20页
   ·研究内容第20-22页
2 材料与方法第22-31页
   ·试验材料第22-24页
     ·试验菌株第22页
     ·主要试剂及试剂盒第22-23页
     ·主要培养基与样品第23-24页
     ·主要仪器与设备第24页
   ·试验方法第24-31页
     ·食源性病原菌的培养第24页
     ·食源性病原菌基因组DNA 的提取第24-25页
     ·引物设计与合成第25页
     ·单重PCR 反应体系及反应程序第25-26页
     ·单重PCR 产物电泳检测第26页
     ·单重PCR 产物克隆测序检测第26-27页
     ·引物特异性第27页
     ·单重PCR 检测食源性病原菌纯培养的灵敏度第27页
     ·三重PCR 反应条件的优化第27-28页
     ·三重PCR 反应特异性第28页
     ·三重PCR 同时检测三种病原菌的灵敏度第28页
     ·人工污染婴幼儿奶粉中病原菌DNA 提取方法的比较第28-30页
     ·人工污染婴幼儿奶粉检出限第30页
     ·三重PCR 方法与国标方法进行实际样品检测对比试验第30-31页
3 结果与分析第31-41页
   ·单重PCR 产物检测第31-32页
   ·引物特异性第32页
   ·单重PCR 检测食源性病原菌纯培养的灵敏度第32-34页
   ·三重PCR 反应条件的优化第34-36页
     ·退火温度的优化第34-35页
     ·3 对引物、M92+、dNTPs、EasyTaq DNA Polymerase 的优化第35-36页
   ·三重PCR 反应特异性第36-37页
   ·三重PCR 同时检测三种病原菌的灵敏度第37-38页
   ·人工污染婴幼儿奶粉中病原菌DNA 提取方法的比较第38-39页
   ·人工污染婴幼儿奶粉检出限第39页
   ·三重PCR 方法与国标方法进行实际样品检测对比试验第39-41页
4 讨论第41-44页
   ·靶基因及引物的确定第41页
   ·三重PCR 的影响因素第41-42页
   ·正交试验优化三重PCR第42页
   ·三重PCR 方法的敏感性第42-43页
   ·样品中DNA 模板的制备第43页
   ·三重PCR 方法与国标法的比较第43-44页
5 结论第44-45页
参考文献第45-51页
附录第51-55页
硕士期间发表学术论文第55-56页
作者简介第56-57页
致谢第57-58页

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