| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-27页 |
| ·立题意义与背景 | 第9页 |
| ·本研究中的食源性致病菌简介 | 第9-15页 |
| ·沙门氏菌 | 第9-11页 |
| ·单增李斯特氏菌 | 第11-13页 |
| ·小肠结肠炎耶尔森氏菌 | 第13-15页 |
| ·食源性致病菌的检测方法 | 第15-25页 |
| ·传统检测方法 | 第15页 |
| ·免疫学检测方法 | 第15-17页 |
| ·分子生物学方法 | 第17-25页 |
| ·食源性致病菌的靶基因 | 第25-26页 |
| ·沙门氏菌靶基因 | 第25页 |
| ·单增李斯特氏菌靶基因 | 第25页 |
| ·小肠结肠炎耶尔森氏菌靶基因 | 第25-26页 |
| ·研究目的及内容 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-38页 |
| ·试验材料 | 第27-29页 |
| ·试验菌株 | 第27页 |
| ·仪器与设备 | 第27-28页 |
| ·主要培养基 | 第28页 |
| ·样品与生化试剂 | 第28-29页 |
| ·试验方法 | 第29-38页 |
| ·食源性致病菌的培养 | 第29页 |
| ·食源性致病菌基因组DNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·单重PCR 体系的建立 | 第30-31页 |
| ·多重PCR 反应条件优化 | 第31-32页 |
| ·多重PCR 反应产物检测 | 第32-33页 |
| ·特异性检测 | 第33页 |
| ·多重PCR 反应产物的测序鉴定 | 第33-34页 |
| ·灵敏度的检测 | 第34页 |
| ·人工污染猪肉中三种致病菌基因组DNA 提取方法比较 | 第34-36页 |
| ·人工污染猪肉的检出限 | 第36页 |
| ·实际样品检测试验 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·单重PCR 反应体系的建立 | 第38页 |
| ·多重PCR 反应条件优化 | 第38-41页 |
| ·多重PCR 各引物对添加量的正交优化 | 第38-39页 |
| ·多重PCR 反应体系四个因素的正交优化 | 第39-40页 |
| ·退火温度的优化 | 第40页 |
| ·Buffer 的优化 | 第40-41页 |
| ·特异性的研究 | 第41-43页 |
| ·引物特异性的研究 | 第41-42页 |
| ·多重PCR 反应特异性的研究 | 第42-43页 |
| ·多重PCR 反应产物的测序结果 | 第43页 |
| ·灵敏度的研究 | 第43-45页 |
| ·单重PCR 检测单一致病菌的灵敏度 | 第43-44页 |
| ·多重PCR 同时检测三种致病菌的灵敏度 | 第44-45页 |
| ·人工污染猪肉中三种致病菌基因组DNA 提取方法比较 | 第45-46页 |
| ·人工污染猪肉的检出限 | 第46-48页 |
| ·单重PCR 检测人工污染猪肉中单一致病菌的检出限 | 第46-47页 |
| ·多重PCR 同时检测人工污染猪肉中三种致病菌的检出限 | 第47-48页 |
| ·多重PCR 同时检测经富集培养的人工污染猪肉中三种致病菌的检出限 | 第48页 |
| ·实际样品检测结果 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| ·靶基因的选择与引物设计 | 第49页 |
| ·多重PCR 影响因素 | 第49-51页 |
| ·正交试验优化多重PCR | 第51页 |
| ·多重PCR 反应污染的防控 | 第51-52页 |
| ·展望 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-64页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
