| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-23页 |
| ·三种食源性致病菌的危害 | 第11-14页 |
| ·沙门氏菌的危害 | 第11-12页 |
| ·单增李斯特菌的危害 | 第12-13页 |
| ·E.coli O157:H7的危害 | 第13-14页 |
| ·目前常用的检测方法 | 第14-23页 |
| ·细菌分离鉴定法 | 第14页 |
| ·免疫学方法 | 第14页 |
| ·全自动微生物分析系统检测 | 第14-15页 |
| ·ISO-GRID膜过滤系统 | 第15页 |
| ·API法 | 第15页 |
| ·分子生物学方法 | 第15-23页 |
| 2 目的和意义 | 第23-24页 |
| 3 材料和方法 | 第24-31页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·菌株的培养 | 第25页 |
| ·模板的制备 | 第25-26页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第26-27页 |
| ·引物和探针的处理 | 第27页 |
| ·普通 PCR反应体系的建立 | 第27-28页 |
| ·单重实时PCR体系的建立 | 第28页 |
| ·特异性实验 | 第28页 |
| ·单重实时PCR灵敏度实验 | 第28-29页 |
| ·三联实时PCR体系的构建及灵敏度的考查 | 第29-30页 |
| ·样品检测 | 第30-31页 |
| 4 实验结果 | 第31-54页 |
| ·沙门氏菌的单重实时PCR | 第31-35页 |
| ·引物和探针的设计及检测体系的建立 | 第31页 |
| ·沙门氏菌特异性实验 | 第31-33页 |
| ·沙门氏菌反应体系灵敏度实验 | 第33-35页 |
| ·单增李斯特氏菌的单重实时PCR | 第35-40页 |
| ·引物和探针的设计及检测体系的建立 | 第35-36页 |
| ·单增李斯特氏菌特异性实验 | 第36-38页 |
| ·单增李斯特氏菌反应体系灵敏度实验 | 第38-40页 |
| ·E.coli O157:H7单重实时PCR | 第40-46页 |
| ·E.coli O157:H7引物的设计及单重实时PCR体系的建立 | 第40-42页 |
| ·E.coli O157:H7特异性实验 | 第42-43页 |
| ·E.coli O157:H7灵敏度检测 | 第43-46页 |
| ·三联实时PCR | 第46-53页 |
| ·三联实时PCR体系的建立 | 第46-47页 |
| ·检测混合 DNA | 第47-48页 |
| ·三联实时PCR灵敏度 | 第48-53页 |
| ·样品检测结果 | 第53-54页 |
| 5 讨论 | 第54-59页 |
| ·引物和探针的设计 | 第54-55页 |
| ·实时PCR和改良分子信标的优点 | 第55-56页 |
| ·检测方法的特异性 | 第56页 |
| ·检测方法的灵敏性 | 第56-57页 |
| ·多重实时 PCR的优势 | 第57-58页 |
| ·检测方法的时效性 | 第58页 |
| ·应用前景 | 第58-59页 |
| 6 结论 | 第59-60页 |
| 7 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录 硕士期间发表的论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |