| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1. 文献综述 | 第10-17页 |
| 1.1 囊性纤维化疾病及其治疗策略 | 第10-11页 |
| 1.2 基因编辑技术 | 第11-14页 |
| 1.2.1 基因编辑技术的发展与现状 | 第11-13页 |
| 1.2.2 基因编辑技术在CF疾病治疗中的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 单位点突变编辑研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 1.5 技术路线 | 第16-17页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第17-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 细胞来源 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂的配置 | 第17-18页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-23页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第18页 |
| 2.3.2 细胞转染(电转) | 第18页 |
| 2.3.3 sgRNA的设计与制备 | 第18-19页 |
| 2.3.4 基因编辑效率测定 | 第19-20页 |
| 2.3.5 iPS细胞克隆的挑取 | 第20页 |
| 2.3.6 iPS细胞的干性鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.7 CFTR基因功能修复测定 | 第21页 |
| 2.3.8 复合突变细胞系的筛选 | 第21-23页 |
| 3. 实验结果 | 第23-38页 |
| 3.1 细胞转染效率检测 | 第23-24页 |
| 3.2 sgRNA与Oligo的设计与构建 | 第24-28页 |
| 3.2.1 sgRNA的设计与制备 | 第24页 |
| 3.2.2 sgRNA的效率验证 | 第24-27页 |
| 3.2.3 Oligo的合成 | 第27-28页 |
| 3.3 CFTR主要位点效率验证 | 第28-31页 |
| 3.4 iPS细胞克隆效率验证 | 第31页 |
| 3.5 iPS细胞干性鉴定 | 第31-32页 |
| 3.6 dF508修复细胞功能分析 | 第32-33页 |
| 3.7 复合突变细胞系的获得 | 第33-34页 |
| 3.8 sgRNA脱靶验证 | 第34-38页 |
| 4. 讨论和结论 | 第38-42页 |
| 全文结论 | 第42-43页 |
| 本研究创新点 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57-59页 |