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基于全基因组测序的黄瓜细菌性流胶病病原菌致病力和比较基因组分析

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
缩略词第12-15页
第一章 绪论第15-23页
    1.1 黄瓜细菌性流胶病在我国北方黄瓜主产区普遍发生第15-16页
        1.1.1 黄瓜细菌性流胶病的发生和危害第15页
        1.1.2 黄瓜细菌性流胶病的病原物鉴定第15-16页
    1.2 扁桃假单胞流泪致病变种研究进展第16页
        1.2.1 病原菌的研究历史及危害第16页
        1.2.2 病原菌的致病过程及侵染条件第16页
    1.3 胡萝卜软腐果胶杆菌研究进展第16-18页
        1.3.1 病原菌的研究历史及危害第16-17页
        1.3.2 病原菌的致病因子及调控第17-18页
    1.4 基于第三代测序技术的细菌基因组学研究进展第18-20页
        1.4.1 第三代测序技术简介第18-19页
        1.4.2 第三代测序技术在细菌全基因组学研究中的应用第19-20页
    1.5 实时荧光定量PCR技术在植物与病原菌互作研究中的应用第20-22页
        1.5.1 实时荧光定量PCR技术及内参基因的选择第20-21页
        1.5.2 荧光定量PCR技术在菌-植互作研究中的应用第21-22页
    1.6 本研究的目的与意义第22-23页
第二章 黄瓜细菌性流胶病病原菌致病力及其寄主范围测定研究第23-34页
    2.1 实验材料第23-25页
        2.1.1 供试菌株第23-24页
        2.1.2 供试植物材料第24页
        2.1.3 供试培养基第24-25页
    2.2 实验方法第25-26页
        2.2.1 细菌菌株活化和培养第25页
        2.2.2 育苗方法第25页
        2.2.3 接种处理第25页
        2.2.4 病害调查第25-26页
    2.3 结果与讨论第26-33页
        2.3.1 Pal和Pcb对黄瓜的致病能力第26-31页
        2.3.2 Pal NM002和Pcb SX309对不同作物的侵染能力第31-33页
    2.4 小结第33-34页
第三章 扁桃假单胞流泪致病变种NM002全基因组测序及与致病和侵染相关因子分析第34-49页
    3.1 实验材料第34-35页
        3.1.1 供试细菌菌株第34页
        3.1.2 培养基及培养条件第34-35页
        3.1.3 酶及试剂盒第35页
        3.1.4 仪器及设备第35页
        3.1.5 测序公司及平台第35页
    3.2 实验方法第35-38页
        3.2.1 测序菌株的培养条件和特性研究第35页
        3.2.2 细菌全基因组的提取第35-36页
        3.2.3 Pal NM002菌株基因组序列的测定第36页
        3.2.4 扁桃假单胞流泪致病变种Pal NM002基因组注释与分析第36-37页
        3.2.5 扁桃假单胞流泪致病变种Pal NM002进化分析第37页
        3.2.6 扁桃假单胞流泪致病变种Pal NM002比较基因组分析第37页
        3.2.7 扁桃假单胞流泪致病变种Pal NM002毒力因子的分析第37-38页
    3.3 结果与讨论第38-48页
        3.3.1 扁桃假单胞流泪致病变种Pal INM002菌株特性及基因组的基本特征第38-39页
        3.3.2 扁桃假单胞流泪致病变种Pal NM002比较基因组学分析第39-42页
        3.3.3 细菌分泌系统第42-44页
        3.3.4 其他毒力因子的比较分析第44-46页
        3.3.5 次级代谢产物比较分析第46-48页
    3.4 小结第48-49页
第四章 胡萝卜果胶杆菌巴西亚种SX309全基因组测序及与致病和寄主遗传适应相关因子分析第49-66页
    4.1 实验材料第49-50页
        4.1.1 供试细菌菌株第49-50页
        4.1.2 供试培养基及试剂盒第50页
        4.1.3 仪器及设备第50页
        4.1.4 测序公司及平台第50页
    4.2 实验方法第50-53页
        4.2.1 测序菌株培养条件第50页
        4.2.2 细菌全基因组的提取第50页
        4.2.3 Pcb SX309全基因组测序及组装第50-51页
        4.2.4 Pcb SX309基因组注释与分析第51页
        4.2.5 Pcb SX309比较基因组分析第51-52页
        4.2.6 Pcb SX309功能基因分析第52页
        4.2.7 胞外酶合成能力检测第52页
        4.2.8 Pcb SX309对黄瓜和马铃薯的致病性测定第52-53页
        4.2.9 Pcb SX309显微和电镜观察第53页
    4.3 结果与讨论第53-64页
        4.3.1 Pcb SX309菌株特性第53页
        4.3.2 Pcb SX309基因组的基本特征第53-56页
        4.3.3 Pcb SX309比较基因组学分析第56-57页
        4.3.4 植物胞壁降解酶编码基因比较分析第57-58页
        4.3.5 细菌分泌系统编码基因比较分析第58-60页
        4.3.6 群体感应系统编码基因比较分析第60-61页
        4.3.7 双组分系统编码基因比较分析第61-62页
        4.3.8 鞭毛合成和趋化基因比较分析第62页
        4.3.9 CRISPR-Cas系统编码基因比较分析第62-64页
        4.3.10 脂多糖编码基因比较分析第64页
    4.4 小结第64-66页
第五章 胡萝卜果胶杆菌巴西亚种SX309侵染黄瓜过程中最适内参的筛选和应用第66-78页
    5.1 实验材料第66-67页
        5.1.1 供试菌株和质粒第66页
        5.1.2 供试植物材料第66页
        5.1.3 供试引物第66页
        5.1.4 供试培养基第66页
        5.1.5 酶及试剂盒第66-67页
        5.1.6 实验耗材及仪器第67页
    5.2 实验方法第67-71页
        5.2.1 电击感受态的制备第67页
        5.2.2 电击转化步骤第67-68页
        5.2.3 转化子荧光观察及致病性试验第68页
        5.2.4 Pcb SX309在致病进程中的种群动态变化第68页
        5.2.5 样品基因组DNA提取第68页
        5.2.6 样品总RNA的提取及cDNA制备第68-70页
        5.2.7 候选内参基因的选择及引物设计第70页
        5.2.8 相对定量PCR反应体系的优化第70-71页
        5.2.9 茌Pcb SX309致病进程中内参基因的筛选第71页
        5.2.10 统计分析第71页
    5.3 结果与讨论第71-77页
        5.3.1 Pcb SX309的绿色荧光标记第71-72页
        5.3.2 Pcb309在致病进程中的种群动态变化第72页
        5.3.3 候选内参的PCR扩增特性第72-73页
        5.3.4 候选内参基因的表达水平分析第73-74页
        5.3.5 候选内参基因的表达稳定性分析第74-76页
        5.3.6 基于靶标基因的表达分析验证最适内参稳定性第76-77页
    5.4 小结第77-78页
第六章 结论与展望第78-80页
    6.1 结论第78-79页
    6.2 展望第79-80页
参考文献第80-93页
附录第93-168页
致谢第168-169页
个人简历第169-170页

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