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牛乳中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌多重PCR检测方法的建立及应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
文献综述第11-19页
 第一章 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌检测研究进展第11-19页
   ·牛乳中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌的检测研究第11-15页
     ·金黄色葡萄球菌的研究第11-13页
     ·大肠杆菌的研究第13-14页
     ·产气荚膜梭菌的研究第14-15页
   ·牛乳中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌检测方法概述第15-16页
     ·传统检测方法第15页
     ·快速检测方法第15-16页
   ·PCR 技术原理及进展第16-18页
     ·PCR 技术原理第16-17页
     ·多重PCR 特点第17页
     ·多重PCR 应用于细菌检测的研究第17-18页
   ·研究目的和意义第18-19页
试验研究第19-46页
 第二章 牛乳中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌的分离第19-26页
   ·材料第19页
     ·菌株第19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要设备第19页
   ·方法第19-21页
     ·牛乳中金黄色葡萄球菌株的分离第19-20页
     ·牛乳中大肠杆菌菌株的分离第20-21页
     ·牛乳中产气荚膜梭菌菌株的分离第21页
   ·结果与分析第21-24页
     ·金黄色葡萄球菌的分离结果第21-22页
     ·大肠杆菌的分离鉴定结果第22-23页
     ·产气荚膜梭菌的分离鉴定结果第23-24页
   ·讨论第24-25页
     ·乳中金黄色葡萄球菌菌株的分离第24页
     ·乳中大肠杆菌菌株的分离第24页
     ·乳中产气荚膜梭菌菌株的分离第24-25页
   ·小结第25-26页
 第三章 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌的PCR 检测第26-43页
   ·材料第26页
     ·主要试剂第26页
     ·主要仪器第26页
   ·方法第26-30页
     ·细菌的培养第26页
     ·模板DNA 的提取第26-27页
     ·引物设计第27-28页
     ·多重PCR 反应条件的优化第28页
     ·多重PCR 反应的特异性检测第28页
     ·PCR 反应的敏感性检测第28-29页
     ·多重PCR 反应产物检测第29页
     ·模板的不同提取方法比较第29-30页
   ·结果与分析第30-39页
     ·单一的PCR 检测结果第30-31页
     ·PCR 产物测序结果第31-34页
     ·多重PCR 反应条件的优化结果第34-37页
     ·多重PCR 反应特异性结果第37页
     ·单一PCR 扩增的敏感性结果第37-39页
     ·多重PCR 扩增的敏感性结果第39页
     ·不同的模板提取方法的比较结果第39页
   ·讨论第39-42页
     ·多重PCR 各种反应参数优化第40-41页
     ·特异性及敏感性分析第41页
     ·DNA 模板的提取方法第41-42页
   ·小结第42-43页
 第四章 多重PCR 方法检测牛乳中三种致病菌的实用性测定第43-46页
   ·材料第43页
     ·菌株第43页
     ·主要培养基第43页
     ·主要试剂第43页
     ·主要仪器第43页
   ·方法第43-44页
     ·确定单一PCR 和多重PCR 对人工污染牛乳的检出限第43-44页
     ·多重PCR 方法与常规方法同时检测实际样品进行对比第44页
   ·结果与分析第44-45页
     ·人工污染牛乳测定检出限第44页
     ·多重PCR 方法与常规方法同时检测实际样品进行对比第44-45页
   ·讨论第45页
     ·人工污染牛乳测定检出限第45页
     ·与传统检测方法的比较第45页
     ·假阳性问题第45页
   ·小结第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-53页
附录第53-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页

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