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诊治法布莱氏病的单抗及重组蛋白的研制

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
前言第10-13页
第一章 抗人α—半乳糖苷酶单克隆抗体的制备及应用第13-34页
   ·实验材料与仪器第13-14页
   ·实验方法第14-23页
     ·抗原表位分析第14-15页
       ·抗原表位分析第14页
       ·多肽合成及交联第14-15页
     ·免疫小鼠第15页
     ·杂交瘤细胞制备第15-16页
     ·细胞融合后的筛选与鉴定第16-18页
     ·小鼠单抗腹水的制备及纯化第18-19页
     ·单克隆抗体的性质鉴定第19-21页
     ·单克隆抗体的应用第21-23页
   ·实验结果第23-30页
     ·合成肽的鉴定结果第23-24页
     ·细胞融合的结果第24页
       ·间接ELISA法筛选结果第24页
     ·亚克隆结果第24页
     ·杂交瘤细胞染色体核型分析第24-25页
     ·杂交瘤细胞株分泌抗体稳定性分析第25页
     ·单抗亚型的鉴定结果第25-26页
     ·单抗腹水制备及纯化第26-27页
     ·单抗效价的测定第27页
     ·单抗特异性鉴定第27页
     ·单抗亲和力测定第27-28页
     ·间接ELISA及酶活性测定第28-30页
   ·讨论第30-32页
   ·小结第32-34页
第二章 重组人α-半乳糖苷酶A在毕赤酵母中的表达及鉴定第34-49页
   ·实验材料与仪器第35页
   ·实验方法第35-40页
     ·人α-半乳糖苷酶A cDNA的克隆第35-37页
     ·人α-半乳糖苷酶A基因表达质粒的构建与分析第37页
     ·电穿孔法转化毕赤酵母GS115菌株第37-38页
     ·重组人α-半乳糖苷酶表达菌株的筛选第38页
     ·重组人α-半乳糖苷酶表达菌株的诱导表达第38-39页
     ·重组人α-半乳糖苷酶表达产物的免疫印迹第39页
     ·重组人α-半乳糖苷酶A活性测定第39-40页
   ·实验结果第40-47页
     ·人α-半乳糖苷酶cDNA的克隆第40-42页
     ·重组人α-半乳糖苷酶基因真核表达质粒的构建第42-44页
     ·重组人α-半乳糖苷酶A基因转化子的获得第44页
     ·重组人α-半乳糖苷酶表达菌株的筛选第44-45页
     ·重组人α-半乳糖苷酶表达菌株的诱导表达第45页
     ·重组人α-半乳糖苷酶表达产物的免疫印迹第45-46页
     ·重组人α-半乳糖苷酶活性测定第46-47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-49页
总结第49-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
附录1、已发表的相关论文第58-59页
综述第59-70页

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