| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-27页 |
| 1.1 乳酸菌及其表达系统 | 第12-19页 |
| 1.1.1 乳酸菌概述 | 第12页 |
| 1.1.2 乳酸菌食品级表达系统 | 第12-13页 |
| 1.1.3 乳链菌肽（Nisin） | 第13-14页 |
| 1.1.4 Nisin 基因簇的结构与功能分析 | 第14-16页 |
| 1.1.5 Nisin 抗性筛选标记 | 第16-17页 |
| 1.1.6 分泌信号 | 第17-18页 |
| 1.1.7 乳酸菌系统应用瓶颈 | 第18-19页 |
| 1.2 β-葡萄糖苷酶 | 第19-23页 |
| 1.2.1 β-葡萄糖苷酶的来源以及特性 | 第19-20页 |
| 1.2.2 β-葡萄糖苷酶的应用 | 第20-21页 |
| 1.2.3 酵母表达系统 | 第21-23页 |
| 1.3 超氧化物歧化酶 | 第23-25页 |
| 1.3.1 SOD 活性测定 | 第23-24页 |
| 1.3.2 SOD 应用 | 第24-25页 |
| 1.4 本文研究意义以及内容 | 第25-27页 |
| 第二章 棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶的乳酸乳球菌食品级分泌表达 | 第27-54页 |
| 2.1 材料 | 第27-30页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第27页 |
| 2.1.2 试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 培养基 | 第28页 |
| 2.1.4 主要试剂配方 | 第28-30页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-43页 |
| 2.2.1 质粒 pMD20-Usp45-Abgl-NisI 构建 | 第30-37页 |
| 2.2.2 质粒 pMG36e-Usp45-Abgl-NisI 构建 | 第37-38页 |
| 2.2.3 重组菌 L.lactis MG1363/pMG36e-Usp45-Abgl-NisI 构建 | 第38-39页 |
| 2.2.4 食品级重组菌 L.lactis MG1363/pMG36N-Usp45-Abgl-NisI 构建 | 第39-40页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE | 第40-41页 |
| 2.2.6 酶活测定 | 第41页 |
| 2.2.7 RT-PCR | 第41-43页 |
| 2.3 结果与分析 | 第43-51页 |
| 2.3.1 质粒 pMD20-Usp45-Abgl-NisI 构建 | 第43-46页 |
| 2.3.2 重组菌 E.coli XL1-Blue/pMG36e-Usp45-Abgl-NisI 构建 | 第46-48页 |
| 2.3.3 重组菌 L. lactis MG1363/pMG36e-Usp45-Abgl-NisI 构建 | 第48页 |
| 2.3.4 重组菌 L.lactis MG1363/pMG36N-Usp45-Abgl-NisI 构建 | 第48页 |
| 2.3.5 SDS-PAGE 分析以及酶活测定 | 第48-50页 |
| 2.3.6 RT-PCR | 第50-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-53页 |
| 2.4.1 质粒 pMG36e-Usp45-Abgl-NisI 翻译偶联调控 | 第51页 |
| 2.4.2 乳酸乳球菌系统表达优点 | 第51-52页 |
| 2.4.3 乳酸菌密码子偏好性 | 第52页 |
| 2.4.4 重组蛋白活性 | 第52-53页 |
| 2.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 第三章 嗜盐四联球菌超氧化物歧化酶 SOD 的乳酸乳球菌表达 | 第54-71页 |
| 3.1 材料 | 第54-55页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第54页 |
| 3.1.2 试剂 | 第54页 |
| 3.1.3 培养基 | 第54-55页 |
| 3.1.4 主要试剂配方 | 第55页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-62页 |
| 3.2.1 质粒 pMD18-SOD 构建 | 第55-58页 |
| 3.2.2 质粒 pMG36e-SOD 构建 | 第58-59页 |
| 3.2.3 重组菌 L.lactis MG1363/pMG36e-SOD 构建 | 第59-60页 |
| 3.2.4 SOD 酶活的测定 | 第60-61页 |
| 3.2.5 SDS-PAGE | 第61-62页 |
| 3.2.6 耐氧性检测 | 第62页 |
| 3.2.7 RT-PCR | 第62页 |
| 3.3 结果 | 第62-69页 |
| 3.3.1 基因片段的扩增 | 第62-63页 |
| 3.3.2 质粒 pMD20-SOD 构建 | 第63-65页 |
| 3.3.3 质粒 pMG36e-SOD 构建 | 第65-66页 |
| 3.3.4 重组菌 L.lactis MG1363/pMG36e-SOD 构建 | 第66页 |
| 3.3.5 重组菌 SDS-PAGE 分析 | 第66-67页 |
| 3.3.6 SOD 酶活的测定 | 第67页 |
| 3.3.7 耐氧性分析 | 第67-68页 |
| 3.3.8 RT-PCR | 第68-69页 |
| 3.4 讨论 | 第69-70页 |
| 3.4.1 乳酸乳球菌质粒提取方法的改良 | 第69页 |
| 3.4.2 融合超氧化物歧化酶 SOD 蛋白在乳酸乳球菌中的表达分析 | 第69-70页 |
| 3.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 结论与展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 附录 | 第83-88页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 附件 | 第90页 |
