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猪皮胶原多肽增加骨密度作用机制及其对骨生物力学性质影响

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-12页
1 绪论第18-29页
    1.1 明胶概述第18-20页
        1.1.1 明胶的性质与结构第18-19页
        1.1.2 明胶的应用及功能研究现状第19-20页
    1.2 胶原多肽第20-22页
        1.2.1 胶原多肽的功能第20-21页
        1.2.2 胶原多肽的制备方法第21-22页
    1.3 补钙及补钙制剂的研究进展第22-27页
        1.3.1 钙的生理功能第22页
        1.3.2 我国居民钙摄入情况第22-24页
        1.3.3 钙缺乏对人体的影响第24-25页
        1.3.4 钙与骨质疏松的关系第25-26页
        1.3.5 市场主流补钙制剂状况第26-27页
    1.4 研究的背景、目的与意义第27-28页
    1.5 本课题研究的主要内容第28-29页
2 猪皮明胶成分分析及酶解条件优化第29-57页
    2.1 引言第29-30页
    2.2 试验材料第30-31页
        2.2.1 试验原料第30页
        2.2.2 试验仪器与设备第30-31页
        2.2.3 试验试剂第31页
    2.3 试验方法第31-37页
        2.3.1 明胶中蛋白质含量的测定第31页
        2.3.2 明胶的氨基酸组成分析第31-32页
        2.3.3 明胶的pH值测定第32页
        2.3.4 猪皮明胶酶解过程第32页
        2.3.5 水解度的测定方法第32页
        2.3.6 羟脯氨酸含量的测定方法第32-33页
        2.3.7 蛋白回收率的测定第33页
        2.3.8 蛋白酶的筛选第33-34页
        2.3.9 单酶体系最佳酶解工艺优化第34-35页
        2.3.10 双酶体系酶解工艺优化第35-37页
        2.3.11 猪皮明胶酶解物聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析第37页
    2.4 结果与分析第37-54页
        2.4.1 明胶中蛋白质的含量第37页
        2.4.2 明胶的氨基酸组成分析第37-39页
        2.4.3 明胶的pH值第39页
        2.4.4 羟脯氨酸标准曲线的绘制第39页
        2.4.5 蛋白酶的筛选第39-40页
        2.4.6 单酶体系最佳酶解工艺优化第40-49页
        2.4.7 猪皮明胶单酶酶解物SDS-PAGE分析第49页
        2.4.8 双酶体系酶解工艺优化第49-53页
        2.4.9 猪皮明胶双酶体系酶解物SDS-PAGE分析第53-54页
    2.5 讨论第54-55页
    2.6 小结第55-57页
3 猪皮胶原多肽螯合钙的制备工艺第57-70页
    3.1 引言第57-58页
    3.2 材料与方法第58-61页
        3.2.1 试验原料第58页
        3.2.2 试验仪器与设备第58页
        3.2.3 试验试剂第58页
        3.2.4 试验方法第58-61页
    3.3 结果与分析第61-68页
        3.3.1 Plackett-Burman(PB)试验设计结果与分析第61-63页
        3.3.2 CCD优化设计结果与响应面分析第63-65页
        3.3.3 验证试验第65页
        3.3.4 紫外光谱(UV)分析第65-66页
        3.3.5 红外光谱(IR)分析第66-67页
        3.3.6 扫描电镜(SEM)分析第67页
        3.3.7 X衍射分析第67-68页
    3.4 讨论第68-69页
    3.5 小结第69-70页
4 L-羟脯氨酸-Ca的制备及配合机制第70-80页
    4.1 引言第70页
    4.2 材料与方法第70-73页
        4.2.1 试验原料第70页
        4.2.2 试验仪器与设备第70页
        4.2.3 试验试剂第70-71页
        4.2.4 试验方法第71-73页
    4.3 结果与分析第73-79页
        4.3.1 单因素试验结果第73-75页
        4.3.2 正交试验结果第75页
        4.3.3 紫外光谱(UV)分析第75-76页
        4.3.4 红外光谱(IR)分析第76-77页
        4.3.5 X衍射分析第77页
        4.3.6 扫描电镜(SEM)分析第77-78页
        4.3.7 元素分析第78页
        4.3.8 重量分析第78-79页
    4.4 讨论第79页
    4.5 小结第79-80页
5 CP-Ca与L-Hyp-Ca螯合活性分析第80-91页
    5.1 引言第80页
    5.2 材料与方法第80-84页
        5.2.1 试验原料及试验动物第80页
        5.2.2 试验仪器与设备第80-81页
        5.2.3 试验试剂第81页
        5.2.4 试验方法第81-84页
    5.3 结果与分析第84-89页
        5.3.1 CP-Ca与L-Hyp-Ca对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)清除能力的测定第84-85页
        5.3.2 不同样品对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)清除能力的测定第85页
        5.3.3 不同样品对羟基自由基(·OH)清除能力的测定第85-86页
        5.3.4 不同样品对超氧阴离子(O~(2-)·)抑制能力的测定第86-87页
        5.3.5 CP-Ca与L-Hyp-Ca对细胞存活率的测定第87页
        5.3.6 CP-Ca与L-Hyp-Ca促钙吸收转运试验第87-88页
        5.3.7 CP-Ca与L-Hyp-Ca体外模拟胃消化实验结果第88页
        5.3.8 CP-Ca与L-Hyp-Ca体外模拟肠消化试验结果第88-89页
    5.4 讨论第89-90页
    5.5 小结第90-91页
6 猪皮明胶、明胶水解物及多肽螯合钙增加大鼠骨密度和对大鼠骨组织生理学性能影响第91-105页
    6.1 引言第91-92页
    6.2 材料与方法第92-95页
        6.2.1 试验原料及试验动物第92页
        6.2.2 试验仪器与设备第92页
        6.2.3 试验试剂第92页
        6.2.4 试验方法第92-95页
    6.3 结果与分析第95-102页
        6.3.1 猪皮明胶和明胶水解物对大鼠体重和身长的影响第95-96页
        6.3.2 多肽螯合钙对大鼠体重和身长的影响第96页
        6.3.3 猪皮明胶和明胶水解物对大鼠血钙(S-Ca)、血磷(S-P)含量和碱性磷酸酶(ALP)活性影响第96-97页
        6.3.4 多肽螯合钙对大鼠血钙(S-Ca)、血磷(S-P)含量和碱性磷酸酶(ALP)活性影响第97-98页
        6.3.5 猪皮明胶和明胶水解物对大鼠骨密度(BMD)、骨钙含量和钙表观吸收率影响第98-99页
        6.3.6 多肽螯合钙对大鼠骨密度(BMD)、骨钙含量和钙表观吸收率影响第99-100页
        6.3.7 猪皮明胶和明胶水解物试验组大鼠股骨扫描电镜(SEM)分析第100-101页
        6.3.8 多肽螯合钙试验组大鼠股骨扫描电镜(SEM)分析第101-102页
        6.3.9 多肽螯合钙试验组大鼠股骨生物力学分析第102页
    6.4 讨论第102-104页
    6.5 小结第104-105页
7 ~(45)Ca标记胶原多肽螯合钙示踪体内运输路径及作用靶点第105-110页
    7.1 引言第105页
    7.2 材料与方法第105-107页
        7.2.1 试验原料及试验动物第105页
        7.2.2 试验仪器与设备第105页
        7.2.3 试验试剂第105-106页
        7.2.4 试验方法第106-107页
    7.3 结果与分析第107-108页
        7.3.1 大鼠不同组织钙离子沉积和钙离子含量测定第107页
        7.3.2 胶原多肽螯合钙在大鼠体内代谢试验第107-108页
    7.4 讨论第108-109页
    7.5 小结第109-110页
8 结论第110-112页
    8.1 结论第110-111页
    8.2 创新点第111页
    8.3 进一步工作第111-112页
致谢第112-113页
参考文献第113-125页
攻读学位期间发表的论文目录第125-126页

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