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乙醛脱氢酶用于解酒功能的商品化剂型研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第1章 文献综述第12-32页
    1.1 酒精及其代谢第12-14页
        1.1.1 乙醇脱氢酶(ADH)第13-14页
        1.1.2 乙醛脱氢酶(ALDH)第14页
    1.2 ALDH基因多态性第14-16页
    1.3 ALDH2基因多样性的分布第16-17页
    1.4 ALDH2基因多样性与主要疾病的关系第17-23页
        1.4.1 ALDH2基因多样性与酒精性疾病的关系第17-18页
        1.4.2 ALDH2基因多样性与口腔鳞状细胞癌的关系第18页
        1.4.3 ALDH2基因多样性与肝癌之间的关系第18-19页
        1.4.4 ALDH2基因多样性、饮酒、胃癌三者之间的关系第19-20页
        1.4.5 ALDH2基因多样性与心力衰竭的关系第20-21页
        1.4.6 ALDH2基因多样性与动脉粥样硬化之间的关联第21页
        1.4.7 ALDH2基因多样性与冠心病之间的关联第21页
        1.4.8 ALDH2基因多样性与高血压之间的关系第21-22页
        1.4.9 ALDH2和ADH基因多样性与结直肠癌三者之间的关系第22-23页
    1.5 ALDH2基因的克隆与表达研究现状第23-27页
        1.5.1 利用原核表达载体克隆并表达ALDH2第23-24页
        1.5.2 利用真核表达载体克隆并表达ALDH2第24-27页
            1.5.2.1 ALDH在植物中的研究第24-25页
            1.5.2.2 ALDH2 基因在毕赤酵母菌中的研究第25-26页
            1.5.2.3 ALDH2 基因在昆虫细胞中的研究第26-27页
    1.6 解酒产品的研究现状第27-28页
        1.6.1 以中草药为主要成分的解酒产品第27-28页
        1.6.2 以氨基酸衍生物、多肽类为主要成分的解酒产品第28页
    1.7 本文的研究内容第28-32页
第2章 材料与方法第32-44页
    2.1 实验材料与试剂第32页
    2.2 实验仪器与设备第32页
    2.3 溶剂的配制第32-38页
        2.3.1 培养基的配制第32-33页
        2.3.2 氨苄青霉素及IPTG的配方第33-34页
        2.3.3 包涵体蛋白质纯化所需溶剂第34-35页
        2.3.4 梯度pH溶液的配制第35-36页
        2.3.5 金属离子溶液的配制第36-37页
        2.3.6 酶活测定体系所需溶液的配制第37页
        2.3.7 人工胃液、胰液的配制第37-38页
        2.3.8 蛋白质SDS-PAGE电泳凝胶、染色液、脱色液的配制第38页
    2.4 实验方法第38-44页
        2.4.1 原核表达重组菌pET32a-ALDH2摇瓶发酵第38-39页
        2.4.2 ALDH2包涵体蛋白的纯化工艺改进第39页
        2.4.3 ALDH2酶活性检测第39-41页
        2.4.4 常见金属离子对ALDH2酶活性的影响第41页
        2.4.5 ALDH2蛋白含量的测定第41-42页
        2.4.6 ALDH2真空冷冻干燥成粉末第42页
        2.4.7 ALDH2在模拟的胃液、胰液中的稳定性探究第42-43页
        2.4.8 SDS-PAGE凝胶电泳检测ALDH2的稳定性第43页
        2.4.9 山梨酸钾对ALDH2酶活性保持的影响及贮存条件探究第43-44页
第3章 结果与分析第44-68页
    3.1 ALDH2复性工艺改进第44页
    3.2 ALDH2在真空冷冻干燥前后的酶活变化第44-47页
    3.3 单因素金属离子对ALDH2酶活性的影响第47-52页
    3.4 双因素金属离子对ALDH2酶活性的影响第52-57页
    3.5 ALDH2在人工模拟的胃液中的稳定性研究第57-62页
    3.6 ALDH2在人工模拟的胰液中的稳定性研究第62-66页
    3.7 山梨酸钾对ALDH2酶活性保持的影响第66-67页
    3.8 液态ALDH2剂型的贮存条件研究第67-68页
第4章 结论与建议第68-72页
    4.1 结论第68-69页
    4.2 建议第69-72页
参考文献第72-78页
攻读硕士期间已发表的论文第78-80页
致谢第80-81页

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