| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| 1.1 稀有糖简述 | 第7-9页 |
| 1.1.1 D-阿洛酮糖 | 第7-8页 |
| 1.1.2 L-塔格糖 | 第8-9页 |
| 1.2 D-阿洛酮糖合成相关酶 | 第9-11页 |
| 1.2.1 D-阿洛酮糖-3-差向异构酶 | 第9页 |
| 1.2.2 L-鼠李树胶糖激酶 | 第9-10页 |
| 1.2.3 多聚磷酸盐激酶 | 第10-11页 |
| 1.3 全细胞催化技术 | 第11页 |
| 1.4 本论文的研究意义和主要研究内容 | 第11-13页 |
| 1.4.1 本论文的研究意义 | 第11-12页 |
| 1.4.2 本论文的主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-17页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第13页 |
| 2.1.2 酶、试剂及耗材 | 第13-14页 |
| 2.1.3 培养基及相关溶液配制 | 第14-16页 |
| 2.1.4 主要设备和仪器 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-27页 |
| 2.2.1 大肠杆菌高效感受态的制备 | 第17页 |
| 2.2.2 大肠杆菌质粒转化 | 第17-18页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.4 重组质粒pET28a-rhaB的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.5 RhaB、DPE(DTE)的表达纯化以及全细胞的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.6 酶活测定 | 第21-23页 |
| 2.2.7 酶活检测方法 | 第23-24页 |
| 2.2.8 RhaB的酶学性质研究 | 第24页 |
| 2.2.9 DPE和RhaB纯酶偶联体系的条件优化 | 第24-25页 |
| 2.2.10 DPE和RhaB偶联体系全细胞反应的条件优化 | 第25页 |
| 2.2.11 DPE、RhaB及PPK偶联体系全细胞反应的条件优化 | 第25页 |
| 2.2.12 生产D-阿洛酮糖相关反应体系的构建 | 第25-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-43页 |
| 3.1 L-鼠李树胶糖激酶的表达及活性测定 | 第27-30页 |
| 3.1.1 重组质粒pET28a-rhaB的构建 | 第27页 |
| 3.1.2 RhaB酶的表达 | 第27-28页 |
| 3.1.3 RhaB酶的活性分析 | 第28-29页 |
| 3.1.4 RhaB的酶学性质 | 第29-30页 |
| 3.2 DPE和RhaB的偶联体系在D-阿洛酮糖合成中的应用 | 第30-36页 |
| 3.2.1 偶联体系中重组质粒的构建 | 第30-31页 |
| 3.2.2 DPE和RhaB酶的共表达 | 第31-32页 |
| 3.2.3 DPE和RhaB偶联体系的酶活测定 | 第32-33页 |
| 3.2.4 DPE和RhaB偶联体系的条件优化 | 第33-34页 |
| 3.2.5 全细胞反应体系的构建 | 第34-35页 |
| 3.2.6 全细胞反应条件的优化 | 第35-36页 |
| 3.3 多聚磷酸盐激酶在全细胞转化中的应用 | 第36-40页 |
| 3.3.1 全细胞反应体系中重组质粒的构建 | 第37页 |
| 3.3.2 DPE、RhaB以及PPK酶的共表达 | 第37-38页 |
| 3.3.3 DPE、RhaB以及PPK多酶偶联体系的酶活测定 | 第38-39页 |
| 3.3.4 全细胞反应条件的优化 | 第39-40页 |
| 3.4 L-鼠李树胶糖激酶在其他稀有糖合成中的应用 | 第40-43页 |
| 3.4.1 RhaB的底物特异性分析 | 第40-41页 |
| 3.4.2 RhaB在L-塔格糖合成中的应用 | 第41-43页 |
| 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 主要结论 | 第43-44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的文章 | 第49页 |
