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灰树花多糖降血糖活性及作用机理的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 前言第9-19页
   ·灰树花第9-14页
     ·灰树花简介第9页
     ·灰树花国内外研究第9-10页
     ·灰树花多糖的研究进展第10-11页
     ·灰树花多糖的提取、分离与纯化第11-12页
     ·灰树花多糖的生物活性第12-14页
   ·糖尿病的简述第14-15页
     ·糖尿病的概念第14页
     ·糖尿病的分类第14-15页
     ·糖尿病的治疗现状第15页
   ·胰岛素及胰岛素抵抗第15-17页
     ·胰岛素生物学特性第15页
     ·胰岛素信号传导通路第15-16页
     ·胰岛素抵抗第16页
     ·胰岛素抵抗的病因第16页
     ·胰岛素抵抗的预防及治疗第16-17页
   ·HepG_2细胞株第17-18页
   ·研究的目的和意义第18页
   ·本论文的主要研究内容第18-19页
2 材料和方法第19-33页
   ·实验材料第19-24页
     ·菌种与细胞株第19页
     ·实验药品第19-21页
     ·仪器与设备第21-23页
     ·主要培养基第23页
     ·所需溶液的配制第23-24页
   ·实验方法第24-33页
     ·灰树花深沉液体发酵培养第24页
     ·灰树花胞外多糖的醇提第24页
     ·灰树花降血糖胞外多糖的分离纯化第24-25页
     ·苯酚硫酸法测定GFP糖含量第25-26页
     ·GFP抑制α-葡糖糖苷酶活性的检测第26页
     ·高活性组分的纯度鉴定第26-27页
     ·GFP-2的理化性质第27-28页
     ·HepG_2细胞体外培养第28页
     ·HepG_2细胞胰岛素抵抗细胞模型的建立第28-30页
     ·GFP-2对模型细胞糖原代谢的影响第30页
     ·胞内丙酮酸激酶的测定第30页
     ·HepG_2胞内蛋白抽提实验第30-31页
     ·免疫印迹实验第31-33页
3 结果与讨论第33-51页
   ·灰树花深层发酵多级培养第33-35页
     ·灰树花种子分级培养第33页
     ·灰树花最佳培养发酵条件的选择第33-35页
   ·灰树花胞外多糖的分离纯化第35-37页
     ·灰树花胞外多糖的提取第35页
     ·灰树花多糖除蛋白第35-36页
     ·灰树花多糖的脱色第36页
     ·灰树花胞外多糖分级第36页
     ·GFP糖含量的测定第36-37页
   ·GFP降血糖活性组分的筛选第37-40页
     ·GFP对α-葡萄糖苷酶的抑制第37-38页
     ·葡萄糖凝胶分离GFP-B组分中的活性成分第38-39页
     ·GFP-2组分纯度的鉴定第39-40页
   ·GFP-2理化性质分析第40-41页
     ·物理性质第40页
     ·化学性质第40页
     ·红外光谱定性分析第40-41页
   ·胰岛素抵抗细胞模型的建立第41-43页
     ·胰岛素浓度和作用时间的确定第41-42页
     ·HepG_2细胞胰岛素抵抗模型持续时间第42-43页
     ·HepG_2胰岛素抵抗模型细胞HE染色第43页
   ·GFP活性机理的研究第43-45页
     ·GFP缓解模型细胞胰岛素抵抗能力的检测第43-44页
     ·GFP-2对模型细胞增殖的影响第44-45页
     ·GFP-2缓解模型细胞胰岛素抵抗的检测第45页
   ·GFP-2缓解HepG_2细胞胰岛素抵抗信号通路蛋白的检测第45-51页
     ·免疫印迹分析PI3k蛋白表达第45-46页
     ·免疫印迹分析Akt蛋白的表达第46页
     ·免疫印迹分析葡萄糖6磷酸酶蛋白的表达第46-47页
     ·GFP-2对模型细胞内糖酵解关键酶活性的检测第47-48页
     ·PAS染色方法检测细胞内糖原含量第48-49页
     ·GFP-2对胞内糖原变化的检测第49页
     ·免疫印迹分析GSK-3蛋白的表达第49-51页
4 结论第51-52页
5 展望第52-53页
6 参考文献第53-60页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第60-61页
8 致谢第61页

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