| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 缩写符号 | 第16-20页 |
| 前言 | 第20-22页 |
| 上篇 文献综述 | 第22-52页 |
| 第一章 宰后肌肉内环境的变化及肌细胞的死亡 | 第22-30页 |
| 1. 宰后肌肉内环境的变化 | 第22页 |
| 2. 细胞的死亡 | 第22-25页 |
| ·凋亡与坏死 | 第22-23页 |
| ·细胞凋亡路径 | 第23-25页 |
| 3. 宰后内环境促使肌细胞在成熟早期凋亡 | 第25-30页 |
| ·宰后肌细胞发生凋亡的理论可能性 | 第25-26页 |
| ·肌细胞缺氧与细胞凋亡 | 第25页 |
| ·宰后肌肉结构变化与细胞凋亡 | 第25页 |
| ·宰后肌肉pH值变化与细胞凋亡 | 第25-26页 |
| ·电刺激与细胞凋亡 | 第26页 |
| ·宰后肌细胞的死亡方式 | 第26-30页 |
| ·细胞凋亡的主要检测方法 | 第26-27页 |
| ·宰后肌细胞的死亡 | 第27-30页 |
| 第二章 细胞凋亡效应酶在肌肉成熟中的作用 | 第30-38页 |
| 1. 影响宰后嫩度变化的主要肌肉蛋白 | 第30-32页 |
| ·伴肌球蛋白 | 第30页 |
| ·伴肌动蛋白 | 第30-31页 |
| ·肌间线蛋白 | 第31页 |
| ·肌钙蛋白-T及其降解产物 | 第31-32页 |
| 2. 肌肉中的主要内源酶系统 | 第32-34页 |
| ·溶酶体组织蛋白酶类 | 第32-33页 |
| ·蛋白酶体 | 第33页 |
| ·钙激活酶 | 第33-34页 |
| ·细胞凋亡酶类 | 第34页 |
| 3. 细胞凋亡效应酶在肉成熟中的作用 | 第34-38页 |
| ·细胞凋亡酶及凋亡相关因子与嫩度的相关性研究 | 第35页 |
| ·凋亡效应剂对肌原纤维蛋白降解及肌纤维结构的影响 | 第35-36页 |
| ·凋亡效应酶对肌原纤维蛋白的体外降解 | 第36-38页 |
| 第三章 细胞凋亡酶与钙激活酶的相互作用 | 第38-44页 |
| 1. 钙激活酶和细胞凋亡酶的特性 | 第38-40页 |
| ·钙激活酶的结构及激活 | 第38-40页 |
| ·细胞凋亡酶的结构及激活 | 第40页 |
| 2. 钙激活酶和细胞凋亡酶的底物特异性 | 第40-41页 |
| 3. 钙激活酶和细胞凋亡酶之间的相互作用 | 第41-42页 |
| ·钙激活酶和凋亡酶之间的直接相互作用 | 第41-42页 |
| ·钙激活酶和凋亡酶之间的间接相互作用 | 第42页 |
| 4. 钙激活酶和细胞凋亡酶在肉的宰后成熟过程中的交互作用 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 下篇 研究报告 | 第52-132页 |
| 第一章 凋亡效应酶3和钙激活酶抑制剂对宰后牛肉肌原纤维蛋白降解的影响 | 第52-68页 |
| 1. 材料与方法 | 第52-55页 |
| ·实验材料与仪器 | 第52-53页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·原料样品准备 | 第53页 |
| ·钙激活酶的提取与活性电泳样品制备 | 第53-54页 |
| ·肌原纤维蛋白的提取与电泳样品制备 | 第54页 |
| ·钙激活酶活性测定 | 第54页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第54-55页 |
| ·免疫印迹(Western-Blotting) | 第55页 |
| ·图像获取与分析 | 第55页 |
| ·统计分析 | 第55页 |
| 2. 结果分析与讨论 | 第55-64页 |
| ·伴肌球蛋白的降解 | 第56-57页 |
| ·伴肌动蛋白的降解 | 第57-59页 |
| ·肌钙蛋白-T的降解 | 第59-60页 |
| ·肌间线蛋白的降解 | 第60-62页 |
| ·钙激活酶活性 | 第62-64页 |
| 3. 结论 | 第64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 第二章 细胞凋亡效应酶3和6对牛肉肌原纤维蛋白的体外降解 | 第68-86页 |
| 1. 材料与方法 | 第69-71页 |
| ·实验材料与仪器 | 第69页 |
| ·实验材料 | 第69页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-71页 |
| ·原料样品准备 | 第69-70页 |
| ·肌原纤维蛋白的提取与纯化 | 第70页 |
| ·肌原纤维蛋白的体外降解 | 第70页 |
| ·变性聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第70页 |
| ·免疫印迹(Western-Blotting) | 第70页 |
| ·图像获取与分析 | 第70-71页 |
| ·统计分析 | 第71页 |
| 2. 结果分析 | 第71-79页 |
| ·伴肌球蛋白的体外降解 | 第71-73页 |
| ·伴肌动蛋白的体外降解 | 第73-75页 |
| ·凝胶电泳(12.5%)图谱中28和32kDa的降解片段 | 第75-78页 |
| ·肌间线蛋白的体外降解 | 第78-79页 |
| 3. 讨论 | 第79-81页 |
| 4. 结论 | 第81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 第三章 宰后牛肉成熟过程中Calpastatin的降解机制研究 | 第86-106页 |
| 1. 材料与方法 | 第86-90页 |
| ·实验材料与仪器 | 第86-87页 |
| ·实验材料 | 第86-87页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第87页 |
| ·实验方法 | 第87-90页 |
| ·原料样品准备 | 第87-88页 |
| ·肌裝蛋白提取 | 第88页 |
| ·凋亡效应酶3活性测定 | 第88页 |
| ·Calpastatin的提取与初步纯化 | 第88-89页 |
| ·Calpastatin的体外降解 | 第89页 |
| ·微摩尔钙激活酶对凋亡效应酶3的体外降解 | 第89页 |
| ·SDS-PAGE和Western-Blotting | 第89页 |
| ·图像获取与分析 | 第89-90页 |
| ·统计分析 | 第90页 |
| 2. 结果分析 | 第90-98页 |
| ·宰后牛肉成熟过程中calpastatin的降解 | 第90页 |
| ·凋亡效应酶3和钙激活酶抑制剂对calpastatin宰后降解的影响 | 第90-92页 |
| ·凋亡效应酶3、6和微摩尔钙激活酶对calpastatin的体外降解 | 第92-94页 |
| ·宰后牛肉成熟过程中凋亡效应酶3的表达和活性变化 | 第94-97页 |
| ·凋亡效应酶3表达量变化 | 第94-96页 |
| ·凋亡效应酶3活性变化 | 第96-97页 |
| ·宰后牛肉成熟过程中钙激活酶对凋亡效应酶3的影响 | 第97-98页 |
| ·钙激活酶抑制剂MDL对凋亡效应酶3活性的影响 | 第97-98页 |
| ·微摩尔钙激活酶对凋亡效应酶3的体外降解 | 第98页 |
| 3. 讨论 | 第98-101页 |
| 4. 结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-106页 |
| 第四章 宰后牛肉成熟过程中细胞凋亡酶及相关凋亡因子的变化 | 第106-120页 |
| 1. 材料与方法 | 第106-108页 |
| ·实验材料与仪器 | 第106-107页 |
| ·实验材料 | 第106页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第106-107页 |
| ·实验方法 | 第107-108页 |
| ·原料样品准备 | 第107页 |
| ·全胞浆蛋白提取 | 第107页 |
| ·凋亡效应酶3活性测定 | 第107页 |
| ·亚细胞分离 | 第107-108页 |
| ·变性聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第108页 |
| ·免疫印迹(Western-Blotting) | 第108页 |
| ·图像获取与分析 | 第108页 |
| ·统计分析 | 第108页 |
| 2. 结果分析 | 第108-114页 |
| ·宰后牛肉成熟过程中凋亡效应酶3的表达 | 第108-109页 |
| ·宰后牛肉成熟过程中细胞色素c的表达 | 第109-111页 |
| ·宰后牛肉成熟过程中Bcl-2的表达 | 第111-112页 |
| ·宰后牛肉成熟过程中Bax的表达 | 第112-113页 |
| ·宰后牛肉成熟过程中HSP27的表达 | 第113-114页 |
| 3. 讨论 | 第114-116页 |
| 4. 结论 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-120页 |
| 第五章 Ca~(2+)、Zn~(2+)处理对宰后牛肉成熟过程中细胞凋亡酶3及相关凋亡因子表达的影响 | 第120-132页 |
| 1. 材料与方法 | 第120-122页 |
| ·实验材料与仪器 | 第120-121页 |
| ·实验材料 | 第120页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第120-121页 |
| ·实验方法 | 第121-122页 |
| ·原料样品准备 | 第121页 |
| ·肌浆蛋白提取 | 第121页 |
| ·肌原纤维蛋白的提取与电泳样品制备 | 第121页 |
| ·SDS-PAGE和Western-Blotting | 第121-122页 |
| ·图像获取与分析 | 第122页 |
| ·统计分析 | 第122页 |
| 2. 结果分析 | 第122-128页 |
| ·Ca~(2+)和Zn~(2+)对宰后牛肉成熟的影响 | 第122-125页 |
| ·伴肌球蛋白和伴肌动蛋白 | 第122-123页 |
| ·肌钙蛋白-T | 第123-124页 |
| ·肌间线蛋白 | 第124-125页 |
| ·Ca~(2+)和Zn~(2+)对宰后牛肉储存过程中凋亡酶及相关因子的影响 | 第125-128页 |
| ·凋亡效应酶3的表达 | 第125-127页 |
| ·细胞色素c的表达 | 第127-128页 |
| 3. 讨论 | 第128-129页 |
| 4. 结论 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-132页 |
| 全文结论 | 第132-134页 |
| 创新说明 | 第134-136页 |
| 工作展望 | 第136-138页 |
| 致谢 | 第138-140页 |
| 在读期间已发表的文章 | 第140页 |
