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扩展青霉菌PCR快速检测方法研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-27页
   ·我国苹果及其产业的概况第13-14页
     ·苹果及其分布概述第13页
     ·苹果产业现状及存在问题第13-14页
   ·棒曲霉素第14-17页
     ·理化性质及危害第14-15页
     ·分析方法第15-17页
       ·微生物法第16页
       ·TLC 法第16页
       ·GC-MS 法第16页
       ·液相色谱法第16-17页
   ·扩展青霉第17-19页
     ·简述第17-18页
     ·检测方法第18-19页
   ·PCR第19-22页
     ·简介第19页
     ·基于 PCR 技术的方法第19-21页
       ·ITS-PCR第19-20页
       ·巢式 PCR第20页
       ·多重 PCR第20页
       ·实时 PCR第20-21页
       ·PCR-ELISA第21页
     ·PCR 扩增反应体系第21-22页
     ·PCR 技术的优缺点第22页
   ·真菌 DNA 提取第22-23页
     ·用于 PCR 检测的真菌基因组 DAN 提取方法第22-23页
   ·克隆测序第23-25页
     ·感受态细胞的制备第23-24页
     ·蓝白筛选的原理第24-25页
     ·电泳原理第25页
   ·研究目的和意义第25页
   ·技术路线第25-27页
第二章 扩展青霉基因组 DNA5 种提取方法比较第27-37页
   ·材料和仪器第27-29页
     ·实验菌株及培养基第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·主要仪器与设备第28页
     ·菌体培养及收集第28-29页
   ·方法和步骤第29-31页
     ·氯化苄法第29页
     ·蜗牛酶法第29页
     ·CTAB 法第29-30页
     ·SDS 法第30页
     ·异硫氰酸胍法第30页
     ·DNA 检测方法第30页
     ·PCR 扩增方法第30-31页
     ·凝胶电泳检测方法第31页
   ·结果与分析第31-35页
     ·培养方式的选择第31-32页
     ·5 种提取扩展青霉基因组 DNA 方法比较第32页
     ·5 种提取方法所提 DNA 结果比较第32-33页
     ·电泳检测所提 DNA 结果第33-34页
     ·PCR 扩增结果第34-35页
   ·小结与讨论第35-37页
     ·小结第35页
     ·讨论第35-37页
第三章 PCR 快速检测扩展青霉条件的优化第37-45页
   ·材料和仪器第37-38页
     ·主要原材料第37页
     ·主要实验试剂第37页
     ·主要仪器设备第37-38页
   ·方法与步骤第38-39页
     ·引物选择第38页
     ·退火温度的优化第38页
     ·引物浓度的选择第38页
     ·模板浓度的选择第38-39页
   ·结果与分析第39-43页
     ·引物的选择第39页
     ·退火温度优化第39-40页
     ·引物浓度优化第40-41页
     ·模板浓度的优化第41页
     ·特异性试验第41-42页
     ·灵敏性检测结果第42-43页
   ·小结与讨论第43-45页
     ·小结第43页
     ·讨论第43-45页
第四章 PCR 产物的克隆测序第45-52页
   ·材料和仪器第45-46页
     ·主要实验试剂第45页
     ·主要仪器设备第45-46页
   ·方法与步骤第46-48页
     ·感受态细胞的制备第46页
     ·PCR 扩增产物回收纯化第46页
     ·克隆质粒的构建第46-47页
     ·转化感受态细胞第47页
     ·质粒 DNA 制备第47-48页
     ·质粒的双酶切鉴定第48页
     ·测序第48页
   ·结果与分析第48-51页
     ·转化结果第48-49页
     ·阳性克隆鉴定结果第49-50页
     ·测序与 Blast 结果第50-51页
   ·小结与讨论第51-52页
     ·小结第51页
     ·讨论第51-52页
第五章 结论与创新点第52-53页
   ·结论第52页
   ·创新点第52-53页
参考文献第53-58页
缩略词表第58-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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