摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
·我国苹果及其产业的概况 | 第13-14页 |
·苹果及其分布概述 | 第13页 |
·苹果产业现状及存在问题 | 第13-14页 |
·棒曲霉素 | 第14-17页 |
·理化性质及危害 | 第14-15页 |
·分析方法 | 第15-17页 |
·微生物法 | 第16页 |
·TLC 法 | 第16页 |
·GC-MS 法 | 第16页 |
·液相色谱法 | 第16-17页 |
·扩展青霉 | 第17-19页 |
·简述 | 第17-18页 |
·检测方法 | 第18-19页 |
·PCR | 第19-22页 |
·简介 | 第19页 |
·基于 PCR 技术的方法 | 第19-21页 |
·ITS-PCR | 第19-20页 |
·巢式 PCR | 第20页 |
·多重 PCR | 第20页 |
·实时 PCR | 第20-21页 |
·PCR-ELISA | 第21页 |
·PCR 扩增反应体系 | 第21-22页 |
·PCR 技术的优缺点 | 第22页 |
·真菌 DNA 提取 | 第22-23页 |
·用于 PCR 检测的真菌基因组 DAN 提取方法 | 第22-23页 |
·克隆测序 | 第23-25页 |
·感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
·蓝白筛选的原理 | 第24-25页 |
·电泳原理 | 第25页 |
·研究目的和意义 | 第25页 |
·技术路线 | 第25-27页 |
第二章 扩展青霉基因组 DNA5 种提取方法比较 | 第27-37页 |
·材料和仪器 | 第27-29页 |
·实验菌株及培养基 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·主要仪器与设备 | 第28页 |
·菌体培养及收集 | 第28-29页 |
·方法和步骤 | 第29-31页 |
·氯化苄法 | 第29页 |
·蜗牛酶法 | 第29页 |
·CTAB 法 | 第29-30页 |
·SDS 法 | 第30页 |
·异硫氰酸胍法 | 第30页 |
·DNA 检测方法 | 第30页 |
·PCR 扩增方法 | 第30-31页 |
·凝胶电泳检测方法 | 第31页 |
·结果与分析 | 第31-35页 |
·培养方式的选择 | 第31-32页 |
·5 种提取扩展青霉基因组 DNA 方法比较 | 第32页 |
·5 种提取方法所提 DNA 结果比较 | 第32-33页 |
·电泳检测所提 DNA 结果 | 第33-34页 |
·PCR 扩增结果 | 第34-35页 |
·小结与讨论 | 第35-37页 |
·小结 | 第35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
第三章 PCR 快速检测扩展青霉条件的优化 | 第37-45页 |
·材料和仪器 | 第37-38页 |
·主要原材料 | 第37页 |
·主要实验试剂 | 第37页 |
·主要仪器设备 | 第37-38页 |
·方法与步骤 | 第38-39页 |
·引物选择 | 第38页 |
·退火温度的优化 | 第38页 |
·引物浓度的选择 | 第38页 |
·模板浓度的选择 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-43页 |
·引物的选择 | 第39页 |
·退火温度优化 | 第39-40页 |
·引物浓度优化 | 第40-41页 |
·模板浓度的优化 | 第41页 |
·特异性试验 | 第41-42页 |
·灵敏性检测结果 | 第42-43页 |
·小结与讨论 | 第43-45页 |
·小结 | 第43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第四章 PCR 产物的克隆测序 | 第45-52页 |
·材料和仪器 | 第45-46页 |
·主要实验试剂 | 第45页 |
·主要仪器设备 | 第45-46页 |
·方法与步骤 | 第46-48页 |
·感受态细胞的制备 | 第46页 |
·PCR 扩增产物回收纯化 | 第46页 |
·克隆质粒的构建 | 第46-47页 |
·转化感受态细胞 | 第47页 |
·质粒 DNA 制备 | 第47-48页 |
·质粒的双酶切鉴定 | 第48页 |
·测序 | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·转化结果 | 第48-49页 |
·阳性克隆鉴定结果 | 第49-50页 |
·测序与 Blast 结果 | 第50-51页 |
·小结与讨论 | 第51-52页 |
·小结 | 第51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
第五章 结论与创新点 | 第52-53页 |
·结论 | 第52页 |
·创新点 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
缩略词表 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |