摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
英文缩略表 | 第6-11页 |
1 前言 | 第11-23页 |
1.1 链格孢霉毒素概述 | 第11-13页 |
1.2 链格孢酚素简介 | 第13-14页 |
1.3 链格孢酚污染现状 | 第14-15页 |
1.4 链格孢酚毒素检测方法的研究现状 | 第15-21页 |
1.4.1 仪器检测法 | 第16-19页 |
1.4.2 免疫分析方法 | 第19-21页 |
1.5 研究目的与意义 | 第21页 |
1.6 本研究的主要内容及技术路线 | 第21-23页 |
1.6.1 研究内容 | 第21-22页 |
1.6.2 技术路线 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-38页 |
2.1 实验材料 | 第23-26页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂与耗材 | 第23-25页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-38页 |
2.2.1 AOH半抗原设计 | 第26-27页 |
2.2.2 AOH及其半抗原合成 | 第27-28页 |
2.2.3 半抗原鉴定 | 第28页 |
2.2.4 人工抗原的合成 | 第28-29页 |
2.2.5 人工抗原的鉴定 | 第29页 |
2.2.6 动物免疫 | 第29页 |
2.2.7 抗血清效果分析 | 第29-30页 |
2.2.8 多克隆抗体的纯化 | 第30-31页 |
2.2.9 链格孢酚ic ELISA方法的建立 | 第31-33页 |
2.2.10 链格孢酚ic CLEIA方法的建立 | 第33-36页 |
2.2.11 方法特异性 | 第36页 |
2.2.12 方法稳定性 | 第36页 |
2.2.13 实际样品的测定 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-82页 |
3.1 AOH半抗原/抗原合成设计及分析 | 第38-42页 |
3.1.1 理论计算 | 第38-41页 |
3.1.2 分子重合性 | 第41-42页 |
3.2 AOH及半抗原/抗原合成与鉴定 | 第42-47页 |
3.2.1 AOH合成及鉴定 | 第42-43页 |
3.2.2 AOH半抗原合成及鉴定 | 第43页 |
3.2.3 人工抗原合成及鉴定 | 第43-45页 |
3.2.4 人工抗原的鉴定 | 第45-47页 |
3.3 抗血清的鉴定及筛选 | 第47-48页 |
3.4 AOH-ICELISA方法的建立 | 第48-54页 |
3.4.1 棋盘法 | 第48页 |
3.4.2 包被原浓度 | 第48-49页 |
3.4.3 抗体浓度 | 第49-50页 |
3.4.4 反应缓冲液PH值 | 第50页 |
3.4.5 反应缓冲液 | 第50-51页 |
3.4.6 吐温含量 | 第51页 |
3.4.7 缓冲液离子浓度 | 第51-52页 |
3.4.8 二抗稀释液 | 第52页 |
3.4.9 二抗反应时间 | 第52-53页 |
3.4.10 二抗稀释倍数 | 第53-54页 |
3.4.11 AOH-ic ELISA方法标准曲线的建立 | 第54页 |
3.5 方法评价 | 第54-64页 |
3.5.1 特异性 | 第54-56页 |
3.5.2 稳定性试验 | 第56-57页 |
3.5.3 实际样品 | 第57-59页 |
3.5.4 基质效应的消除 | 第59-60页 |
3.5.5 样品添加回收实验 | 第60-61页 |
3.5.6 HPLC-MS/MS与ic ELISA检测结果对比 | 第61-64页 |
3.6 AOH-ic CLEIA 方法的建立 | 第64-72页 |
3.6.1 棋盘法 | 第64-65页 |
3.6.2 包被原浓度 | 第65-66页 |
3.6.3 抗体浓度 | 第66-67页 |
3.6.4 竞争反应时间 | 第67页 |
3.6.5 反应缓冲液 pH 值 | 第67-68页 |
3.6.6 反应缓冲液 | 第68页 |
3.6.7 缓冲液吐温含量 | 第68-69页 |
3.6.8 缓冲液离子浓度 | 第69-70页 |
3.6.9 二抗稀释液 | 第70页 |
3.6.10 二抗反应时间 | 第70-71页 |
3.6.11 二抗稀释倍数 | 第71页 |
3.6.12 AOH-ic CLEIA方法标准曲线的建立 | 第71-72页 |
3.7 AOH-ic CLEIA方法评价 | 第72-82页 |
3.7.1 特异性 | 第72-74页 |
3.7.2 稳定性试验 | 第74-75页 |
3.7.3 实际样品 | 第75-77页 |
3.7.4 基质效应的消除 | 第77-78页 |
3.7.5 样品添加回收实验 | 第78-79页 |
3.7.6 HPLC-MS/MS与ICCLEIA检测结果对比 | 第79-82页 |
4 讨论与结论 | 第82-89页 |
4.1 讨论 | 第82-87页 |
4.1.1 半抗原/抗原设计对抗体质量的影响 | 第82-84页 |
4.1.2 衍生手臂接入位点 | 第84-85页 |
4.1.3 免疫方法的理化参数优化 | 第85页 |
4.1.4 前处理优化 | 第85-86页 |
4.1.5 两种快速免疫方法与其他免疫方法的比较 | 第86-87页 |
4.2 结论 | 第87-88页 |
4.3 创新点 | 第88页 |
4.4 展望 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-95页 |
附录 作者攻读硕士学位期间发表论文和专利情况 | 第95-96页 |
附图 | 第96-99页 |