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南美白对虾中常见食源性致病菌快速检测技术及分子预测微生物模型的构建

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
英文缩写词表第9-13页
第一章 文献综述第13-19页
 1 研究背景第13页
 2. 常见食源性致病菌及其生物学特性第13-15页
   ·副溶血性弧菌第13-14页
   ·单增李斯特菌第14-15页
   ·沙门氏菌第15页
 3 食源性致病菌分子生物学检测技术研究进展第15-16页
   ·实时荧光PCR方法第15-16页
   ·DNA探针技术第16页
 4 食源性致病菌预测微生物学模型研究进展第16-19页
   ·预测微生物学的定义第16页
   ·预测微生物学模型的类型第16-17页
   ·预测微生物学模型的发展与展望第17-19页
第二章 生鲜南美白对虾中副溶血性弧菌、单增李斯特菌及沙门氏菌快速检测方法的构建第19-32页
 1. 引言第19-20页
 2. 材料与方法第20-25页
   ·试验菌株和培养条件第20-21页
   ·南美白对虾样品的准备第21-22页
   ·DNA的提取第22页
   ·多重实时荧光PCR引物和探针的设计第22-23页
   ·多重实时荧光PCR体系的建立第23页
   ·多重实时荧光PCR标准曲线及扩增效率的构建第23-24页
   ·多重实时荧光PCR最低检测限(LOD)的评估第24页
   ·多重实时荧光PCR应用于实际样品的检测第24-25页
 3. 结果第25-28页
   ·多重实时荧光PCR的特异性第25页
   ·多重实时荧光PCR的标准曲线及扩增效率第25-27页
   ·多重实时荧光PCR的最低检测限(LOD)第27-28页
   ·比较传统方法与多重实时荧光PCR应用于实际样品检测的差异第28页
 4. 讨论第28-29页
 5. 结论第29-31页
 6. 本章小结第31-32页
第三章 生鲜南美白对虾中副溶血性弧菌及单增李斯特菌活菌定量方法的构建第32-51页
 1. 引言第32-33页
 2. 材料与方法第33-39页
   ·试验菌株和培养条件第33-35页
   ·副溶血性弧菌及单增李斯特菌死菌的制备第35页
   ·叠氮溴化丙锭处理条件的优化第35页
   ·DNA的提取第35页
   ·多重实时荧光PCR体系的建立第35-36页
   ·南美白对虾样品的准备第36-37页
   ·PMA多重实时荧光PCR标准曲线及扩增效率的构建第37页
   ·PMA多重实时荧光PCR区分死活菌效率的评估第37页
   ·PMA多重实时荧光PCR的相对敏感性、相对特异性、相对精密度的评价第37-38页
   ·PMA多重实时荧光PCR应用于描述 4°C条件下两株菌的行为变化第38-39页
   ·数据分析第39页
 3. 结果第39-47页
   ·叠氮溴化丙锭最佳处理条件的确定第39-40页
   ·PMA多重实时荧光PCR的特异性第40页
   ·PMA多重实时荧光PCR的定量限及扩增效率第40-41页
   ·PMA多重实时荧光PCR区分死活菌的效率第41-44页
   ·PMA多重实时荧光PCR的相对敏感性、相对特异性、相对精密度第44页
   ·PMA多重实时荧光PCR应用于描述 4°C条件下两株菌的行为变化第44-47页
 4. 讨论第47-49页
 5. 结论第49-50页
 6. 本章小结第50-51页
第四章 采收后生鲜南美白对虾中自然存在的副溶血性弧菌分子预测微生物学模型的建立与验证第51-64页
 1. 引言第51-52页
 2. 材料与方法第52-55页
   ·生鲜南美白对虾的采收和贮藏第52页
   ·生鲜南美白对虾的处理第52页
   ·副溶血性弧菌的活菌定量第52-54页
     ·PMA前处理流程第52-53页
     ·DNA的提取第53页
     ·PMA实时荧光PCR活菌定量方法第53页
     ·标准曲线的构建第53-54页
   ·一级模型与二级模型的构建第54页
     ·一级模型的构建第54页
     ·二级模型的构建第54页
   ·模型的验证和模型的比较第54-55页
 3. 结果与讨论第55-62页
   ·PMA实时荧光PCR活菌定量的标准曲线第55-56页
   ·南美白对虾中副溶血性弧菌一级模型的构建第56-57页
   ·南美白对虾中副溶血性弧菌二级模型的构建第57-58页
   ·模型的验证第58-59页
   ·副溶血性弧菌预测模型的对比分析第59-62页
     ·与即食南美白对虾中副溶血性弧菌预测模型的对比第59-60页
     ·与不同采收季节的生虾中副溶血性弧菌预测模型的对比第60-62页
 4. 结论第62-63页
 5. 本章小结第63-64页
全文总结第64-65页
参考文献第65-74页
攻读硕士学位期间取得的科研成果第74-77页
致谢第77页

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