| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略语(Abbreviations) | 第10-21页 |
| 第1章 引言 | 第21-52页 |
| 1.1 免疫学分析概述 | 第21-30页 |
| 1.1.1 免疫学分析简介 | 第21-25页 |
| 1.1.1.1 放射免疫分析 | 第21-22页 |
| 1.1.1.2 酶免疫分析 | 第22页 |
| 1.1.1.3 荧光免疫分析 | 第22-23页 |
| 1.1.1.4 化学发光免疫分析 | 第23-24页 |
| 1.1.1.5 免疫层析分析 | 第24-25页 |
| 1.1.2 免疫学分析的应用 | 第25-26页 |
| 1.1.2.1 免疫学分析在医学检验中的应用 | 第25页 |
| 1.1.2.2 免疫学分析在环境监测中的应用 | 第25-26页 |
| 1.1.2.3 免疫学分析在食品安全检测中的应用 | 第26页 |
| 1.1.3 免疫学分析的发展方向 | 第26-30页 |
| 1.1.3.1 定量检测 | 第27页 |
| 1.1.3.2 多重检测 | 第27-29页 |
| 1.1.3.3 超灵敏检测 | 第29-30页 |
| 1.2 恩诺沙星及其检测方法研究进展 | 第30-33页 |
| 1.2.1 恩诺沙星简介 | 第30-31页 |
| 1.2.2 恩诺沙星检测方法 | 第31-33页 |
| 1.2.2.1 色谱分析法 | 第31-32页 |
| 1.2.2.2 免疫学分析方法 | 第32-33页 |
| 1.3 单增李斯特菌及其检测方法研究进展 | 第33-37页 |
| 1.3.1 单增李斯特菌简介 | 第33-34页 |
| 1.3.2 单增李斯特菌检测方法 | 第34-37页 |
| 1.3.2.1 增菌培养法 | 第34-35页 |
| 1.3.3.2 分子生物学方法 | 第35-36页 |
| 1.3.3.3 免疫学分析方法 | 第36-37页 |
| 1.4 赫曲霉毒素A及其检测方法研究进展 | 第37-42页 |
| 1.4.1 赫曲霉毒素A简介 | 第37-38页 |
| 1.4.2 赫曲霉毒素A检测方法 | 第38-42页 |
| 1.4.2.1 色谱学分析方法 | 第38-40页 |
| 1.4.2.2 免疫学分析方法 | 第40-42页 |
| 1.5 基于动态光散射的均相免疫学分析研究进展 | 第42-43页 |
| 1.6 荧光ELISA研究进展 | 第43-46页 |
| 1.7 pELISA研究进展 | 第46-49页 |
| 1.8 主要的研究内容与意义 | 第49-52页 |
| 1.8.1 研究内容 | 第49-50页 |
| 1.8.2 研究意义 | 第50-52页 |
| 第2章 荧光免疫层析方法超灵敏定量检测鸡肉中ENR残留 | 第52-65页 |
| 2.1 主要试剂材料与仪器设备 | 第52-53页 |
| 2.1.1 试剂材料 | 第52-53页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第53页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第53-58页 |
| 2.2.1 Ru@SiO_2的合成及表征 | 第53-54页 |
| 2.2.2 Ru@SiO_2探针的制备 | 第54页 |
| 2.2.3 荧光ICA的研制 | 第54-56页 |
| 2.2.3.1 样本垫和结合垫的预处理 | 第55页 |
| 2.2.3.2 试纸条参数的优化 | 第55页 |
| 2.2.3.3 试纸条的组装 | 第55页 |
| 2.2.3.4 试纸条的检测方法及其荧光读取原理 | 第55-56页 |
| 2.2.4 加标鸡肉样本的前处理 | 第56页 |
| 2.2.5 实验参数的优化 | 第56-57页 |
| 2.2.5.1 确定试纸条定量检测时间 | 第56页 |
| 2.2.5.2 盐离子浓度对检测灵敏度的影响 | 第56-57页 |
| 2.2.5.3 pH值对试纸条T、C线荧光强度的影响 | 第57页 |
| 2.2.6 试纸条检测性能的评估 | 第57页 |
| 2.2.6.1 标准曲线的构建 | 第57页 |
| 2.2.6.2 最低检测灵敏度的测定 | 第57页 |
| 2.2.6.3 准确度以及精密度评价 | 第57页 |
| 2.2.7 与商业化ELISA试剂盒相关性的评价 | 第57-58页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第58-64页 |
| 2.3.1 Ru@SiO_2的合成及表征 | 第58-59页 |
| 2.3.2 Ru@SiO_2探针的制备 | 第59页 |
| 2.3.3 优化制备试纸条的参数 | 第59-60页 |
| 2.3.4 试纸条检测参数的优化 | 第60-61页 |
| 2.3.4.1 免疫反应时间的确定 | 第60页 |
| 2.3.4.2 溶液盐离子浓度和pH值对检测灵敏度的影响 | 第60-61页 |
| 2.3.5 ENR荧光ICA定量检测标准曲线 | 第61-62页 |
| 2.3.6 荧光ICA准确度以及精密度分析 | 第62-63页 |
| 2.3.7 与商业化ENRELISA检测试剂盒相关性的评价 | 第63-64页 |
| 2.4 本章小结 | 第64-65页 |
| 第3章 超灵敏检测癌胚抗原的超分子自组装介导网状纳米金增强免疫层析方法的建立 | 第65-85页 |
| 3.1 主要的试剂材料与仪器设备 | 第66-67页 |
| 3.1.1 试剂材料 | 第66页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第66-67页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第67-71页 |
| 3.2.1 柠檬酸包被的AuNPs制备 | 第67页 |
| 3.2.2 β-环糊精(β-CD)包被的AuNPs(β-CD@AuNPs)的制备 | 第67-68页 |
| 3.2.3 ADA标记的牛血清白蛋白(ADA@BSA)的制备 | 第68页 |
| 3.2.4 TCPP诱导β-CD@AuNPs聚集的表征 | 第68页 |
| 3.2.5 AuNPs与鼠抗CEA检测抗体的偶联 | 第68-69页 |
| 3.2.6 胶体金ICA的制备 | 第69页 |
| 3.2.7 试纸条参数的优化 | 第69页 |
| 3.2.8 试纸条信号放大方法 | 第69-70页 |
| 3.2.9 试纸条检测性能的评估 | 第70-71页 |
| 3.2.9.1 标准曲线的构建 | 第70页 |
| 3.2.9.2 特异性分析 | 第70页 |
| 3.2.9.3 实用性和可行性分析 | 第70-71页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第71-83页 |
| 3.3.1 柠檬酸修饰AuNPs合成及其金标检测抗体的制备 | 第71-72页 |
| 3.3.2 β-CD@AuNPs合成及TCPP诱导AuNPs聚集 | 第72-73页 |
| 3.3.3 试纸条制备以及检测条件的优化 | 第73-75页 |
| 3.3.4 TCPP和β-CD@AuNPs介导的循环信号放大验证 | 第75-76页 |
| 3.3.5 超分子自组装介导网状纳米金增强ICA性能的评估 | 第76-83页 |
| 3.3.5.1 标准曲线的构建 | 第76-80页 |
| 3.3.5.2 实用性分析 | 第80-82页 |
| 3.3.5.3 方法学特异性分析 | 第82-83页 |
| 3.4 本章小结 | 第83-85页 |
| 第4章 基于动态光散射免疫学超灵敏检测蔬菜中单增李斯特菌的新方法 | 第85-99页 |
| 4.1 主要的试剂材料与仪器设备 | 第86-87页 |
| 4.1.1 试剂材料 | 第86页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第86-87页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第87-91页 |
| 4.2.1 细菌培养 | 第87页 |
| 4.2.2 AuNPs的准备 | 第87-88页 |
| 4.2.3 AuNPs与抗LMmAbs的偶联 | 第88页 |
| 4.2.4 抗LMmAbs与MNPs的偶联 | 第88页 |
| 4.2.5 DLS均相免疫学方法的建立 | 第88-89页 |
| 4.2.6 实验参数的优化 | 第89-90页 |
| 4.2.6.1 AuNPs粒径对检测灵敏度的影响 | 第89页 |
| 4.2.6.2 抗体偶联量对DLS检测信号的影响 | 第89-90页 |
| 4.2.6.3 免疫反应时间的确定 | 第90页 |
| 4.2.7 加标生菜样本的制备及磁富集 | 第90页 |
| 4.2.8 DLS均相免疫学分析性能评估 | 第90-91页 |
| 4.2.8.1 标准曲线的建立 | 第90页 |
| 4.2.8.2 最低检测灵敏度的确定 | 第90-91页 |
| 4.2.8.3 特异性分析 | 第91页 |
| 4.2.8.4 实用性和可行性分析 | 第91页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第91-98页 |
| 4.3.1 AuNPs的合成及其与抗LMmAbs的偶联和表征 | 第91-92页 |
| 4.3.2 验证DLS均相免疫学分析LM的思路 | 第92-93页 |
| 4.3.3 实验参数的优化 | 第93-96页 |
| 4.3.3.1 AuNPs浓度和粒径对检测灵敏度的影响 | 第93-94页 |
| 4.3.3.2 抗体偶联量对检测灵敏度的影响 | 第94-95页 |
| 4.3.3.3 免疫反应时间对检测灵敏度的影响 | 第95-96页 |
| 4.3.4 方法学特异性分析 | 第96页 |
| 4.3.5 标准曲线的建立及其实用性分析 | 第96-98页 |
| 4.3.5.1 标准曲线的建立 | 第96-97页 |
| 4.3.5.2 实用性分析 | 第97-98页 |
| 4.4 本章小结 | 第98-99页 |
| 第5章 超灵敏检测OTA的荧光酶联免疫吸附法的建立 | 第99-119页 |
| 5.1 主要的试剂材料与仪器设备 | 第99-100页 |
| 5.1.1 试剂材料 | 第99-100页 |
| 5.1.2 仪器设备 | 第100页 |
| 5.2 实验方法与步骤 | 第100-105页 |
| 5.2.1 水溶性MPA修饰的CdTe QDs的合成 | 第100-101页 |
| 5.2.2 H_2O_2浓度对水溶性MPA修饰的CdTeQDs荧光强度的影响 | 第101页 |
| 5.2.3 CAT浓度对H_2O_2诱导的MPA修饰的CdTeQDs荧光淬灭的影响 | 第101页 |
| 5.2.4 CAT-OTA全抗原的制备 | 第101-102页 |
| 5.2.5 直接竞争FLISA方法的建立 | 第102页 |
| 5.2.6 样品前处理 | 第102-103页 |
| 5.2.7 实验参数的优化 | 第103-104页 |
| 5.2.7.1 溶液pH值对检测灵敏度的影响 | 第103页 |
| 5.2.7.2 盐离子浓度对检测灵敏度的影响 | 第103页 |
| 5.2.7.3 甲醇浓度对检测灵敏度的影响 | 第103页 |
| 5.2.7.4 免疫反应时间对检测灵敏度的影响 | 第103-104页 |
| 5.2.7.5 酶反应时间对检测灵敏度的影响 | 第104页 |
| 5.2.8 直接竞争FLISA分析性能的评估 | 第104-105页 |
| 5.2.8.1 标准曲线的建立 | 第104-105页 |
| 5.2.8.2 特异性分析 | 第105页 |
| 5.2.8.3 准确度以及精密度评价 | 第105页 |
| 5.2.9 与商业化ELISA试剂盒相关性的评价 | 第105页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第105-117页 |
| 5.3.1 水溶性MPA修饰的CdTe QDs的合成及表征 | 第105-106页 |
| 5.3.2 H_2O_2敏感的CdTe QDs荧光性质表征 | 第106-109页 |
| 5.3.2.1 H_2O_2浓度对CdTe QDs荧光淬灭的影响 | 第106-107页 |
| 5.3.2.2 CAT浓度对CdTe QDs荧光恢复的影响 | 第107-108页 |
| 5.3.2.3 孵育时间对CdTe QDs荧光淬灭的影响 | 第108-109页 |
| 5.3.3 最佳实验参数的优化 | 第109-114页 |
| 5.3.3.1 抗原抗体浓度的优化 | 第109-110页 |
| 5.3.3.2 溶液pH值对检测灵敏度的影响 | 第110-111页 |
| 5.3.3.3 溶液盐离子浓度对检测灵敏度的影响 | 第111-112页 |
| 5.3.3.4 甲醇浓度对检测灵敏度的影响 | 第112页 |
| 5.3.3.5 免疫反应时间对检测灵敏度的影响 | 第112-113页 |
| 5.3.3.6 酶反应时间对检测灵敏度的影响 | 第113-114页 |
| 5.3.4 直接竞争FLISA分析性能的评估 | 第114-116页 |
| 5.3.4.1 标准曲线的建立 | 第114页 |
| 5.3.4.2 特异性分析 | 第114-115页 |
| 5.3.4.3 准确度以及精密度评价 | 第115-116页 |
| 5.3.5 与商业化OTAELISA试剂盒相关性的评价 | 第116-117页 |
| 5.4 本章小结 | 第117-119页 |
| 第6章 超灵敏检测OTA的等离子体共振酶联免疫吸附法的建立 | 第119-137页 |
| 6.1 主要的试剂材料与仪器设备 | 第120-121页 |
| 6.1.1 试剂材料 | 第120-121页 |
| 6.1.2 仪器设备 | 第121页 |
| 6.2 实验方法与步骤 | 第121-125页 |
| 6.2.1 聚丙烯酸修饰的二氧化硅纳米粒子的合成 | 第121-122页 |
| 6.2.2 SiO_2@PAA@CAT的合成和表征 | 第122-123页 |
| 6.2.3 SiO_2@PAA@CAT@OTA的合成和表征 | 第123页 |
| 6.2.4 抗原抗体亲和力分析 | 第123页 |
| 6.2.5 直接竞争pELISA方法的建立 | 第123-124页 |
| 6.2.6 样品前处理 | 第124页 |
| 6.2.7 直接竞争FLISA分析性能的评估 | 第124-125页 |
| 6.2.7.1 标准曲线的建立 | 第124-125页 |
| 6.2.7.2 特异性分析 | 第125页 |
| 6.2.8 与商业化ELISA试剂盒相关性的评价 | 第125页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第125-136页 |
| 6.3.1 聚丙烯酸修饰的二氧化硅纳米粒子(SiO_2@PAA)的合成及表征 | 第125-128页 |
| 6.3.2 SiO_2@PAA@CAT的合成及表征 | 第128-130页 |
| 6.3.3 直接竞争pELISA的建立及其标准曲线的绘制 | 第130-133页 |
| 6.3.5 特异性分析 | 第133-134页 |
| 6.3.6 与商业化ELISA试剂盒相关性的评价 | 第134-136页 |
| 6.4 本章小结 | 第136-137页 |
| 第7章 结论与展望 | 第137-142页 |
| 7.1 结论 | 第137-139页 |
| 7.1.1 高发光Ru@SiO_2荧光ICA超灵敏检测ENR的研究 | 第137页 |
| 7.1.2 超分子自组装介导网状纳米金增强ICA超灵敏检测CEA的研究 | 第137-138页 |
| 7.1.3 DLS均相免疫学方法超灵敏检测LM的研究 | 第138页 |
| 7.1.4 H_2O_2敏感QDs的新型直接竞争FLISA超灵敏检测OTA的研究 | 第138-139页 |
| 7.1.5 SiO_2@PAA增强直接竞争pELISA超灵敏检测OTA的研究 | 第139页 |
| 7.2 展望 | 第139-142页 |
| 致谢 | 第142-144页 |
| 参考文献 | 第144-159页 |
| 附录A 本研究所用缓冲溶液的配制方案 | 第159-160页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第160-166页 |
| 个人简介 | 第166页 |
