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提高免疫学检测灵敏度的新型信号传导系统研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略语(Abbreviations)第10-21页
第1章 引言第21-52页
    1.1 免疫学分析概述第21-30页
        1.1.1 免疫学分析简介第21-25页
            1.1.1.1 放射免疫分析第21-22页
            1.1.1.2 酶免疫分析第22页
            1.1.1.3 荧光免疫分析第22-23页
            1.1.1.4 化学发光免疫分析第23-24页
            1.1.1.5 免疫层析分析第24-25页
        1.1.2 免疫学分析的应用第25-26页
            1.1.2.1 免疫学分析在医学检验中的应用第25页
            1.1.2.2 免疫学分析在环境监测中的应用第25-26页
            1.1.2.3 免疫学分析在食品安全检测中的应用第26页
        1.1.3 免疫学分析的发展方向第26-30页
            1.1.3.1 定量检测第27页
            1.1.3.2 多重检测第27-29页
            1.1.3.3 超灵敏检测第29-30页
    1.2 恩诺沙星及其检测方法研究进展第30-33页
        1.2.1 恩诺沙星简介第30-31页
        1.2.2 恩诺沙星检测方法第31-33页
            1.2.2.1 色谱分析法第31-32页
            1.2.2.2 免疫学分析方法第32-33页
    1.3 单增李斯特菌及其检测方法研究进展第33-37页
        1.3.1 单增李斯特菌简介第33-34页
        1.3.2 单增李斯特菌检测方法第34-37页
            1.3.2.1 增菌培养法第34-35页
            1.3.3.2 分子生物学方法第35-36页
            1.3.3.3 免疫学分析方法第36-37页
    1.4 赫曲霉毒素A及其检测方法研究进展第37-42页
        1.4.1 赫曲霉毒素A简介第37-38页
        1.4.2 赫曲霉毒素A检测方法第38-42页
            1.4.2.1 色谱学分析方法第38-40页
            1.4.2.2 免疫学分析方法第40-42页
    1.5 基于动态光散射的均相免疫学分析研究进展第42-43页
    1.6 荧光ELISA研究进展第43-46页
    1.7 pELISA研究进展第46-49页
    1.8 主要的研究内容与意义第49-52页
        1.8.1 研究内容第49-50页
        1.8.2 研究意义第50-52页
第2章 荧光免疫层析方法超灵敏定量检测鸡肉中ENR残留第52-65页
    2.1 主要试剂材料与仪器设备第52-53页
        2.1.1 试剂材料第52-53页
        2.1.2 仪器设备第53页
    2.2 实验方法与步骤第53-58页
        2.2.1 Ru@SiO_2的合成及表征第53-54页
        2.2.2 Ru@SiO_2探针的制备第54页
        2.2.3 荧光ICA的研制第54-56页
            2.2.3.1 样本垫和结合垫的预处理第55页
            2.2.3.2 试纸条参数的优化第55页
            2.2.3.3 试纸条的组装第55页
            2.2.3.4 试纸条的检测方法及其荧光读取原理第55-56页
        2.2.4 加标鸡肉样本的前处理第56页
        2.2.5 实验参数的优化第56-57页
            2.2.5.1 确定试纸条定量检测时间第56页
            2.2.5.2 盐离子浓度对检测灵敏度的影响第56-57页
            2.2.5.3 pH值对试纸条T、C线荧光强度的影响第57页
        2.2.6 试纸条检测性能的评估第57页
            2.2.6.1 标准曲线的构建第57页
            2.2.6.2 最低检测灵敏度的测定第57页
            2.2.6.3 准确度以及精密度评价第57页
        2.2.7 与商业化ELISA试剂盒相关性的评价第57-58页
    2.3 结果与讨论第58-64页
        2.3.1 Ru@SiO_2的合成及表征第58-59页
        2.3.2 Ru@SiO_2探针的制备第59页
        2.3.3 优化制备试纸条的参数第59-60页
        2.3.4 试纸条检测参数的优化第60-61页
            2.3.4.1 免疫反应时间的确定第60页
            2.3.4.2 溶液盐离子浓度和pH值对检测灵敏度的影响第60-61页
        2.3.5 ENR荧光ICA定量检测标准曲线第61-62页
        2.3.6 荧光ICA准确度以及精密度分析第62-63页
        2.3.7 与商业化ENRELISA检测试剂盒相关性的评价第63-64页
    2.4 本章小结第64-65页
第3章 超灵敏检测癌胚抗原的超分子自组装介导网状纳米金增强免疫层析方法的建立第65-85页
    3.1 主要的试剂材料与仪器设备第66-67页
        3.1.1 试剂材料第66页
        3.1.2 仪器设备第66-67页
    3.2 实验方法与步骤第67-71页
        3.2.1 柠檬酸包被的AuNPs制备第67页
        3.2.2 β-环糊精(β-CD)包被的AuNPs(β-CD@AuNPs)的制备第67-68页
        3.2.3 ADA标记的牛血清白蛋白(ADA@BSA)的制备第68页
        3.2.4 TCPP诱导β-CD@AuNPs聚集的表征第68页
        3.2.5 AuNPs与鼠抗CEA检测抗体的偶联第68-69页
        3.2.6 胶体金ICA的制备第69页
        3.2.7 试纸条参数的优化第69页
        3.2.8 试纸条信号放大方法第69-70页
        3.2.9 试纸条检测性能的评估第70-71页
            3.2.9.1 标准曲线的构建第70页
            3.2.9.2 特异性分析第70页
            3.2.9.3 实用性和可行性分析第70-71页
    3.3 结果与讨论第71-83页
        3.3.1 柠檬酸修饰AuNPs合成及其金标检测抗体的制备第71-72页
        3.3.2 β-CD@AuNPs合成及TCPP诱导AuNPs聚集第72-73页
        3.3.3 试纸条制备以及检测条件的优化第73-75页
        3.3.4 TCPP和β-CD@AuNPs介导的循环信号放大验证第75-76页
        3.3.5 超分子自组装介导网状纳米金增强ICA性能的评估第76-83页
            3.3.5.1 标准曲线的构建第76-80页
            3.3.5.2 实用性分析第80-82页
            3.3.5.3 方法学特异性分析第82-83页
    3.4 本章小结第83-85页
第4章 基于动态光散射免疫学超灵敏检测蔬菜中单增李斯特菌的新方法第85-99页
    4.1 主要的试剂材料与仪器设备第86-87页
        4.1.1 试剂材料第86页
        4.1.2 仪器设备第86-87页
    4.2 实验方法与步骤第87-91页
        4.2.1 细菌培养第87页
        4.2.2 AuNPs的准备第87-88页
        4.2.3 AuNPs与抗LMmAbs的偶联第88页
        4.2.4 抗LMmAbs与MNPs的偶联第88页
        4.2.5 DLS均相免疫学方法的建立第88-89页
        4.2.6 实验参数的优化第89-90页
            4.2.6.1 AuNPs粒径对检测灵敏度的影响第89页
            4.2.6.2 抗体偶联量对DLS检测信号的影响第89-90页
            4.2.6.3 免疫反应时间的确定第90页
        4.2.7 加标生菜样本的制备及磁富集第90页
        4.2.8 DLS均相免疫学分析性能评估第90-91页
            4.2.8.1 标准曲线的建立第90页
            4.2.8.2 最低检测灵敏度的确定第90-91页
            4.2.8.3 特异性分析第91页
            4.2.8.4 实用性和可行性分析第91页
    4.3 结果与讨论第91-98页
        4.3.1 AuNPs的合成及其与抗LMmAbs的偶联和表征第91-92页
        4.3.2 验证DLS均相免疫学分析LM的思路第92-93页
        4.3.3 实验参数的优化第93-96页
            4.3.3.1 AuNPs浓度和粒径对检测灵敏度的影响第93-94页
            4.3.3.2 抗体偶联量对检测灵敏度的影响第94-95页
            4.3.3.3 免疫反应时间对检测灵敏度的影响第95-96页
        4.3.4 方法学特异性分析第96页
        4.3.5 标准曲线的建立及其实用性分析第96-98页
            4.3.5.1 标准曲线的建立第96-97页
            4.3.5.2 实用性分析第97-98页
    4.4 本章小结第98-99页
第5章 超灵敏检测OTA的荧光酶联免疫吸附法的建立第99-119页
    5.1 主要的试剂材料与仪器设备第99-100页
        5.1.1 试剂材料第99-100页
        5.1.2 仪器设备第100页
    5.2 实验方法与步骤第100-105页
        5.2.1 水溶性MPA修饰的CdTe QDs的合成第100-101页
        5.2.2 H_2O_2浓度对水溶性MPA修饰的CdTeQDs荧光强度的影响第101页
        5.2.3 CAT浓度对H_2O_2诱导的MPA修饰的CdTeQDs荧光淬灭的影响第101页
        5.2.4 CAT-OTA全抗原的制备第101-102页
        5.2.5 直接竞争FLISA方法的建立第102页
        5.2.6 样品前处理第102-103页
        5.2.7 实验参数的优化第103-104页
            5.2.7.1 溶液pH值对检测灵敏度的影响第103页
            5.2.7.2 盐离子浓度对检测灵敏度的影响第103页
            5.2.7.3 甲醇浓度对检测灵敏度的影响第103页
            5.2.7.4 免疫反应时间对检测灵敏度的影响第103-104页
            5.2.7.5 酶反应时间对检测灵敏度的影响第104页
        5.2.8 直接竞争FLISA分析性能的评估第104-105页
            5.2.8.1 标准曲线的建立第104-105页
            5.2.8.2 特异性分析第105页
            5.2.8.3 准确度以及精密度评价第105页
        5.2.9 与商业化ELISA试剂盒相关性的评价第105页
    5.3 结果与讨论第105-117页
        5.3.1 水溶性MPA修饰的CdTe QDs的合成及表征第105-106页
        5.3.2 H_2O_2敏感的CdTe QDs荧光性质表征第106-109页
            5.3.2.1 H_2O_2浓度对CdTe QDs荧光淬灭的影响第106-107页
            5.3.2.2 CAT浓度对CdTe QDs荧光恢复的影响第107-108页
            5.3.2.3 孵育时间对CdTe QDs荧光淬灭的影响第108-109页
        5.3.3 最佳实验参数的优化第109-114页
            5.3.3.1 抗原抗体浓度的优化第109-110页
            5.3.3.2 溶液pH值对检测灵敏度的影响第110-111页
            5.3.3.3 溶液盐离子浓度对检测灵敏度的影响第111-112页
            5.3.3.4 甲醇浓度对检测灵敏度的影响第112页
            5.3.3.5 免疫反应时间对检测灵敏度的影响第112-113页
            5.3.3.6 酶反应时间对检测灵敏度的影响第113-114页
        5.3.4 直接竞争FLISA分析性能的评估第114-116页
            5.3.4.1 标准曲线的建立第114页
            5.3.4.2 特异性分析第114-115页
            5.3.4.3 准确度以及精密度评价第115-116页
        5.3.5 与商业化OTAELISA试剂盒相关性的评价第116-117页
    5.4 本章小结第117-119页
第6章 超灵敏检测OTA的等离子体共振酶联免疫吸附法的建立第119-137页
    6.1 主要的试剂材料与仪器设备第120-121页
        6.1.1 试剂材料第120-121页
        6.1.2 仪器设备第121页
    6.2 实验方法与步骤第121-125页
        6.2.1 聚丙烯酸修饰的二氧化硅纳米粒子的合成第121-122页
        6.2.2 SiO_2@PAA@CAT的合成和表征第122-123页
        6.2.3 SiO_2@PAA@CAT@OTA的合成和表征第123页
        6.2.4 抗原抗体亲和力分析第123页
        6.2.5 直接竞争pELISA方法的建立第123-124页
        6.2.6 样品前处理第124页
        6.2.7 直接竞争FLISA分析性能的评估第124-125页
            6.2.7.1 标准曲线的建立第124-125页
            6.2.7.2 特异性分析第125页
        6.2.8 与商业化ELISA试剂盒相关性的评价第125页
    6.3 结果与讨论第125-136页
        6.3.1 聚丙烯酸修饰的二氧化硅纳米粒子(SiO_2@PAA)的合成及表征第125-128页
        6.3.2 SiO_2@PAA@CAT的合成及表征第128-130页
        6.3.3 直接竞争pELISA的建立及其标准曲线的绘制第130-133页
        6.3.5 特异性分析第133-134页
        6.3.6 与商业化ELISA试剂盒相关性的评价第134-136页
    6.4 本章小结第136-137页
第7章 结论与展望第137-142页
    7.1 结论第137-139页
        7.1.1 高发光Ru@SiO_2荧光ICA超灵敏检测ENR的研究第137页
        7.1.2 超分子自组装介导网状纳米金增强ICA超灵敏检测CEA的研究第137-138页
        7.1.3 DLS均相免疫学方法超灵敏检测LM的研究第138页
        7.1.4 H_2O_2敏感QDs的新型直接竞争FLISA超灵敏检测OTA的研究第138-139页
        7.1.5 SiO_2@PAA增强直接竞争pELISA超灵敏检测OTA的研究第139页
    7.2 展望第139-142页
致谢第142-144页
参考文献第144-159页
附录A 本研究所用缓冲溶液的配制方案第159-160页
攻读学位期间的研究成果第160-166页
个人简介第166页

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