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食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7和鼠伤寒沙门氏菌同时快速检测方法的研究

摘要第1-12页
Abstract第12-14页
1 引言第14-34页
   ·大肠杆菌0157:H7 和鼠伤寒沙门氏菌的发病及流行情况第14-15页
     ·大肠杆菌0157:H7 发病及流行情况第14-15页
     ·鼠伤寒沙门氏菌的发病及流行情况第15页
   ·大肠杆菌0157:H7 和鼠伤寒沙门氏菌的微生物学特性及发病机制第15-17页
     ·大肠杆菌0157:H7 的微生物学特性及发病机制第15-17页
     ·鼠伤寒沙门氏菌的微生物学特性及发病机制第17页
   ·大肠杆菌0157:H7 和鼠伤寒沙门氏菌感染的流行病学第17-19页
     ·传染源第17-18页
     ·传播途径第18页
     ·易感人群第18-19页
   ·国内外检测大肠杆菌0157:H7 和鼠伤寒沙门氏菌的概况第19-31页
     ·传统的检测方法第19-21页
     ·PCR 检测方法第21-26页
     ·杂交技术第26-27页
     ·免疫学检测方法第27-31页
   ·大肠杆菌0157:H7 和鼠伤寒沙门氏菌检测注意事项第31页
   ·本实验研究的目的意义、研究内容及技术路线第31-34页
     ·目的意义第31-32页
     ·研究内容第32-33页
     ·试验技术路线第33-34页
2 材料与方法第34-48页
   ·材料第34-37页
     ·供试菌株第34页
     ·酶和生化试剂第34-35页
     ·实验所用试剂配制第35-36页
     ·主要仪器设备第36-37页
   ·肠出血性大肠杆菌0157:H7 卵黄多克隆抗体的制备第37-41页
     ·免疫原的制备第37页
     ·产蛋鸡的免疫第37-38页
     ·卵黄抗体纯化第38-40页
     ·卵黄抗体的抗体的透析第40页
     ·卵黄抗体效价检测第40页
     ·卵黄抗体特异性检测第40-41页
   ·鼠伤寒沙门氏菌卵黄多克隆抗体的制备第41页
     ·免疫原的制备第41页
     ·产蛋鸡的免疫第41页
     ·卵黄抗体纯化第41页
     ·卵黄抗体的抗体的透析第41页
     ·卵黄抗体效价检测第41页
     ·卵黄抗体特异性检测第41页
   ·肠出血性大肠杆菌0157:H7 单克隆抗体的制备第41-44页
     ·免疫原的制备第41页
     ·BALB/C 小鼠的免疫第41-42页
     ·杂交瘤细胞系的制备第42-43页
     ·单克隆抗体的制备第43-44页
   ·鼠伤寒沙门氏菌单克隆抗体的制备第44-45页
     ·免疫原的制备第44页
     ·BALB/C 小鼠的免疫第44页
     ·杂交瘤细胞在HAT 培养基上的选择性培养结果第44页
     ·单克隆抗体制备结果第44-45页
   ·胶体金免疫层析检测技术研究第45-48页
     ·胶体金的制备第45页
     ·抗体的胶体金标记第45-46页
     ·金标抗体稀释度的确定第46页
     ·硝酸纤维膜上检测抗体稀释度的确定第46页
     ·E.coli 0157:H7 胶体金免疫层析检测技术研究第46页
     ·鼠伤寒沙门氏菌免疫层析检测技术研究第46-47页
     ·同时检测 E.coli O157:H7 与 Salmonella typhimurium 的免疫层析技术研究第47-48页
3 结果与分析第48-66页
   ·肠出血性大肠杆菌0157:H7 卵黄多克隆抗体的制备第48-50页
     ·卵黄抗体提取方法比较第48-49页
     ·卵黄抗体的效价检测结果第49-50页
     ·卵黄抗体特异性检测结果第50页
   ·鼠伤寒沙门氏菌卵黄多克隆抗体的制备第50-51页
     ·卵黄抗体的效价检测结果第50-51页
     ·卵黄抗体特异性检测结果第51页
   ·抗肠出血性大肠杆菌0157:H7 单克隆抗体的制备第51-55页
     ·BALB/C 小鼠的免疫第51-52页
     ·杂交瘤细胞在HAT 培养基上的选择性培养结果第52页
     ·杂交瘤细胞系筛选结果第52-53页
     ·单克隆抗体的制备结果第53-55页
   ·抗鼠伤寒沙门氏菌单克隆抗体的制备第55-58页
     ·BALB/C 小鼠的免疫第55-56页
     ·杂交瘤细胞在HAT 培养基上的选择性培养结果第56页
     ·单克隆抗体制备结果第56-58页
   ·胶体金免疫层析检测技术研究第58-66页
     ·胶体金制备结果第58页
     ·抗体的胶体金标记第58-60页
     ·金标抗体稀释度的确定第60页
     ·硝酸纤维膜上检测抗体稀释度的确定第60-61页
     ·E.coli 0157:H7 胶体金免疫层析检测技术研究第61-62页
     ·鼠伤寒沙门氏菌免疫层析检测技术研究第62-63页
     ·同时检测 E.coli O157:H7 与 Salmonella typhimurium 的免疫层析技术研究第63-66页
4 讨论第66-69页
   ·制备单克隆抗体和多克隆抗体第66-67页
     ·实验动物注意事项第66页
     ·注射的剂量与方式第66页
     ·卵黄抗体制备注意事项第66页
     ·单克隆抗体制备注意事项第66页
     ·抗体纯化的意义第66-67页
     ·ELISA 试验中的要点第67页
   ·胶体金免疫层析检测技术研究第67-69页
     ·制备胶体金的玻璃器皿的清洁第67页
     ·制备胶体金的试剂的配制要求第67页
     ·影响胶体金颗粒大小的因素第67-69页
5 结论第69-70页
   ·免疫原的制备第69页
   ·单克隆抗体的制备第69页
   ·多克隆抗体的制备第69页
   ·胶体金免疫层析检测技术研究第69-70页
参考文献第70-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间发表论文第80页

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