中文摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第1章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 研究背景 | 第9页 |
1.2 强化酿酒酵母的抑制剂耐受能力 | 第9-13页 |
1.2.2 基因工程强化酿酒酵母对抑制剂耐受性 | 第11页 |
1.2.3 随机诱变与进化工程强化酿酒酵母对抑制剂耐受性 | 第11-12页 |
1.2.4 基因组重组强化酿酒酵母对抑制剂耐受性 | 第12-13页 |
1.3 葡萄糖、木糖共利用概述 | 第13-15页 |
1.3.1 开发葡萄糖、木糖利用菌株的重要性 | 第13-14页 |
1.3.2 混糖发酵过程中葡萄糖抑制效应 | 第14页 |
1.3.3 强化酿酒酵母菌株五六碳糖共利用的研究 | 第14-15页 |
1.4 强化酿酒酵母木糖利用能力木酮糖激酶的研究进展 | 第15-17页 |
1.4.1 木酮糖激酶的简介 | 第15-16页 |
1.4.2 木酮糖激酶的研究进展 | 第16-17页 |
1.5 本论文的研究内容及目的 | 第17-19页 |
1.5.1 研究意义 | 第17页 |
1.5.2 研究内容 | 第17-19页 |
第2章 材料与方法 | 第19-31页 |
2.1 菌株 | 第19-20页 |
2.2 主要试剂 | 第20-22页 |
2.3 试剂和培养基配制 | 第22-24页 |
2.3.1 培养基配制 | 第22-23页 |
2.3.2 生化试剂配制 | 第23-24页 |
2.4 主要设备 | 第24页 |
2.5 酿酒酵母菌株分子改造操作 | 第24-26页 |
2.5.1 PCR扩增 | 第24-25页 |
2.5.2 产物回收与酶切验证 | 第25页 |
2.5.3 大肠杆菌感受态细胞的转化与筛选 | 第25-26页 |
2.5.4 大肠杆菌中质粒的提取与验证 | 第26页 |
2.5.5 酿酒酵母转化 | 第26页 |
2.6 细胞培养与取样 | 第26-31页 |
2.6.1 酿酒酵母菌株的保存方法 | 第26页 |
2.6.2 酿酒酵母菌株紫外突变的方法 | 第26-27页 |
2.6.3 酿酒酵母菌株杂交的方法 | 第27-28页 |
2.6.4 酿酒酵母菌株的发酵 | 第28页 |
2.6.5 重组木糖利用酿酒酵母菌株抑制剂敏感性测定 | 第28页 |
2.6.6 杂交酿酒酵母菌株敏感性测定 | 第28-29页 |
2.6.7 培养基组分测定 | 第29-31页 |
第3章 抑制剂耐受性增强的木糖利用杂交菌株构建 | 第31-53页 |
3.1 抑制剂耐受增强的木糖利用杂合子菌株构建 | 第31-35页 |
3.1.1 筛选紫外突变后抑制剂耐受增强的a型酿酒酵母菌株 | 第32-33页 |
3.1.2 抑制剂耐受增强单倍体菌株发酵验证 | 第33-34页 |
3.1.3 木糖利用杂合子菌株的构建与鉴定 | 第34-35页 |
3.2 杂交后菌株木糖发酵情况比较 | 第35-41页 |
3.2.1 杂交后菌株在木糖培养基上的比较 | 第35-40页 |
3.2.2 温度对杂交酿酒酵母的影响 | 第40-41页 |
3.3 杂交后菌株的混糖发酵情况比较 | 第41-51页 |
3.3.1 杂交菌株在混糖最适条件下比较 | 第41-44页 |
3.3.2 杂交后菌株在混糖高温条件下比较 | 第44-47页 |
3.3.3 杂交后菌株在混糖抑制剂条件下的比较 | 第47-48页 |
3.3.4 杂交菌株在混糖高温抑制剂条件下的比较 | 第48-51页 |
3.4 本章小结 | 第51-53页 |
第4章 木酮糖激酶的改造 | 第53-61页 |
4.1 毕赤酵母源木酮糖激酶分子对接结果分析 | 第53-54页 |
4.2 毕赤酵母来源木酮糖激酶定点改造 | 第54-57页 |
4.2.1 第531位天冬酰胺突变菌株构建 | 第54-55页 |
4.2.2 第531位氨基酸饱和突变对菌株性能的影响 | 第55-57页 |
4.3 木酮糖激酶组合设计改造 | 第57-60页 |
4.3.1 组合型木酮糖激酶菌株构建 | 第58页 |
4.3.2 组合型木酮糖激酶对菌株性能的影响 | 第58-60页 |
4.4 本章小结 | 第60-61页 |
第5章 总结与展望 | 第61-63页 |
5.1 结论 | 第61-62页 |
5.2 创新点 | 第62页 |
5.3 展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
附录 | 第71-77页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-80页 |