| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 维生素混菌体系研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 微生物混菌体系间相互作用研究 | 第12-13页 |
| 1.1.2 人工合成微生物混菌体系的构建与应用 | 第13-14页 |
| 1.2 维生素C生产中K.vulgare-Bacillus混菌体系研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 基于组学的维生素C混菌发酵体系研究 | 第14-16页 |
| 1.2.2 强化维生素C混菌间相互作用的研究策略 | 第16-18页 |
| 1.3 运用基因工程手段改造微生物氨基酸和硫辛酸路径的研究 | 第18-19页 |
| 1.3.1 运用基因工程手段改造微生物氨基酸路径研究 | 第18页 |
| 1.3.2 运用基因工程手段改造微生物硫辛酸路径研究 | 第18-19页 |
| 1.4 本课题的研究意义及主要内容 | 第19-22页 |
| 1.4.1 本课题研究意义 | 第19-20页 |
| 1.4.2 本课题主要内容 | 第20-22页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第22-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 实验质粒 | 第22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.5 培养基配制 | 第24-25页 |
| 2.2 K.vulgare菌株改造过程 | 第25-27页 |
| 2.2.1 基因元件的获得 | 第25-26页 |
| 2.2.2 目标质粒的提取 | 第26页 |
| 2.2.3 K.vulgare感受态制备与电转化 | 第26页 |
| 2.2.4 酶切验证筛选正确K.vulgare转化子 | 第26-27页 |
| 2.3 发酵培养与产物测定 | 第27-28页 |
| 2.3.1 发酵培养方法 | 第27页 |
| 2.3.2 菌体生长及发酵液中山梨糖与古龙酸的测定 | 第27-28页 |
| 2.4 细胞形态与细胞结构观测 | 第28页 |
| 2.4.1 光学显微镜观察 | 第28页 |
| 2.4.2 扫描电镜观测 | 第28页 |
| 2.5 代谢组学实验与分析方法 | 第28-30页 |
| 2.5.1 胞外代谢物处理 | 第28-29页 |
| 2.5.2 GC-TOF-MS测定条件 | 第29页 |
| 2.5.3 代谢物鉴定与定量分析 | 第29-30页 |
| 第3章 通过氨基酸路径在K.vulgare中重构强化混菌互作关系 | 第30-44页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 酮古龙酸杆菌不同氨基酸路径的分析与重构 | 第30-33页 |
| 3.2.1 不同氨基酸功能模块获得 | 第30-32页 |
| 3.2.2 不同氨基酸路径在K.vulgare中的重构 | 第32-33页 |
| 3.3 不同氨基酸路径的重构对K.vulgare单菌发酵性能的影响 | 第33-36页 |
| 3.3.1 不同氨基酸路径的重构对单菌生长的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.2 不同氨基酸路径的重构对单菌发酵产酸的影响 | 第34-36页 |
| 3.4 苏氨酸路径重构对K.vulgare-B.endophyticus混菌发酵性能的影响 | 第36-39页 |
| 3.4.1 苏氨酸路径的重构对混菌摇瓶发酵的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.2 苏氨酸路径的重构对混菌发酵罐发酵的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.3 显微镜观测发酵状态下混菌的细胞数目 | 第38-39页 |
| 3.5 苏氨酸路径的重构对K.vulgare细胞形态和基因表达的影响 | 第39-41页 |
| 3.5.1 苏氨酸路径的重构对K.vulgare细胞形态的影响 | 第39-40页 |
| 3.5.2 苏氨酸路径的重构对K.vulgare基因表达的影响 | 第40-41页 |
| 3.6 重构苏氨酸路径对酮古龙酸杆菌代谢的影响 | 第41-42页 |
| 3.7 小结 | 第42-44页 |
| 第4章 通过硫辛酸模块在K.vulgare中的构建加强混菌互作关系 | 第44-58页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 硫辛酸功能模块在酮龙酸杆菌中的构建 | 第44-50页 |
| 4.2.1 硫辛酸功能模块的构建 | 第44-46页 |
| 4.2.2 外源添加硫辛酸对酮古龙酸杆菌单菌生长和产酸的影响 | 第46-47页 |
| 4.2.3 硫辛酸模块的构建对酮古龙酸杆菌单菌生长和产酸的影响 | 第47-49页 |
| 4.2.4 硫辛酸模块的构建对K.vulgare单菌发酵罐发酵性能影响 | 第49-50页 |
| 4.3 硫辛酸模块对酮古龙酸杆菌混菌生长和产酸的影响 | 第50-56页 |
| 4.3.1 硫辛酸模块构建对K.vulgare-B.endophyticus混菌发酵性能影响 | 第50-51页 |
| 4.3.2 硫辛酸模块构建对K.vulgare-B.thuringiensis混菌发酵性能影响 | 第51-52页 |
| 4.3.3 两类伴生菌的伴生作用比较 | 第52-55页 |
| 4.3.4 探究硫辛酸模块重构对K.vulgare的影响 | 第55-56页 |
| 4.4 小结 | 第56-58页 |
| 第5章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 5.1 结论 | 第58-59页 |
| 5.2 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-72页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
