| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写词表 | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-37页 |
| ·食源性微生物研究历史 | 第14页 |
| ·抗生素在养殖业的使用 | 第14-24页 |
| ·抗生素的定义 | 第14-15页 |
| ·兽用抗生素的种类和作用范围 | 第15-19页 |
| ·抗生素抗性和食品安全 | 第19-24页 |
| ·水产养殖中抗生素耐药性问题 | 第24-28页 |
| ·细菌耐药的遗传学机制 | 第28-29页 |
| ·固有耐药 | 第28页 |
| ·获得性耐药 | 第28-29页 |
| ·耐药基因的水平传播 | 第29-35页 |
| ·耐药性质粒 | 第29-30页 |
| ·转座子 | 第30-31页 |
| ·整合子系统 | 第31-35页 |
| ·本课题的研究意义及主要内容 | 第35-37页 |
| 第二章 海产品耐药细菌分布以及耐药表型分析 | 第37-47页 |
| ·引言 | 第37-38页 |
| ·实验材料与设备 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·主要试剂和耗品 | 第38-39页 |
| ·培养基和常用溶液配制 | 第39页 |
| ·实验过程 | 第39-40页 |
| ·实验流程 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·水产品采集和前处理 | 第40-41页 |
| ·耐药细菌的分离培养 | 第41页 |
| ·多重耐药细菌抗生素最小抑制浓度(MIC) | 第41-42页 |
| ·实验结果与讨论 | 第42-46页 |
| ·菌落计数 | 第42-44页 |
| ·耐药细菌耐药表型结果分析 | 第44-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 水产品耐药细菌耐药基因型及菌种测序分析 | 第47-63页 |
| ·引言 | 第47-48页 |
| ·实验材料与设备 | 第48-49页 |
| ·主要仪器设备 | 第48页 |
| ·主要试剂和耗品 | 第48-49页 |
| ·培养基和常用溶液配制 | 第49页 |
| ·实验过程 | 第49-50页 |
| ·实验流程 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·样品总 DNA 的提取 | 第50-51页 |
| ·抗生素抗性基因的扩增 | 第51-52页 |
| ·第一类整合酶基因 intI1 的扩增 | 第52页 |
| ·琼脂凝胶电泳 | 第52-53页 |
| ·16SrRNA PCR 反应 | 第53-54页 |
| ·凝胶电泳 | 第54页 |
| ·扩增片段序列分析 | 第54页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第54-55页 |
| ·DNA 测序及序列解析 | 第55页 |
| ·耐药基因引物序列(见附录三) | 第55页 |
| ·实验结果与讨论 | 第55-61页 |
| ·多重耐药菌耐药基因类型 | 第55页 |
| ·多重耐药菌菌种鉴定 | 第55-59页 |
| ·样品总 DNA 中耐四环素和磺胺的基因类型 | 第59-61页 |
| ·本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 海产品中耐药基因杂交分析 | 第63-78页 |
| ·引言 | 第63-64页 |
| ·实验主要仪器和设备 | 第64-66页 |
| ·主要仪器设备 | 第64页 |
| ·主要试剂和耗品 | 第64-65页 |
| ·实验菌株 | 第65页 |
| ·主要培养基和常用溶液的配制 | 第65-66页 |
| ·实验方法 | 第66-71页 |
| ·实验流程 | 第66-67页 |
| ·质粒分离提取 | 第67-68页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第68页 |
| ·地高辛标记 DNA 探针的制备 | 第68-69页 |
| ·Southern 杂交 | 第69-71页 |
| ·实验结果与分析 | 第71-76页 |
| ·耐药菌质粒谱 | 第71-72页 |
| ·多重耐药菌的 DNA-DNA 杂交分析 | 第72-76页 |
| ·本章小结 | 第76-78页 |
| 第五章 水产品中耐药细菌药基因水平转移和稳定性研究 | 第78-88页 |
| ·引言 | 第78-79页 |
| ·实验材料与设备 | 第79-81页 |
| ·主要仪器设备 | 第79页 |
| ·主要试剂和耗品 | 第79-80页 |
| ·实验菌株 | 第80页 |
| ·主要培养基和常用溶液的配制 | 第80-81页 |
| ·实验方法 | 第81-84页 |
| ·实验流程 | 第81-82页 |
| ·大肠埃希菌 DH5a 感受态细胞的制备 | 第82-83页 |
| ·大肠杆菌的转化实验 | 第83页 |
| ·多重耐药菌质粒稳定性传代实验 | 第83-84页 |
| ·传代子表型和基因型鉴定 | 第84页 |
| ·实验结果与讨论 | 第84-88页 |
| 结论与展望 | 第88-91页 |
| 结论 | 第88-90页 |
| 展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 附录 | 第104-122页 |
| 附件 | 第122页 |