摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-37页 |
·食源性微生物研究历史 | 第14页 |
·抗生素在养殖业的使用 | 第14-24页 |
·抗生素的定义 | 第14-15页 |
·兽用抗生素的种类和作用范围 | 第15-19页 |
·抗生素抗性和食品安全 | 第19-24页 |
·水产养殖中抗生素耐药性问题 | 第24-28页 |
·细菌耐药的遗传学机制 | 第28-29页 |
·固有耐药 | 第28页 |
·获得性耐药 | 第28-29页 |
·耐药基因的水平传播 | 第29-35页 |
·耐药性质粒 | 第29-30页 |
·转座子 | 第30-31页 |
·整合子系统 | 第31-35页 |
·本课题的研究意义及主要内容 | 第35-37页 |
第二章 海产品耐药细菌分布以及耐药表型分析 | 第37-47页 |
·引言 | 第37-38页 |
·实验材料与设备 | 第38-39页 |
·主要仪器设备 | 第38页 |
·主要试剂和耗品 | 第38-39页 |
·培养基和常用溶液配制 | 第39页 |
·实验过程 | 第39-40页 |
·实验流程 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-42页 |
·水产品采集和前处理 | 第40-41页 |
·耐药细菌的分离培养 | 第41页 |
·多重耐药细菌抗生素最小抑制浓度(MIC) | 第41-42页 |
·实验结果与讨论 | 第42-46页 |
·菌落计数 | 第42-44页 |
·耐药细菌耐药表型结果分析 | 第44-46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
第三章 水产品耐药细菌耐药基因型及菌种测序分析 | 第47-63页 |
·引言 | 第47-48页 |
·实验材料与设备 | 第48-49页 |
·主要仪器设备 | 第48页 |
·主要试剂和耗品 | 第48-49页 |
·培养基和常用溶液配制 | 第49页 |
·实验过程 | 第49-50页 |
·实验流程 | 第49-50页 |
·实验方法 | 第50-55页 |
·样品总 DNA 的提取 | 第50-51页 |
·抗生素抗性基因的扩增 | 第51-52页 |
·第一类整合酶基因 intI1 的扩增 | 第52页 |
·琼脂凝胶电泳 | 第52-53页 |
·16SrRNA PCR 反应 | 第53-54页 |
·凝胶电泳 | 第54页 |
·扩增片段序列分析 | 第54页 |
·PCR 产物的纯化 | 第54-55页 |
·DNA 测序及序列解析 | 第55页 |
·耐药基因引物序列(见附录三) | 第55页 |
·实验结果与讨论 | 第55-61页 |
·多重耐药菌耐药基因类型 | 第55页 |
·多重耐药菌菌种鉴定 | 第55-59页 |
·样品总 DNA 中耐四环素和磺胺的基因类型 | 第59-61页 |
·本章小结 | 第61-63页 |
第四章 海产品中耐药基因杂交分析 | 第63-78页 |
·引言 | 第63-64页 |
·实验主要仪器和设备 | 第64-66页 |
·主要仪器设备 | 第64页 |
·主要试剂和耗品 | 第64-65页 |
·实验菌株 | 第65页 |
·主要培养基和常用溶液的配制 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-71页 |
·实验流程 | 第66-67页 |
·质粒分离提取 | 第67-68页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第68页 |
·地高辛标记 DNA 探针的制备 | 第68-69页 |
·Southern 杂交 | 第69-71页 |
·实验结果与分析 | 第71-76页 |
·耐药菌质粒谱 | 第71-72页 |
·多重耐药菌的 DNA-DNA 杂交分析 | 第72-76页 |
·本章小结 | 第76-78页 |
第五章 水产品中耐药细菌药基因水平转移和稳定性研究 | 第78-88页 |
·引言 | 第78-79页 |
·实验材料与设备 | 第79-81页 |
·主要仪器设备 | 第79页 |
·主要试剂和耗品 | 第79-80页 |
·实验菌株 | 第80页 |
·主要培养基和常用溶液的配制 | 第80-81页 |
·实验方法 | 第81-84页 |
·实验流程 | 第81-82页 |
·大肠埃希菌 DH5a 感受态细胞的制备 | 第82-83页 |
·大肠杆菌的转化实验 | 第83页 |
·多重耐药菌质粒稳定性传代实验 | 第83-84页 |
·传代子表型和基因型鉴定 | 第84页 |
·实验结果与讨论 | 第84-88页 |
结论与展望 | 第88-91页 |
结论 | 第88-90页 |
展望 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-101页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第101-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
附录 | 第104-122页 |
附件 | 第122页 |