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广州市水产养殖品中耐药共生菌分布及耐药基因传播机制的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
英文缩写词表第7-14页
第一章 绪论第14-37页
   ·食源性微生物研究历史第14页
   ·抗生素在养殖业的使用第14-24页
     ·抗生素的定义第14-15页
     ·兽用抗生素的种类和作用范围第15-19页
     ·抗生素抗性和食品安全第19-24页
   ·水产养殖中抗生素耐药性问题第24-28页
   ·细菌耐药的遗传学机制第28-29页
     ·固有耐药第28页
     ·获得性耐药第28-29页
   ·耐药基因的水平传播第29-35页
     ·耐药性质粒第29-30页
     ·转座子第30-31页
     ·整合子系统第31-35页
   ·本课题的研究意义及主要内容第35-37页
第二章 海产品耐药细菌分布以及耐药表型分析第37-47页
   ·引言第37-38页
   ·实验材料与设备第38-39页
     ·主要仪器设备第38页
     ·主要试剂和耗品第38-39页
     ·培养基和常用溶液配制第39页
   ·实验过程第39-40页
     ·实验流程第39-40页
   ·实验方法第40-42页
     ·水产品采集和前处理第40-41页
     ·耐药细菌的分离培养第41页
     ·多重耐药细菌抗生素最小抑制浓度(MIC)第41-42页
   ·实验结果与讨论第42-46页
     ·菌落计数第42-44页
     ·耐药细菌耐药表型结果分析第44-46页
   ·本章小结第46-47页
第三章 水产品耐药细菌耐药基因型及菌种测序分析第47-63页
   ·引言第47-48页
   ·实验材料与设备第48-49页
     ·主要仪器设备第48页
     ·主要试剂和耗品第48-49页
     ·培养基和常用溶液配制第49页
   ·实验过程第49-50页
     ·实验流程第49-50页
   ·实验方法第50-55页
     ·样品总 DNA 的提取第50-51页
     ·抗生素抗性基因的扩增第51-52页
     ·第一类整合酶基因 intI1 的扩增第52页
     ·琼脂凝胶电泳第52-53页
     ·16SrRNA PCR 反应第53-54页
     ·凝胶电泳第54页
     ·扩增片段序列分析第54页
     ·PCR 产物的纯化第54-55页
     ·DNA 测序及序列解析第55页
     ·耐药基因引物序列(见附录三)第55页
   ·实验结果与讨论第55-61页
     ·多重耐药菌耐药基因类型第55页
     ·多重耐药菌菌种鉴定第55-59页
     ·样品总 DNA 中耐四环素和磺胺的基因类型第59-61页
   ·本章小结第61-63页
第四章 海产品中耐药基因杂交分析第63-78页
   ·引言第63-64页
   ·实验主要仪器和设备第64-66页
     ·主要仪器设备第64页
     ·主要试剂和耗品第64-65页
     ·实验菌株第65页
     ·主要培养基和常用溶液的配制第65-66页
   ·实验方法第66-71页
     ·实验流程第66-67页
     ·质粒分离提取第67-68页
     ·琼脂糖凝胶电泳第68页
     ·地高辛标记 DNA 探针的制备第68-69页
     ·Southern 杂交第69-71页
   ·实验结果与分析第71-76页
     ·耐药菌质粒谱第71-72页
     ·多重耐药菌的 DNA-DNA 杂交分析第72-76页
   ·本章小结第76-78页
第五章 水产品中耐药细菌药基因水平转移和稳定性研究第78-88页
   ·引言第78-79页
   ·实验材料与设备第79-81页
     ·主要仪器设备第79页
     ·主要试剂和耗品第79-80页
     ·实验菌株第80页
     ·主要培养基和常用溶液的配制第80-81页
   ·实验方法第81-84页
     ·实验流程第81-82页
     ·大肠埃希菌 DH5a 感受态细胞的制备第82-83页
     ·大肠杆菌的转化实验第83页
     ·多重耐药菌质粒稳定性传代实验第83-84页
     ·传代子表型和基因型鉴定第84页
   ·实验结果与讨论第84-88页
结论与展望第88-91页
 结论第88-90页
 展望第90-91页
参考文献第91-101页
攻读博士学位期间取得的研究成果第101-103页
致谢第103-104页
附录第104-122页
附件第122页

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