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鲤鱼肌肉金属蛋白酶的分离纯化与性质分析

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第一章 引言第14-26页
   ·金属离子与酶第14页
   ·金属蛋白酶研究概况第14-22页
     ·MMPs 简介第14-22页
       ·细胞外基质(ECM)第14-16页
       ·MMPs 的结构第16-17页
       ·MMPS 的分类和特点第17-19页
       ·MMPs 的活性调节第19-20页
       ·MMPs 的功能第20-21页
       ·MMPs 的分布与纯化第21-22页
     ·其他金属蛋白酶第22页
   ·金属蛋白酶在食品中的研究现状第22-24页
     ·MMPs 与肉类品质的关系第22-23页
     ·MMPs 对水产品品质的影响第23-24页
     ·其他金属蛋白酶与食品的关系第24页
   ·鱼类肌肉蛋白第24-25页
   ·本文研究内容与意义第25-26页
第二章 材料和方法第26-41页
   ·材料第26-29页
     ·实验用鱼第26页
     ·试剂第26页
     ·实验所用溶液及其制备第26-28页
       ·Tris-HCl 缓冲液第26-27页
       ·SDS-PAGE 所用溶液第27-28页
       ·8 g/L 明胶的配制第28页
       ·2.5 % (V/V)的Triton X-100 溶液的配制第28页
       ·银染色所用溶液第28页
       ·Western Blot 所用溶液第28页
     ·实验所用仪器第28-29页
   ·方法第29-41页
     ·酶活的测定第29页
     ·蛋白浓度测定第29页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、明胶酶谱(Gelatin Zymography)、银染色以及免疫交叉反应(Western Blot)第29-33页
       ·SDS-PAGE 胶的制备第30页
       ·酶的电泳检测及分析第30-31页
       ·明胶酶谱胶的制备第31页
       ·酶的酶谱检测和分析第31-32页
       ·SDS-PAGE 的银染色第32页
       ·Western Blot第32-33页
     ·鲤鱼肌肉肌浆中金属蛋白酶活性分析第33-35页
       ·原料预处理第33页
       ·红色肉和白色肉金属蛋白酶活性比较第33页
       ·红色肉金属蛋白酶的APMA 激活第33-34页
       ·酶液的提取第34页
       ·明胶的不同时间降解第34页
       ·不同温度的影响第34页
       ·不同pH 的影响第34页
       ·不同蛋白酶抑制剂的抑制作用第34-35页
       ·不同金属离子的影响第35页
     ·鲤鱼肌肉肌浆中金属蛋白酶的纯化第35-37页
       ·原料预处理第36页
       ·样品预处理第36页
       ·硫酸铵分级沉淀第36-37页
       ·DEAE-Sephacel 离子交换层析第37页
       ·Sephacryl S-200 HR 凝胶过滤层析第37页
       ·Econo-Pac Macro-Prep High Q 阴离子交换层析第37页
       ·Gelatin Sepharose~(TM) 4B 亲和层析第37页
     ·性质分析第37-39页
       ·分子量的确定和纯度鉴定第37-38页
       ·最适温度第38页
       ·最适pH第38页
       ·各种蛋白酶抑制剂的抑制作用第38页
       ·金属离子对酶活性的影响第38页
       ·胰蛋白酶对酶的激活作用第38页
       ·APMA 对酶的激活作用第38页
       ·酶对胶原蛋白的降解第38页
       ·酶对明胶的降解第38页
       ·酶对肌原纤维的降解第38-39页
     ·鲤鱼肌肉中肌原纤维结合型金属蛋白酶的研究第39-41页
       ·原料预处理第39页
       ·鲤鱼肌原纤维的制备第39页
       ·鲤鱼肌肉肌原纤维的自身降解第39页
       ·各种抑制剂的抑制作用第39-40页
       ·金属离子对肌原纤维降解的影响第40页
       ·鲤鱼肌肉肌原纤维的自身降解作用的季节性变化第40-41页
第三章 结果与分析第41-66页
   ·鲤鱼肌肉中金属蛋白酶活性分析第41-46页
     ·鲤鱼红色肉和白色肉中金属蛋白酶活性比较第41页
     ·红色肉金属蛋白酶的APMA 激活第41-42页
     ·酶液的提取第42-43页
     ·鲤鱼肌肉金属蛋白酶的性质分析第43-46页
       ·明胶的不同时间降解第43页
       ·温度对明胶降解的影响第43-44页
       ·pH 对明胶降解的影响第44-45页
       ·不同蛋白酶抑制剂的抑制作用第45页
       ·不同金属离子对酶活性的影响第45-46页
   ·鲤鱼红色肉中金属蛋白酶的分离纯化与性质分析第46-58页
     ·纯化结果第46-50页
     ·性质分析第50-58页
       ·分子量的确定和纯度鉴定第50-51页
       ·最适温度第51页
       ·最适pH第51-53页
       ·各种蛋白酶抑制剂的抑制作用第53页
       ·金属离子对酶活性的影响第53-54页
       ·胰蛋白酶对酶的激活的作用第54页
       ·APMA 对酶的激活的作用第54-55页
       ·酶对胶原蛋白的降解第55-57页
       ·酶对明胶的降解第57-58页
       ·酶对肌原纤维的降解第58页
   ·鲤鱼肌肉MBMP 的研究第58-66页
     ·鲤鱼肌肉肌原纤维的自身降解作用第58-60页
       ·不同温度的降解及红色肌肉与白色肌肉的比较第58-59页
       ·55 ℃不同时间的降解及红色肉与白色肉降解速度的比较第59-60页
     ·各种抑制剂的抑制作用第60-62页
     ·金属离子对鲤鱼肌肉肌原纤维降解的影响第62-65页
     ·鲤鱼红色肉肌原纤维自身降解的季节性变化第65-66页
第四章 讨论与结论第66-74页
   ·讨论第66-72页
   ·结论与展望第72-74页
致谢第74-75页
参考文献第75-83页
在学期间发表的学术论文目录第83页

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