| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-26页 |
| ·金属离子与酶 | 第14页 |
| ·金属蛋白酶研究概况 | 第14-22页 |
| ·MMPs 简介 | 第14-22页 |
| ·细胞外基质(ECM) | 第14-16页 |
| ·MMPs 的结构 | 第16-17页 |
| ·MMPS 的分类和特点 | 第17-19页 |
| ·MMPs 的活性调节 | 第19-20页 |
| ·MMPs 的功能 | 第20-21页 |
| ·MMPs 的分布与纯化 | 第21-22页 |
| ·其他金属蛋白酶 | 第22页 |
| ·金属蛋白酶在食品中的研究现状 | 第22-24页 |
| ·MMPs 与肉类品质的关系 | 第22-23页 |
| ·MMPs 对水产品品质的影响 | 第23-24页 |
| ·其他金属蛋白酶与食品的关系 | 第24页 |
| ·鱼类肌肉蛋白 | 第24-25页 |
| ·本文研究内容与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料和方法 | 第26-41页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·实验用鱼 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·实验所用溶液及其制备 | 第26-28页 |
| ·Tris-HCl 缓冲液 | 第26-27页 |
| ·SDS-PAGE 所用溶液 | 第27-28页 |
| ·8 g/L 明胶的配制 | 第28页 |
| ·2.5 % (V/V)的Triton X-100 溶液的配制 | 第28页 |
| ·银染色所用溶液 | 第28页 |
| ·Western Blot 所用溶液 | 第28页 |
| ·实验所用仪器 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-41页 |
| ·酶活的测定 | 第29页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第29页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、明胶酶谱(Gelatin Zymography)、银染色以及免疫交叉反应(Western Blot) | 第29-33页 |
| ·SDS-PAGE 胶的制备 | 第30页 |
| ·酶的电泳检测及分析 | 第30-31页 |
| ·明胶酶谱胶的制备 | 第31页 |
| ·酶的酶谱检测和分析 | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE 的银染色 | 第32页 |
| ·Western Blot | 第32-33页 |
| ·鲤鱼肌肉肌浆中金属蛋白酶活性分析 | 第33-35页 |
| ·原料预处理 | 第33页 |
| ·红色肉和白色肉金属蛋白酶活性比较 | 第33页 |
| ·红色肉金属蛋白酶的APMA 激活 | 第33-34页 |
| ·酶液的提取 | 第34页 |
| ·明胶的不同时间降解 | 第34页 |
| ·不同温度的影响 | 第34页 |
| ·不同pH 的影响 | 第34页 |
| ·不同蛋白酶抑制剂的抑制作用 | 第34-35页 |
| ·不同金属离子的影响 | 第35页 |
| ·鲤鱼肌肉肌浆中金属蛋白酶的纯化 | 第35-37页 |
| ·原料预处理 | 第36页 |
| ·样品预处理 | 第36页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第36-37页 |
| ·DEAE-Sephacel 离子交换层析 | 第37页 |
| ·Sephacryl S-200 HR 凝胶过滤层析 | 第37页 |
| ·Econo-Pac Macro-Prep High Q 阴离子交换层析 | 第37页 |
| ·Gelatin Sepharose~(TM) 4B 亲和层析 | 第37页 |
| ·性质分析 | 第37-39页 |
| ·分子量的确定和纯度鉴定 | 第37-38页 |
| ·最适温度 | 第38页 |
| ·最适pH | 第38页 |
| ·各种蛋白酶抑制剂的抑制作用 | 第38页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第38页 |
| ·胰蛋白酶对酶的激活作用 | 第38页 |
| ·APMA 对酶的激活作用 | 第38页 |
| ·酶对胶原蛋白的降解 | 第38页 |
| ·酶对明胶的降解 | 第38页 |
| ·酶对肌原纤维的降解 | 第38-39页 |
| ·鲤鱼肌肉中肌原纤维结合型金属蛋白酶的研究 | 第39-41页 |
| ·原料预处理 | 第39页 |
| ·鲤鱼肌原纤维的制备 | 第39页 |
| ·鲤鱼肌肉肌原纤维的自身降解 | 第39页 |
| ·各种抑制剂的抑制作用 | 第39-40页 |
| ·金属离子对肌原纤维降解的影响 | 第40页 |
| ·鲤鱼肌肉肌原纤维的自身降解作用的季节性变化 | 第40-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-66页 |
| ·鲤鱼肌肉中金属蛋白酶活性分析 | 第41-46页 |
| ·鲤鱼红色肉和白色肉中金属蛋白酶活性比较 | 第41页 |
| ·红色肉金属蛋白酶的APMA 激活 | 第41-42页 |
| ·酶液的提取 | 第42-43页 |
| ·鲤鱼肌肉金属蛋白酶的性质分析 | 第43-46页 |
| ·明胶的不同时间降解 | 第43页 |
| ·温度对明胶降解的影响 | 第43-44页 |
| ·pH 对明胶降解的影响 | 第44-45页 |
| ·不同蛋白酶抑制剂的抑制作用 | 第45页 |
| ·不同金属离子对酶活性的影响 | 第45-46页 |
| ·鲤鱼红色肉中金属蛋白酶的分离纯化与性质分析 | 第46-58页 |
| ·纯化结果 | 第46-50页 |
| ·性质分析 | 第50-58页 |
| ·分子量的确定和纯度鉴定 | 第50-51页 |
| ·最适温度 | 第51页 |
| ·最适pH | 第51-53页 |
| ·各种蛋白酶抑制剂的抑制作用 | 第53页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第53-54页 |
| ·胰蛋白酶对酶的激活的作用 | 第54页 |
| ·APMA 对酶的激活的作用 | 第54-55页 |
| ·酶对胶原蛋白的降解 | 第55-57页 |
| ·酶对明胶的降解 | 第57-58页 |
| ·酶对肌原纤维的降解 | 第58页 |
| ·鲤鱼肌肉MBMP 的研究 | 第58-66页 |
| ·鲤鱼肌肉肌原纤维的自身降解作用 | 第58-60页 |
| ·不同温度的降解及红色肌肉与白色肌肉的比较 | 第58-59页 |
| ·55 ℃不同时间的降解及红色肉与白色肉降解速度的比较 | 第59-60页 |
| ·各种抑制剂的抑制作用 | 第60-62页 |
| ·金属离子对鲤鱼肌肉肌原纤维降解的影响 | 第62-65页 |
| ·鲤鱼红色肉肌原纤维自身降解的季节性变化 | 第65-66页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第66-74页 |
| ·讨论 | 第66-72页 |
| ·结论与展望 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 在学期间发表的学术论文目录 | 第83页 |