摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-16页 |
1.1 油棕简介 | 第10-11页 |
1.2 植物DGAT研究进展 | 第11-14页 |
1.3 研究目的及意义 | 第14-15页 |
1.4 试验技术路线 | 第15-16页 |
2 材料方法 | 第16-24页 |
2.1 材料 | 第16-18页 |
2.1.1 植物材料 | 第16页 |
2.1.2 载体和菌种 | 第16页 |
2.1.3 其他相关试剂耗材及仪器 | 第16-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-24页 |
2.2.1 RACE获得基因序列全长(5'RACE) | 第18-19页 |
2.2.2 荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第19页 |
2.2.3 基因克隆及生物信息学分析 | 第19页 |
2.2.4 酵母表达载体及植物表达载体的构建 | 第19-22页 |
2.2.5 目的基因在缺陷性酵母H1246中的异源表达 | 第22页 |
2.2.6 目的基因在拟南芥中的表达 | 第22-23页 |
2.2.7 薄层色谱分离油脂中的TAG | 第23页 |
2.2.8 总油脂及TAG中脂肪酸成分分析 | 第23页 |
2.2.9 数据处理与分析 | 第23-24页 |
3 结果及分析 | 第24-36页 |
3.1 EgDGAT1和EgDGAT2在油棕果实发育的五个时期中的表达量分析 | 第24-25页 |
3.1.1 EgDGAT1的荧光定量分析 | 第24页 |
3.1.2 EgDGAT2的荧光定量分析 | 第24-25页 |
3.2 DGAT基因的克隆及生物信息学分析 | 第25-28页 |
3.2.1 EgDGAT1和EgDGAT2全长的获得 | 第25-26页 |
3.2.2 生物信息学分析 | 第26-28页 |
3.3 酵母表达载体的构建及目的基因在酵母中的表达 | 第28-31页 |
3.3.1 酵母表达载体的构建 | 第28页 |
3.3.2 EgDGAT1和EgDGAT2在H1246酵母中的表达分析 | 第28-31页 |
3.4 植物表达载体的构建 | 第31-32页 |
3.5 EgDGAT2在拟南芥中的异源表达及转基因植株的筛选与鉴定 | 第32-34页 |
3.5.1 EgDGAT2转入野生型拟南芥中 | 第32页 |
3.5.2 转基因植株的筛选与鉴定 | 第32-33页 |
3.5.3 转基因拟南芥中EgDGAT2表达水平分析 | 第33-34页 |
3.6 EgDGAT2在拟南芥中的表达 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
4.1 油棕DGAT序列特征的讨论 | 第36页 |
4.2 油棕DGAT在酵母中对油脂含量的影响 | 第36-37页 |
4.3 油棕DGAT2在拟南芥中对油脂含量的影响 | 第37-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
附录一 常见的实验方法与步骤 | 第44-56页 |
附录二 发表的论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |