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植物乳杆菌ST-Ⅲ盐应激反应及其协同保护作用的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
缩略符号对照表第8-9页
目录第9-12页
第一章 绪论第12-21页
    1.1 引言第12-13页
    1.2 细酸菌的耐盐机制第13-18页
        1.2.1 恢复胞内离子平衡第13-14页
        1.2.2 吸收或合成相容性溶质第14-16页
        1.2.3 改变细胞壁/膜组成第16-17页
        1.2.4 调节应激蛋白表达第17页
        1.2.5 调节胞内代谢平衡第17-18页
    1.3 盐应激协同保护作用第18页
    1.4 立体依据及意义第18-19页
    1.5 本论文研究主要内容第19-21页
第二章 植物乳杆菌ST-Ⅲ耐盐能力的研究第21-28页
    2.1 前言第21页
    2.2 材料与设备第21-22页
        2.2.1 供试菌株及培养基第21页
        2.2.2 主要试剂第21页
        2.2.3 主要仪器和设备第21-22页
    2.3 实验方法第22页
        2.3.1 预培养液的制备第22页
        2.3.2 植物乳杆菌ST-Ⅲ耐盐能力测定第22页
        2.3.3 相容性溶质对植物乳杆菌ST-Ⅲ耐盐能力的影响第22页
        2.3.4 相容性溶质作用方式的确定第22页
        2.3.5 相容性溶质浓度的确定第22页
    2.4 结果与讨论第22-27页
        2.4.1 植物乳杆菌ST-Ⅲ耐盐能力的测定第22-23页
        2.4.2 相容性溶质对植物乳杆菌ST-Ⅲ耐盐能力的影响第23-25页
        2.4.3 相容性溶质作用方式的确定第25-26页
        2.4.4 相容性溶质浓度的确定第26-27页
    2.5 本章小结第27-28页
第三章 盐应激对植物乳杆菌ST-Ⅲ基因转录水平的影响第28-52页
    3.1 前言第28-29页
    3.2 材料与设备第29-30页
        3.2.1 供试菌株及培养基第29页
        3.2.2 主要试剂及耗材第29页
        3.2.3 主要仪器和设备第29-30页
    3.3 实验方法第30-37页
        3.3.1 菌种培养及样品准备第30页
        3.3.2 cDNA文库构建及测序第30-35页
        3.3.3 生物信息学分析第35-36页
        3.3.4 实时荧光定量PCR(RT-PCR)验证转录组数据第36-37页
    3.4 结果与讨论第37-50页
        3.4.1 cDNA文库构建及测序第37-39页
        3.4.2 转录组结果分析第39-49页
        3.4.3 RT-PCR验证转录组结果第49-50页
    3.5 本章小结第50-52页
第四章 甘氨酸甜菜碱在植物乳杆菌ST-Ⅲ耐盐中的作用第52-66页
    4.1 前言第52-53页
    4.2 材料与设备第53-54页
        4.2.1 供试菌株及培养基第53页
        4.2.2 主要试剂及耗材第53页
        4.2.3 主要仪器和设备第53-54页
    4.3 实验方法第54-55页
        4.3.1 菌种培养及样品准备第54页
        4.3.2 cDNA文库构建及测序第54页
        4.3.3 生物信息学分析第54页
        4.3.4 实时荧光定量PCR(RT-PCR)验证转录组数据第54-55页
    4.4 结果与讨论第55-64页
        4.4.1 cDNA文库构建及测序第55-57页
        4.4.2 转录组结果分析第57-64页
        4.4.3 RT-PCR验证转录组结果第64页
    4.5 本章小结第64-66页
第五章 植物乳杆菌ST-Ⅲ耐盐基因的功能验证第66-84页
    5.1 前言第66页
    5.2 材料与设备第66-67页
        5.2.1 供试菌株及培养基第66-67页
        5.2.2 主要试剂第67页
        5.2.3 主要仪器和设备第67页
    5.3 实验方法第67-76页
        5.3.1 培养基及生长条件第67页
        5.3.2 基因进化分析第67-68页
        5.3.3 细菌总DNA提取方法及目的基因扩增、纯化第68-70页
        5.3.4 大肠杆菌载体的构建第70-73页
        5.3.5 乳球菌表达载体的构建第73-75页
        5.3.6 重组菌株的诱导表达及耐盐能力的测定第75-76页
    5.4 结果与讨论第76-83页
        5.4.1 基因进化分析第76-77页
        5.4.2 大肠杆菌载体的构建第77-80页
        5.4.3 乳酸菌载体的构建第80-81页
        5.4.4 RT-PCR分析基因在重组菌株中的表达第81-82页
        5.4.5 重组菌株耐盐能力的测定第82-83页
    5.5 本章小结第83-84页
第六章 盐应激对植物乳杆菌ST-Ⅲ耐酸、耐胆盐及粘附协同保护作用的研究第84-101页
    6.1 前言第84-85页
    6.2 材料与设备第85页
        6.2.1 供试菌株/细胞及培养基第85页
        6.2.2 主要试剂第85页
        6.2.3 主要仪器和设备第85页
    6.3 实验方法第85-91页
        6.3.1 菌种的培养第85页
        6.3.2 耐酸实验第85-86页
        6.3.3 胆盐耐受实验第86页
        6.3.4 细胞膜完整性测定第86-87页
        6.3.5 粘附实验第87页
        6.3.6 甘氨酸甜菜碱对植物乳杆菌ST-Ⅲ胆盐耐受及粘附能力的影响第87-88页
        6.3.7 盐应激提高植物乳杆菌ST-Ⅲ粘附能力的可能机制第88-91页
    6.4 结果与讨论第91-100页
        6.4.1 酸耐受第91页
        6.4.2 胆盐耐受第91-92页
        6.4.3 细胞膜完整性检测第92-94页
        6.4.4 粘附实验第94-95页
        6.4.5 甘氨酸甜菜碱对植物乳杆菌ST-Ⅲ胆盐耐受及粘附能力的影响第95-98页
        6.4.6 盐应激提高植物乳杆菌ST-Ⅲ粘附能力的可能机制第98-100页
    6.5 本章小结第100-101页
主要结论与展望第101-102页
创新点第102-103页
致谢第103-104页
参考文献第104-116页
附录:攻读博士学位期间发表论文及专利申请情况第116页

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