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细菌素Helveticin-M对熟制羊肉腐败菌的抑菌作用及其机理研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第1章 绪论第12-24页
    1.1 羊肉中的腐败菌及菌相变化第12-13页
    1.2 细菌素研究进展第13-21页
        1.2.1 细菌素的分类第14-15页
        1.2.2 细菌素的优点第15-17页
        1.2.3 细菌素的理化性质与结构特点第17-18页
        1.2.4 细菌素的抑菌机理第18-20页
        1.2.5 细菌素的应用及发展前景第20-21页
    1.3 超声波抑菌效果研究第21-22页
    1.4 本课题研究的意义和内容第22-24页
        1.4.1 研究意义和目的第22页
        1.4.2 研究内容第22-24页
第2章 羊肉屠宰加工场主要污染菌的分布及其对熟制羊肉致腐能力的研究第24-38页
    2.1 材料与方法第24-27页
        2.1.1 样品与试剂第24页
        2.1.2 仪器与设备第24-25页
        2.1.3 实验方法第25-27页
    2.2 结果与讨论第27-36页
        2.2.1 羊屠宰场和熟制品加工过程中的菌群分布第27-29页
        2.2.2 熟制品加工过程中污染菌群形态学观察与鉴定第29-31页
        2.2.3 主要污染菌对熟制羊肉致腐能力的测定第31-36页
    2.3 结论第36-38页
第3章 细菌素Helveticin-M的克隆表达及纯化第38-50页
    3.1 材料和试剂第38-40页
        3.1.1 试剂药品第38页
        3.1.2 试验仪器第38-39页
        3.1.3 菌株第39页
        3.1.4 克隆载体第39页
        3.1.5 试剂和修饰酶类第39页
        3.1.6 试剂盒第39页
        3.1.7 主要试剂配制第39-40页
        3.1.8 PCR引物设计表第40页
    3.2 方法第40-45页
        3.2.1 L.crispatus K313基因的获取第41-42页
        3.2.2 重组质粒pCNCH-Helveticin-M的构建第42-43页
        3.2.3 连接产物的转化第43页
        3.2.4 重组质粒的鉴定第43页
        3.2.5 重组蛋白的异源表达与鉴定第43-44页
        3.2.6 融合蛋白的纯化第44-45页
    3.3 结果第45-49页
        3.3.1 PCR扩增Helveticin-M保守序列第45页
        3.3.2 Tail-PCR扩增细菌素Helveticin-M下游片段第45-46页
        3.3.3 Tail-PCR扩增细菌素Helveticin-M上游片段第46页
        3.3.4 细菌素Helveticin-M片段全长第46-47页
        3.3.5 重组质粒pCNCH-Helveticin-M的鉴定第47-48页
        3.3.6 融合蛋白的诱导表达第48-49页
        3.3.7 融合蛋白镍柱纯化第49页
    3.4 小结第49-50页
第4章 细菌素Helveticin-M对羊肉中腐败菌抑菌机理的研究第50-64页
    4.1 材料和试剂第50-51页
        4.1.1 试剂药品第50页
        4.1.2 仪器设备第50-51页
        4.1.3 菌株与样品第51页
    4.2 试验方法第51-53页
        4.2.1 菌株的活化与培养第51页
        4.2.2 细菌素Helveticin-M对指示菌株生长曲线的影响第51页
        4.2.3 生理分析用菌悬液的制备第51-52页
        4.2.4 细菌素Helveticin-M对指示菌膜形态学和胞内结构的影响第52页
        4.2.5 细菌素Helveticin-M对指示菌膜渗透性的影响第52-53页
        4.2.6 流式细胞仪检测第53页
        4.2.7 细胞膜电势(△φ)的测定第53页
    4.3 结果与讨论第53-62页
        4.3.1 细菌素Helveticin-M对指示菌株生长曲线的影响第53-54页
        4.3.2 细菌素Helveticin-M对指示菌细胞表面和胞内结构的影响第54-56页
        4.3.3 细菌素Helveticin-M对指示菌膜渗透性的影响第56-60页
        4.3.4 流式细胞仪检测结果第60-61页
        4.3.5 细菌素Helveticin-M对指示菌膜电势(△φ)的影响第61-62页
    4.4 结论第62-64页
第5章 超声波辅助抑菌剂对羊肉中芽孢抑菌效果的研究第64-72页
    5.1 材料和试剂第64页
        5.1.1 试剂药品第64页
        5.1.2 试验仪器第64页
        5.1.3 菌株与样品第64页
    5.2 方法第64-66页
        5.2.1 菌株培养与菌悬液的制备第65页
        5.2.2 样品中芽孢的接种与计数第65页
        5.2.3 超声处理芽孢确定最优条件第65-66页
        5.2.4 超声波辅助抑菌剂对芽孢杀灭效果的影响第66页
        5.2.5 扫描电镜观察结果第66页
        5.2.6 添加芽孢萌发剂后超声波对芽孢杀灭效果的影响第66页
        S.2.7 数据处理第66页
    5.3 结果与讨论第66-70页
        5.3.1 功率和时间对杀灭芽孢效果的影响第66-67页
        5.3.2 超声波辅助抑菌剂对芽孢杀灭效果的影响第67-68页
        5.3.3 扫描电镜观察结果第68-69页
        5.3.4 添加芽孢萌发剂后超声波对芽孢杀灭效果的影响第69-70页
    5.4 小结第70-72页
全文结论第72-74页
论文创新点第74-76页
工作展望第76-78页
硕士期间发表的学术论文及研究成果第78-80页
参考文献第80-92页
致谢第92页

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