| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-21页 |
| ·立题背景及意义 | 第9-10页 |
| ·本文涉及的食源性致病菌的简介 | 第10-14页 |
| ·志贺氏菌 | 第10-11页 |
| ·沙门氏菌 | 第11-12页 |
| ·变形杆菌 | 第12-14页 |
| ·食源性病原菌的检测方法 | 第14-20页 |
| ·常规检测方法 | 第14页 |
| ·免疫学检测方法 | 第14-16页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第16-20页 |
| ·研究目的及内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-29页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·试验菌株 | 第21页 |
| ·仪器与设备 | 第21页 |
| ·主要培养基 | 第21-22页 |
| ·样品与生化试剂 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-23页 |
| ·细菌的培养 | 第22页 |
| ·菌体DNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·引物设计、体系和操作程序 | 第23-24页 |
| ·多重PCR 的引物设计 | 第23-24页 |
| ·多重PCR 反应体系 | 第24页 |
| ·多重PCR 操作程序 | 第24页 |
| ·多重PCR 反应条件优化 | 第24-25页 |
| ·引物添加量的优化 | 第24页 |
| ·Mg~(2+)添加量的优化 | 第24页 |
| ·dNTP 添加量的优化 | 第24-25页 |
| ·退火温度的优化 | 第25页 |
| ·Taq 酶添加量的优化 | 第25页 |
| ·多重PCR 扩增产物的分析 | 第25-26页 |
| ·多重PCR 反应产物检测 | 第25页 |
| ·多重PCR 反应产物的克隆 | 第25-26页 |
| ·多重PCR 产物的测序鉴定 | 第26页 |
| ·特异性试验 | 第26-27页 |
| ·多重PCR 反应特异性的检测 | 第26页 |
| ·多重 PCR 引物特异性的检测 | 第26-27页 |
| ·多重PCR 灵敏度的研究 | 第27页 |
| ·多重 PCR 检测单一致病菌的灵敏度 | 第27页 |
| ·多重 PCR 同时检测三种致病菌的灵敏度 | 第27页 |
| ·人工污染猪肉中三种致病菌DNA 提取方法的比较 | 第27-28页 |
| ·普通热裂解法 | 第27页 |
| ·酚-氯仿抽提法 | 第27-28页 |
| ·试剂盒法（EasyPureTM Genomic DNA KIT 试剂盒） | 第28页 |
| ·多重PCR 检测人工污染猪肉的检出限 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-43页 |
| ·多重PCR 反应条件优化 | 第29-32页 |
| ·最适引物添加量的选择 | 第29页 |
| ·最适 Mg~(2+)添加量的选择 | 第29-30页 |
| ·最适dNTP 添加量的选择 | 第30-31页 |
| ·最适退火温度的选择 | 第31页 |
| ·最适 Taq 酶的选择 | 第31-32页 |
| ·多重PCR 反应产物的测序结果 | 第32-35页 |
| ·特异性试验 | 第35-37页 |
| ·多重 PCR 引物特异性试验 | 第35-36页 |
| ·多重 PCR 反应特异性试验 | 第36-37页 |
| ·多重PCR 的灵敏度 | 第37-40页 |
| ·多重 PCR 检测单一致病菌的灵敏度 | 第37-39页 |
| ·多重 PCR 反应同时检测三种致病菌的灵敏度 | 第39-40页 |
| ·人工污染猪肉中三种致病菌DNA 提取方法的比较结果 | 第40-41页 |
| ·人工污染猪肉的检出限 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·多重PCR 反应程序的优化 | 第43-44页 |
| ·靶基因及引物的确定 | 第43页 |
| ·dNTP、Taq 酶及引物添加量的确定 | 第43-44页 |
| ·Mg~(2+)添加量和退火温度的确定 | 第44页 |
| ·多重PCR 污染防控措施 | 第44-45页 |
| ·展望 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |