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特异性识别Cry1Ab多肽分子元件的构建及其在电化学免疫传感器的初步应用研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
缩略语第7-13页
第1章 引言第13-31页
    1.1 Bt蛋白的研究进展第13-15页
        1.1.1 Bt蛋白的概念及分类第13-14页
        1.1.2 Bt蛋白的杀虫机理第14页
        1.1.3 Bt蛋白的应用第14-15页
    1.2 Bt转基因作物及其产品的检测第15-23页
        1.2.1 Bt转基因作物及其产品的检测意义第15-16页
        1.2.2 Bt转基因作物及其产品的检测方法第16-23页
    1.3 免疫检测元件的研究进展第23-29页
        1.3.1 单克隆抗体第23页
        1.3.2 基因工程抗体第23-25页
        1.3.3 核酸适配体第25-26页
        1.3.4 分子印迹聚合物第26页
        1.3.5 多肽第26-29页
    1.4 本课题研究的内容和意义第29-31页
        1.4.1 研究意义第29-30页
        1.4.2 研究内容第30-31页
第2章 特异性识别Cry1Ab蛋白的噬菌体展示多肽的淘选及鉴定第31-46页
    2.1 实验材料、仪器和试剂第31-33页
        2.1.1 实验材料第31页
        2.1.2 实验仪器第31-32页
        2.1.3 实验试剂第32-33页
    2.2 实验方法第33-37页
        2.2.1 特异性识别Cry1Ab的噬菌体展示多肽的亲和淘选第33-34页
        2.2.2 特异性识别Cry1Ab的噬菌体展示十二肽的鉴定第34-35页
        2.2.3 特异性识别Cry1Ab噬菌体的DNA纯化及测序第35页
        2.2.4 基于特异性识别Cry1Ab噬菌体展示多肽的标准曲线建立第35-37页
    2.3 实验结果第37-43页
        2.3.1 抗Cry1Ab噬菌体展示十二肽的淘选第37页
        2.3.2 阳性克隆的鉴定第37-38页
        2.3.3 阳性克隆的特异性鉴定第38-39页
        2.3.4 噬菌体阳性克隆的多肽氨基酸序列鉴定第39-40页
        2.3.5 基于特异性识别Cry1Ab噬菌体的标准曲线的建立第40-43页
    2.4 讨论第43-44页
        2.4.1 淘选的影响因素第43-44页
        2.4.2 阳性噬菌体展示多肽的氨基酸序列分析第44页
        2.4.3 夹心Phage-ELISA分析第44页
    2.5 小结第44-46页
第3章 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体的构建、表达及其鉴定第46-75页
    3.1 实验材料、仪器和试剂第47-49页
        3.1.1 实验材料第47-48页
        3.1.2 实验仪器第48-49页
        3.1.3 实验试剂第49页
    3.2 实验方法第49-57页
        3.2.1 构建抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的重组表达载体第49-53页
        3.2.2 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的表达第53-55页
        3.2.3 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的免疫分析性能鉴定第55页
        3.2.4 基于抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的夹心ELISA标准曲线的建立第55-57页
    3.3 实验结果第57-72页
        3.3.1 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc重组表达载体的构建第57-62页
        3.3.2 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的表达第62-64页
        3.3.3 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的免疫分析性能鉴定第64-66页
        3.3.4 基于抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的夹心ELISA标准曲线的建立第66-72页
    3.4 讨论第72-74页
        3.4.1 Peptides基因的设计第73页
        3.4.2 表达产物Peptides-Fc复性/不复性的影响第73页
        3.4.3 不同缓冲液对Peptides-Fc的ELISA鉴定实验的影响第73-74页
        3.4.4 夹心ELISA的双识别元件的配对第74页
    3.5 小结第74-75页
第4章 基于抗Cry1Ab蛋白噬菌体展示多肽的电化学免疫传感器的构建第75-85页
    4.1 实验材料、仪器和试剂第75-76页
        4.1.1 实验材料第75-76页
        4.1.2 实验仪器第76页
        4.1.3 实验试剂第76页
    4.2 实验方法第76-78页
        4.2.1 传感器制备流程图第76-77页
        4.2.2 传感器的制备第77页
        4.2.3 建立检测Cry1Ab蛋白的标准曲线第77-78页
        4.2.4 加标回收实验第78页
    4.3 实验结果第78-83页
        4.3.1 传感器制备过程的表征第78-81页
        4.3.2 传感器检测Cry1Ab标准曲线的建立第81-82页
        4.3.3 加标回收实验第82-83页
    4.4 讨论第83-84页
        4.4.1 抗体的固定第83页
        4.4.2 纳米材料的修饰第83-84页
        4.4.3 反应底物液的使用第84页
    4.5 小结第84-85页
第5章 结论与展望第85-87页
    5.1 结论第85-86页
    5.2 展望第86-87页
致谢第87-88页
参考文献第88-94页
攻读硕士学位期间的研究成果第94页

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