摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略语 | 第7-13页 |
第1章 引言 | 第13-31页 |
1.1 Bt蛋白的研究进展 | 第13-15页 |
1.1.1 Bt蛋白的概念及分类 | 第13-14页 |
1.1.2 Bt蛋白的杀虫机理 | 第14页 |
1.1.3 Bt蛋白的应用 | 第14-15页 |
1.2 Bt转基因作物及其产品的检测 | 第15-23页 |
1.2.1 Bt转基因作物及其产品的检测意义 | 第15-16页 |
1.2.2 Bt转基因作物及其产品的检测方法 | 第16-23页 |
1.3 免疫检测元件的研究进展 | 第23-29页 |
1.3.1 单克隆抗体 | 第23页 |
1.3.2 基因工程抗体 | 第23-25页 |
1.3.3 核酸适配体 | 第25-26页 |
1.3.4 分子印迹聚合物 | 第26页 |
1.3.5 多肽 | 第26-29页 |
1.4 本课题研究的内容和意义 | 第29-31页 |
1.4.1 研究意义 | 第29-30页 |
1.4.2 研究内容 | 第30-31页 |
第2章 特异性识别Cry1Ab蛋白的噬菌体展示多肽的淘选及鉴定 | 第31-46页 |
2.1 实验材料、仪器和试剂 | 第31-33页 |
2.1.1 实验材料 | 第31页 |
2.1.2 实验仪器 | 第31-32页 |
2.1.3 实验试剂 | 第32-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-37页 |
2.2.1 特异性识别Cry1Ab的噬菌体展示多肽的亲和淘选 | 第33-34页 |
2.2.2 特异性识别Cry1Ab的噬菌体展示十二肽的鉴定 | 第34-35页 |
2.2.3 特异性识别Cry1Ab噬菌体的DNA纯化及测序 | 第35页 |
2.2.4 基于特异性识别Cry1Ab噬菌体展示多肽的标准曲线建立 | 第35-37页 |
2.3 实验结果 | 第37-43页 |
2.3.1 抗Cry1Ab噬菌体展示十二肽的淘选 | 第37页 |
2.3.2 阳性克隆的鉴定 | 第37-38页 |
2.3.3 阳性克隆的特异性鉴定 | 第38-39页 |
2.3.4 噬菌体阳性克隆的多肽氨基酸序列鉴定 | 第39-40页 |
2.3.5 基于特异性识别Cry1Ab噬菌体的标准曲线的建立 | 第40-43页 |
2.4 讨论 | 第43-44页 |
2.4.1 淘选的影响因素 | 第43-44页 |
2.4.2 阳性噬菌体展示多肽的氨基酸序列分析 | 第44页 |
2.4.3 夹心Phage-ELISA分析 | 第44页 |
2.5 小结 | 第44-46页 |
第3章 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体的构建、表达及其鉴定 | 第46-75页 |
3.1 实验材料、仪器和试剂 | 第47-49页 |
3.1.1 实验材料 | 第47-48页 |
3.1.2 实验仪器 | 第48-49页 |
3.1.3 实验试剂 | 第49页 |
3.2 实验方法 | 第49-57页 |
3.2.1 构建抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的重组表达载体 | 第49-53页 |
3.2.2 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的表达 | 第53-55页 |
3.2.3 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的免疫分析性能鉴定 | 第55页 |
3.2.4 基于抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的夹心ELISA标准曲线的建立 | 第55-57页 |
3.3 实验结果 | 第57-72页 |
3.3.1 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc重组表达载体的构建 | 第57-62页 |
3.3.2 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的表达 | 第62-64页 |
3.3.3 抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的免疫分析性能鉴定 | 第64-66页 |
3.3.4 基于抗Cry1Ab多肽嵌合抗体Peptides-Fc的夹心ELISA标准曲线的建立 | 第66-72页 |
3.4 讨论 | 第72-74页 |
3.4.1 Peptides基因的设计 | 第73页 |
3.4.2 表达产物Peptides-Fc复性/不复性的影响 | 第73页 |
3.4.3 不同缓冲液对Peptides-Fc的ELISA鉴定实验的影响 | 第73-74页 |
3.4.4 夹心ELISA的双识别元件的配对 | 第74页 |
3.5 小结 | 第74-75页 |
第4章 基于抗Cry1Ab蛋白噬菌体展示多肽的电化学免疫传感器的构建 | 第75-85页 |
4.1 实验材料、仪器和试剂 | 第75-76页 |
4.1.1 实验材料 | 第75-76页 |
4.1.2 实验仪器 | 第76页 |
4.1.3 实验试剂 | 第76页 |
4.2 实验方法 | 第76-78页 |
4.2.1 传感器制备流程图 | 第76-77页 |
4.2.2 传感器的制备 | 第77页 |
4.2.3 建立检测Cry1Ab蛋白的标准曲线 | 第77-78页 |
4.2.4 加标回收实验 | 第78页 |
4.3 实验结果 | 第78-83页 |
4.3.1 传感器制备过程的表征 | 第78-81页 |
4.3.2 传感器检测Cry1Ab标准曲线的建立 | 第81-82页 |
4.3.3 加标回收实验 | 第82-83页 |
4.4 讨论 | 第83-84页 |
4.4.1 抗体的固定 | 第83页 |
4.4.2 纳米材料的修饰 | 第83-84页 |
4.4.3 反应底物液的使用 | 第84页 |
4.5 小结 | 第84-85页 |
第5章 结论与展望 | 第85-87页 |
5.1 结论 | 第85-86页 |
5.2 展望 | 第86-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-94页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第94页 |