| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 线粒体膜通透性转化孔和己糖激酶 | 第12-17页 |
| 1.1.1 细胞凋亡与线粒体 | 第12-13页 |
| 1.1.2 线粒体膜通透性转化孔 | 第13-14页 |
| 1.1.3 己糖激酶 | 第14-16页 |
| 1.1.4 线粒体膜通透性转化孔与己糖激酶的结构和功能 | 第16-17页 |
| 1.2 一氧化氮与植物的己糖生理代谢 | 第17-21页 |
| 1.2.1 一氧化氮与植物生理 | 第17-18页 |
| 1.2.2 蔗糖的代谢 | 第18页 |
| 1.2.3 蔗糖代谢相关酶 | 第18-20页 |
| 1.2.4 己糖的代谢 | 第20-21页 |
| 1.2.5 己糖代谢相关酶 | 第21页 |
| 1.3 论文的研究内容及意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 主要溶液、缓冲液、培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.4 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.5 载体及菌株 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-43页 |
| 2.2.1 蔗糖磷酸合成酶的提取及活性测定 | 第26页 |
| 2.2.2 蔗糖合成酶的提取及其活性测定 | 第26-27页 |
| 2.2.3 转化酶的提取及其测定 | 第27页 |
| 2.2.4 葡萄糖磷酸异构酶的提取及其测定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 果糖激酶的提取及其测定 | 第28页 |
| 2.2.6 桃果实线粒体的提取及其纯化 | 第28页 |
| 2.2.7 线粒体己糖激酶的活性测定 | 第28-29页 |
| 2.2.8 可溶性糖的提取及其含量测定 | 第29页 |
| 2.2.9 6-磷酸果糖的含量测定 | 第29-30页 |
| 2.2.10 6-磷酸葡糖糖的含量测定 | 第30页 |
| 2.2.11 HKⅡCDNA全长的克隆及生物学分析 | 第30-38页 |
| 2.2.12 体外重组桃果实HKⅡ蛋白 | 第38-41页 |
| 2.2.13 NO对HKⅡ基因表达的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.14 NO对HKⅡ重组蛋白的影响 | 第42页 |
| 2.2.15 统计与分析 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-65页 |
| 3.1 NO对己糖代谢的影响 | 第43-49页 |
| 3.1.1 NO对蔗糖磷酸合酶活性的影响 | 第43页 |
| 3.1.2 NO对蔗糖合酶活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.1.3 NO对转化酶活性的影响 | 第44-45页 |
| 3.1.4 NO对可溶性糖含量的影响 | 第45-46页 |
| 3.1.5 NO对葡萄糖磷酸异构酶活性的影响 | 第46页 |
| 3.1.6 NO对己糖激酶活性的影响 | 第46-47页 |
| 3.1.7 NO对果糖激酶活性的影响 | 第47-48页 |
| 3.1.8 NO对6-磷酸葡萄糖含量的影响 | 第48页 |
| 3.1.9 NO对6-磷酸果糖含量的影响 | 第48-49页 |
| 3.2 己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)CDNA全长的克隆 | 第49-51页 |
| 3.2.1 桃果实总RNA的提取及完整性 | 第49-50页 |
| 3.2.2 HKⅡ中间片段的克隆 | 第50页 |
| 3.2.3 RACE及其基因全长的获得 | 第50-51页 |
| 3.3 HKⅡ序列分析 | 第51-57页 |
| 3.3.1 HKⅡ开放阅读框分析 | 第51-52页 |
| 3.3.2 HKⅡ二级结构预测 | 第52-53页 |
| 3.3.3 HKⅡ蛋白三级结构预测 | 第53-54页 |
| 3.3.4 HKII蛋白氨基酸序列同源比对 | 第54-55页 |
| 3.3.5 系统进化树分析 | 第55页 |
| 3.3.6 HKII蛋白理化性质预测 | 第55-56页 |
| 3.3.7 HKII蛋白结构预测 | 第56-57页 |
| 3.4 HKII重组蛋白体外表达与纯化 | 第57-60页 |
| 3.4.1 构建HKII表达载体 | 第57-59页 |
| 3.4.2 HKII重组蛋白的表达 | 第59页 |
| 3.4.3 HKII重组蛋白的纯化和复性 | 第59-60页 |
| 3.5 NO与HKⅡ的相互作用 | 第60-64页 |
| 3.5.1 NO与HKⅡ蛋白溶液相互作用的荧光光谱 | 第60-61页 |
| 3.5.2 NO与HKⅡ蛋白溶液的荧光猝灭反应 | 第61-63页 |
| 3.5.3 NO与HKⅡ蛋白溶液的荧光猝灭照片 | 第63-64页 |
| 3.6 NO对HKⅡ基因表达量的影响 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| 4.1 NO处理对肥城桃果实己糖代谢的影响 | 第65-66页 |
| 4.2 肥城桃果实HKⅡ基因克隆及生物信息学分析 | 第66页 |
| 4.3 重组蛋白的表达、纯化和复性 | 第66-67页 |
| 4.4 NO对线粒体膜通透性转化的影响 | 第67-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 6 创新之处 | 第70-71页 |
| 7 参考文献 | 第71-83页 |
| 8 致谢 | 第83-84页 |
| 9 硕士期间论文发表情况 | 第84页 |
