| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写符号对照表 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 产油微生物概况 | 第12-14页 |
| 1.1.1 概述 | 第12页 |
| 1.1.2 微生物油脂的应用 | 第12-14页 |
| 1.2 产油微生物及其脂质积累机制 | 第14-18页 |
| 1.2.1 产油微生物 | 第14-15页 |
| 1.2.2 产油微生物脂质积累机制 | 第15-18页 |
| 1.3 卷枝毛霉简介及其脂质积累研究现状 | 第18-19页 |
| 1.3.1 卷枝毛霉简介 | 第18页 |
| 1.3.2 卷枝毛霉研究概况 | 第18-19页 |
| 1.4 代谢流量分析 | 第19-21页 |
| 1.4.1 计量学代谢流量分析方法 | 第20页 |
| 1.4.2 基于同位素标记实验的代谢流量分析方法 | 第20-21页 |
| 1.5 课题立题意义及主要研究内容 | 第21-23页 |
| 第二章 基于~(13)C葡萄糖的卷枝毛霉代谢流分析 | 第23-42页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 材料与设备 | 第24-25页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第24页 |
| 2.2.2 实验所用菌株 | 第24页 |
| 2.2.3 实验所用培养基和试剂的配置 | 第24页 |
| 2.2.4 主要仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-33页 |
| 2.3.1 卷枝毛霉的培养 | 第25页 |
| 2.3.2 卷枝毛霉生物量及上清培养液葡萄糖和NH_4~+的测定 | 第25页 |
| 2.3.3 卷枝毛霉生物质的测定 | 第25-27页 |
| 2.3.4 卷枝毛霉代谢网络的构建 | 第27-28页 |
| 2.3.5 代谢流分布的计算 | 第28-29页 |
| 2.3.6 卷枝毛霉代谢流量配比的计算分析 | 第29-32页 |
| 2.3.7 数据统计与分析 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-41页 |
| 2.4.1 HN和LN培养条件下两株卷枝毛霉的生长情况 | 第33-35页 |
| 2.4.2 卷枝毛霉的生物质组成 | 第35-38页 |
| 2.4.3 卷枝毛霉代谢流分析 | 第38-40页 |
| 2.4.4 卷枝毛霉脂肪酸合成所需NADPH的来源和消耗 | 第40-41页 |
| 2.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 磷酸戊糖途径在卷枝毛霉脂质合成中的作用 | 第42-60页 |
| 3.1 前言 | 第42页 |
| 3.2 材料与设备 | 第42-46页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.2 实验所用菌株和质粒 | 第43-44页 |
| 3.2.3 引物合成与测序 | 第44-45页 |
| 3.2.4 实验所用培养基和试剂的配置 | 第45页 |
| 3.2.5 主要仪器与设备 | 第45-46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-53页 |
| 3.3.1 卷枝毛霉重组表达载体的构建 | 第46-49页 |
| 3.3.2 卷枝毛霉过表达重组菌株的构建 | 第49-51页 |
| 3.3.3 卷枝毛霉重组菌株的培养 | 第51页 |
| 3.3.4 卷枝毛霉重组菌株生物量和油脂含量的测定 | 第51页 |
| 3.3.5 卷枝毛霉重组菌株细胞内酶活性的测定 | 第51-52页 |
| 3.3.6 卷枝毛霉重组菌株相关基因的转录水平 | 第52-53页 |
| 3.3.7 数据统计与分析 | 第53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-59页 |
| 3.4.1 卷枝毛霉重组菌株表达载体的构建 | 第53-55页 |
| 3.4.2 卷枝毛霉过表达重组菌株的构建 | 第55-56页 |
| 3.4.3 卷枝毛霉重组菌株生长和脂质积累的分析 | 第56-58页 |
| 3.4.4 卷枝毛霉重组菌株细胞内的酶活性 | 第58-59页 |
| 3.4.5 卷枝毛霉重组菌株相关基因的转录水平 | 第59页 |
| 3.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 苹果酸酶在卷枝毛霉脂质合成中的作用 | 第60-71页 |
| 4.1 前言 | 第60-61页 |
| 4.2 材料与设备 | 第61-62页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第61页 |
| 4.2.2 实验所用菌株和质粒 | 第61页 |
| 4.2.3 引物合成与测序 | 第61-62页 |
| 4.2.4 实验所用培养基和试剂的配置 | 第62页 |
| 4.2.5 主要仪器与设备 | 第62页 |
| 4.3 实验方法 | 第62-64页 |
| 4.3.1 卷枝毛霉重组表达载体的构建 | 第62-63页 |
| 4.3.2 卷枝毛霉过表达重组菌株的构建 | 第63页 |
| 4.3.3 卷枝毛霉重组菌株的培养 | 第63页 |
| 4.3.4 卷枝毛霉重组菌株生物量和油脂含量的测定 | 第63-64页 |
| 4.3.5 卷枝毛霉重组菌株细胞内苹果酸酶活性的测定 | 第64页 |
| 4.3.6 卷枝毛霉重组菌株苹果酸酶基因的转录水平 | 第64页 |
| 4.3.7 数据统计与分析 | 第64页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第64-69页 |
| 4.4.1 卷枝毛霉重组菌株表达载体的构建 | 第64-66页 |
| 4.4.2 卷枝毛霉过表达重组菌株的构建 | 第66-67页 |
| 4.4.3 卷枝毛霉重组菌株生长和脂质积累的分析 | 第67-68页 |
| 4.4.4 卷枝毛霉重组菌株细胞内的苹果酸酶活性 | 第68-69页 |
| 4.4.5 卷枝毛霉重组菌株苹果酸酶基因的转录水平 | 第69页 |
| 4.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 第五章 苹果酸转运蛋白在卷枝毛霉脂质合成中的作用 | 第71-84页 |
| 5.1 前言 | 第71页 |
| 5.2 材料与设备 | 第71-73页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第71页 |
| 5.2.2 实验所用菌株和质粒 | 第71-72页 |
| 5.2.3 引物合成与测序 | 第72-73页 |
| 5.2.4 实验所用培养基和试剂的配置 | 第73页 |
| 5.2.5 主要仪器与设备 | 第73页 |
| 5.3 实验方法 | 第73-76页 |
| 5.3.1 卷枝毛霉重组表达载体的构建 | 第73-74页 |
| 5.3.2 卷枝毛霉重组菌株的构建 | 第74-75页 |
| 5.3.3 卷枝毛霉重组菌株的培养 | 第75页 |
| 5.3.4 卷枝毛霉重组菌株生物量和油脂含量的测定 | 第75页 |
| 5.3.5 重组菌株培养上清液中葡萄糖和NH_4~+的测定 | 第75页 |
| 5.3.6 重组菌株培养上清液中苹果酸含量的测定 | 第75页 |
| 5.3.7 卷枝毛霉重组菌株苹果酸转运蛋白基因的转录水平 | 第75页 |
| 5.3.8 数据统计与分析 | 第75-76页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第76-83页 |
| 5.4.1 卷枝毛霉重组菌株表达载体的构建 | 第77-78页 |
| 5.4.2 卷枝毛霉重组菌株的构建 | 第78-79页 |
| 5.4.3 卷枝毛霉重组菌株生长和脂质积累的分析 | 第79-81页 |
| 5.4.4 卷枝毛霉重组菌株胞外苹果酸的含量 | 第81-82页 |
| 5.4.5 卷枝毛霉重组菌株苹果酸转运蛋白基因的转录水平 | 第82-83页 |
| 5.5 本章小结 | 第83-84页 |
| 主要结论与展望 | 第84-86页 |
| 论文创新点 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 附录I：卷枝毛霉的代谢化学计量平衡式 | 第99-102页 |
| 附录Ⅱ：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第102页 |
