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DON全抗原的生物合成及其在免疫分析中的应用

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
缩略语第7-12页
第1章 引言第12-22页
    1.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇研究进展第12-17页
        1.1.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇理化性质第12-13页
        1.1.2 脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒理性质研究进展第13-14页
        1.1.3 DON的污染情况及限量标准第14-15页
        1.1.4 DON检测方法第15-17页
    1.2 小分子抗原的合成第17-21页
        1.2.1 小分子抗原的化学合成第17-20页
        1.2.2 小分子抗原的生物合成第20-21页
    1.3 主要研究内容及意义第21-22页
        1.3.1 主要研究内容第21页
        1.3.2 研究意义第21-22页
第2章 DON多肽模拟表位的淘选及鉴定第22-31页
    2.1 实验材料第22-24页
        2.1.1 仪器设备第22-23页
        2.1.2 生物材料和试剂第23页
        2.1.3 试剂配制第23-24页
    2.2 实验方法第24-27页
        2.2.1 DON模拟表位的亲和淘选第24-25页
        2.2.2 DON模拟表位的鉴定第25-26页
        2.2.3 Phage-ELISA标准曲线的建立第26-27页
    2.3 结果和讨论第27-30页
        2.3.1 DON模拟表位的亲和淘选第27页
        2.3.2 阳性克隆的鉴定第27-29页
        2.3.3 DON模拟表位测序第29页
        2.3.4 Phage-ELISA标准曲线的建立第29-30页
    2.4 小结第30-31页
第3章 DON全抗原的生物合成及其ELISA的建立第31-47页
    3.1 实验材料第31-33页
        3.1.1 仪器设备第31-32页
        3.1.2 生物材料和试剂第32页
        3.1.3 主要溶液的配制第32-33页
    3.2 实验方法第33-38页
        3.2.1 E.coli DH5α、E.coli TB1感受态细胞的制备第33页
        3.2.2 D_8-MBP表达载体的构建第33-35页
        3.2.3 DON全抗原(D_8-MBP)的生物合成第35-36页
        3.2.4 基于D_8-MBP建立ELISA(D_8-MBP-ELISA)第36-37页
        3.2.5 D_8-MBP免疫学性能的影响因素第37-38页
        3.2.6 D_8-MBP的特异性分析第38页
    3.3 结果与讨论第38-46页
        3.3.1 D_8-MBP表达载体的构建第38-40页
        3.3.2 D_8-MBP的表达与纯化第40-41页
        3.3.3 D_8-MBP-ELISA的建立第41-43页
        3.3.4 D_8-MBP免疫学性能的影响因素第43-45页
            3.3.4.1 pH值对D_8-MBP的影响第43页
            3.3.4.2 盐离子浓度对D_8-MBP的影响第43-44页
            3.3.4.3 热处理对D_8-MBP的影响第44-45页
        3.3.5 D_8-MBP特异性分析第45-46页
    3.4 小结第46-47页
第4章 基于D_8-MBP及胶体金建立了D_8-MBP-GICA第47-56页
    4.1 实验材料第47-48页
        4.1.1 仪器设备第47页
        4.1.2 生物材料和试剂第47-48页
    4.2 试验方法第48-50页
        4.2.1 两步法合成海胆状胶体金(Gold nanoflowers,Au NFs)第48页
        4.2.2 胶体金试纸条的组装第48-49页
        4.2.3 抗体偶联海胆状胶体金条件的优化第49页
        4.2.4 抗原划线浓度的优化第49页
        4.2.5 抗体标记浓度的优化第49页
        4.2.6 D_8-MBP-GICA检测流程第49-50页
        4.2.7 D_8-MBP-GICA灵敏度的测定第50页
    4.3 结果与讨论第50-55页
        4.3.1 胶体金的表征第50-52页
        4.3.2 抗体偶联海胆状胶体金条件的优化第52-53页
        4.3.3 抗原划线浓度的优化第53页
        4.3.4 抗体标记浓度的优化第53-54页
        4.3.5 灵敏度的测定第54-55页
    4.4 小结第55-56页
第5章 实际样品检测中的应用第56-62页
    5.1 实验材料第56页
        5.1.1 仪器设备第56页
        5.1.2 生物材料和试剂第56页
    5.2 试验方法第56-57页
        5.2.1 D_8-MBP-ELISA的实际样品检测第56-57页
        5.2.2 样品的加标回收第57页
        5.2.3 D_8-MBP-GICA的实际样品检测第57页
        5.2.4 ELISA试剂盒验证方法正确性第57页
    5.3 结果与讨论第57-60页
        5.3.1 样品的加标回收第57-58页
        5.3.2 三种方法检测实际样品中DON含量的比较第58-60页
    5.4 小结第60-62页
第6章 结论与展望第62-63页
    6.1 结论第62页
    6.2 展望第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-69页
硕士期间研究成果第69页

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