| 符号说明 | 第16-17页 |
| 第一部分: HPS研究现状(综述) | 第17-35页 |
| 1、HPS的命名和临床表现 | 第17-20页 |
| 2、HPS的细胞和细胞器缺陷 | 第20-21页 |
| 3、HPS的分子缺陷 | 第21-25页 |
| 4、HPS研究展望 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-35页 |
| 第二部分: HPS1和HPS2基因对眼部黑色素合成及酪氨酸酶分布的研究 | 第35-87页 |
| 中文摘要 | 第35-37页 |
| Abstract | 第37-41页 |
| 第一章 前言 | 第41-47页 |
| 1.1、HPS病人及其小鼠模型存在眼部异常 | 第41页 |
| 1.2、哺乳动物眼睛的着色结构 | 第41-42页 |
| 1.3、黑色素体 | 第42-46页 |
| 1.3.1、黑色素体的分期 | 第42-43页 |
| 1.3.2、眼部黑色素体的功能 | 第43页 |
| 1.3.3、眼部黑色素体的胚胎来源 | 第43-44页 |
| 1.3.4、膜泡运输系统在黑色素合成中的作用 | 第44-45页 |
| 1.3.5、HPS小鼠体内的黑色素体异常 | 第45-46页 |
| 1.4、脂褐质体 | 第46-47页 |
| 1.4.1、脂褐质体的来源与生物学特性 | 第46页 |
| 1.4.2、脂褐质体与HPS综合症 | 第46-47页 |
| 第二章 材料与方法 | 第47-55页 |
| 2.1、试剂与仪器 | 第47-48页 |
| 2.1.1、主要生化及分子生物学试剂 | 第47页 |
| 2.1.2、主要仪器和设备 | 第47-48页 |
| 2.2、实验方法 | 第48-52页 |
| 2.2.1、实验动物繁育 | 第48页 |
| 2.2.2、组织获取、包埋及切片 | 第48页 |
| 2.2.3、HE染色 | 第48-49页 |
| 2.2.4、碱溶性黑色素含量测定 | 第49页 |
| 2.2.5、酪氨酸酶活力吸光度法检测 | 第49页 |
| 2.2.6、Brandford蛋白定量 | 第49-50页 |
| 2.2.7、酪氨酸酶活力的SDS-PAGE检测 | 第50页 |
| 2.2.8、10%SDS-PAGE电泳 | 第50-51页 |
| 2.2.9、Western-blot分析(内参β-tubulin及cathepsin-D) | 第51页 |
| 2.2.10、透射电镜分析 | 第51-52页 |
| 2.2.11、脂褐质自发荧光分析 | 第52页 |
| 2.2.12、酪氨酸酶组织化学染色 | 第52页 |
| 2.2.13、统计学分析 | 第52页 |
| 2.3、常用试剂配制 | 第52-55页 |
| 第三章 实验结果 | 第55-71页 |
| 3.1、B6、ep、pe及双杂合小鼠眼球的着色过程分析 | 第55-56页 |
| 3.2、B6、ep及pe小鼠眼球色素含量的定量分析 | 第56-57页 |
| 3.3、B6、ep、pe及双杂合小鼠眼球前部组织的着色对比 | 第57-58页 |
| 3.4、B6、ep、pe及双杂合小鼠睫状体的着色对比 | 第58-59页 |
| 3.5、7日龄及3月龄的B6、ep以及pe小鼠虹膜的电镜水平分析 | 第59-63页 |
| 3.5.1、ep和pe小鼠的虹膜着色低于野生型小鼠 | 第62页 |
| 3.5.2、7日龄的ep和pe小鼠虹膜基质层中的黑色素体成熟度高于成年期 | 第62页 |
| 3.5.3、成年ep小鼠虹膜基质层中含有巨大黑色素体 | 第62页 |
| 3.5.4、pe小鼠虹膜中的黑色素体数目增长速度比ep小鼠更慢 | 第62-63页 |
| 3.5.5、pe小鼠虹膜黑色素体的成熟度下降速度比ep小鼠更快 | 第63页 |
| 3.6、pe小鼠中Cathepsin-D含量高于B6和ep小鼠 | 第63-64页 |
| 3.7、(ep,ep/ pe,pe)双突变小鼠虹膜的电镜水平分析 | 第64-65页 |
| 3.8、B6,ep及pe小鼠眼球中活性酪氨酸酶分布的分析 | 第65-66页 |
| 3.9、B6,ep及pe小鼠眼球中总酪氨酸酶活性的分析 | 第66-68页 |
| 3.10、B6,ep及pe小鼠RPE中脂褐质积累的分析 | 第68-71页 |
| 3.10.1、ep小鼠RPE中的着色低于B6和pe小鼠,脂褐质积累高于B6和pe小鼠 | 第68-69页 |
| 3.10.2、ep小鼠RPE中脂褐质的自发荧光波长短于B6和pe小鼠 | 第69-71页 |
| 第四章 讨论 | 第71-78页 |
| 4.1、不同胚胎来源的黑色素细胞中存在不同表型 | 第72-75页 |
| 4.1.1、ep小鼠眼球中不同胚胎来源的黑色素细胞中具有不同表型 | 第72-74页 |
| 4.1.2、pe小鼠眼球中不同胚胎来源的黑色素细胞中也具有不同表型 | 第74-75页 |
| 4.2、HPS1和HPS2突变对黑色素合成及黑色素体发生的影响随个体发育逐渐显现 | 第75页 |
| 4.3、HPS1和HPS2应为完全显性,且在功能上是相互独立的 | 第75-76页 |
| 4.4、活性酪氨酸酶在ep和pe小鼠中分布不同 | 第76-77页 |
| 4.4.1、活性酪氨酸酶在ep和pe小鼠中有不同的组织学分布 | 第76页 |
| 4.4.2、酪氨酸酶在ep和pe小鼠中有不同的亚细胞分布 | 第76-77页 |
| 4.5、ep小鼠的RPE层中有明显的脂褐质积累现象 | 第77-78页 |
| 小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 第三部分: PALE EAR和PEARL小鼠生殖力降低及精子生成异常的研究 | 第87-135页 |
| 中文摘要 | 第87-89页 |
| Abstract | 第89-91页 |
| 第一章 前言 | 第91-99页 |
| 1.1、不孕不育症概述 | 第91页 |
| 1.2、哺乳动物雄性生殖系统概述 | 第91-93页 |
| 1.2.1、睾丸 | 第92页 |
| 1.2.2、附睾 | 第92页 |
| 1.2.3、输精管 | 第92-93页 |
| 1.2.4、生殖系统附属性腺 | 第93页 |
| 1.3、哺乳动物精子发生概述 | 第93-95页 |
| 1.3.1、哺乳动物成熟精子的形态 | 第93页 |
| 1.3.2、哺乳动物精子成熟过程中的四个典型时期 | 第93-95页 |
| 1.3.3、精子顶体中的关键酶 | 第95页 |
| 1.4、生殖系统发育与HPS基因的关系 | 第95-98页 |
| 1.4.1、β-catenin在雄性生殖中的作用 | 第95页 |
| 1.4.2、β-catenin与PCP-2的相互作用 | 第95-96页 |
| 1.4.3、PCP-2与AP-3的相互作用 | 第96页 |
| 1.4.4、HPS蛋白通过溶酶体发生过程在精子发生中发挥作用 | 第96-97页 |
| 1.4.5、HPS蛋白通过锌元素的转运过程在精子发生中发挥作用 | 第97-98页 |
| 1.5、膜泡运输及细胞器生成研究在不孕不育病因探索中的意义 | 第98-99页 |
| 第二章 实验材料及方法 | 第99-107页 |
| 2.1、试剂与仪器 | 第99页 |
| 2.1.1、主要生化及分子生物学试剂 | 第99页 |
| 2.1.2、主要仪器和设备 | 第99页 |
| 2.2、实验方法 | 第99-105页 |
| 2.2.1、大规模交配实验 | 第99页 |
| 2.2.2、生殖器官形态学观察 | 第99-100页 |
| 2.2.3、生殖器官重量分析 | 第100页 |
| 2.2.4、组织获取、包埋及切片 | 第100页 |
| 2.2.5、精子悬液获取、孵育 | 第100页 |
| 2.2.6、精子计数 | 第100-101页 |
| 2.2.7、计算机辅助精子活力分析(CASA) | 第101页 |
| 2.2.8、精子发生透射电镜观察 | 第101-102页 |
| 2.2.9、全血微量元素分析实验 | 第102页 |
| 2.2.10、Zinquin探针的锌离子定位 | 第102-103页 |
| 2.2.11、睾酮含量测试 | 第103页 |
| 2.2.12、精子获能及顶体酶释放试验(CTC染色) | 第103-104页 |
| 2.2.13、Western blot分析(β-catenin) | 第104-105页 |
| 2.2.14、统计学分析 | 第105页 |
| 2.3、常用试剂配制 | 第105-107页 |
| 第三章 实验结果 | 第107-127页 |
| 3.1、86、ep及pe雄鼠使野生型雌鼠受孕几率的统计 | 第107-108页 |
| 3.2、86、ep及pe雄鼠每窝后代数量的统计 | 第108-109页 |
| 3.3、86、ep及pe雄鼠睾丸、附睾的形态学观察及重量比较 | 第109-111页 |
| 3.4、3种小鼠睾丸、附睾的病理切片观察 | 第111-115页 |
| 3.5、B6、ep及pe雄鼠附睾尾部的精子计数 | 第115-116页 |
| 3.6、B6、ep及pe雄鼠获能前后精子的活力分析 | 第116-117页 |
| 3.7、B6及pe雄鼠精子发生过程的电镜分析 | 第117-120页 |
| 3.8、B6、ep及pe雄鼠精子锌离子的亚细胞定位 | 第120-122页 |
| 3.9、B6、ep及pe雄鼠的血清睾酮含量对比 | 第122-123页 |
| 3.10、B6、ep及pe雄鼠顶体酶释放能力对比 | 第123-125页 |
| 3.11、B6及pe雄鼠的β-catenin表达量对比 | 第125-127页 |
| 第四章 讨论 | 第127-130页 |
| 4.1、Pale ear和pearl雄鼠生殖力下降的具体表现不同 | 第127-128页 |
| 4.2、pe小鼠睾丸的发育不良可能与睾丸细胞胞浆中β-catenin的高表达有关 | 第128页 |
| 4.3、AP-3复合体与睾丸细胞胞浆中β-catenin高表达的关系 | 第128-129页 |
| 4.4、pe小鼠精子顶体酶分布异常与AP-3复合体功能的联系 | 第129页 |
| 4.5、BLOC-3和AP-3复合体可能通过金属离子转运影响精子的数目和活力 | 第129-130页 |
| 小结 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-135页 |
| 博士研究生期间发表的论文列表 | 第135-137页 |
| SCI论文 | 第135页 |
| 会议论文 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137-139页 |
| 附件 | 第139-178页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第178页 |
