摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
1.1 苦瓜籽的国内外研究现状 | 第11-15页 |
1.1.1 苦瓜籽简介 | 第11页 |
1.1.2 苦瓜籽核糖体失活蛋白(RIP)研究 | 第11-13页 |
1.1.3 苦瓜籽胰蛋白酶研究 | 第13-15页 |
1.2 miRN A的研究现状 | 第15-20页 |
1.2.1 miRN A简介 | 第15页 |
1.2.2 miRN A的生物合成 | 第15-16页 |
1.2.3 miRN A在癌症发生中的调控作用 | 第16-18页 |
1.2.4 miRN A在癌症治疗中的调控作用 | 第18-19页 |
1.2.5 抗癌天然产物与miRNA | 第19-20页 |
1.3 研究的目的和意义 | 第20页 |
1.4 主要研究内容 | 第20-22页 |
第二章 苦瓜籽主要成分及抗癌活性蛋白分析 | 第22-40页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 试验材料 | 第22-23页 |
2.2.1 苦瓜籽 | 第22页 |
2.2.2 主要试剂 | 第22页 |
2.2.3 主要仪器 | 第22-23页 |
2.3 试验方法 | 第23-30页 |
2.3.1 苦瓜籽主要成分分析 | 第23-26页 |
2.3.2 苦瓜籽蛋白分离纯化 | 第26-27页 |
2.3.3 SDS测定苦瓜籽蛋白分子量 | 第27-28页 |
2.3.4 抗肿瘤活性评价 | 第28-29页 |
2.3.5 质谱分析 | 第29-30页 |
2.4 结果与分析 | 第30-38页 |
2.4.1 苦瓜籽主要成分分析 | 第30-31页 |
2.4.2 苦瓜籽粗蛋白提取条件优化 | 第31-34页 |
2.4.3 苦瓜籽蛋白纯化 | 第34-36页 |
2.4.4 苦瓜籽活性蛋白的质谱分析 | 第36-38页 |
2.5 小结与讨论 | 第38-40页 |
第三章 苦瓜籽水提物诱导细胞凋亡的机制研究 | 第40-52页 |
3.1 引言 | 第40页 |
3.2 试验材料 | 第40-41页 |
3.2.1 肿瘤细胞 | 第40页 |
3.2.2 主要试剂 | 第40页 |
3.2.3 主要仪器 | 第40-41页 |
3.3 试验方法 | 第41-43页 |
3.3.1 苦瓜籽水提物制备及成分分析 | 第41页 |
3.3.2 肿瘤细胞存活率测定 | 第41-42页 |
3.3.3 细胞周期 | 第42页 |
3.3.4 活性氧含量测定 | 第42页 |
3.3.5 线粒体膜电位 | 第42-43页 |
3.3.6 HepG2细胞蛋白电泳 | 第43页 |
3.3.7 Hoechst 33342 染色 | 第43页 |
3.4 结果与分析 | 第43-50页 |
3.4.1 苦瓜籽水提物的主成分分析 | 第43-44页 |
3.4.2 苦瓜籽水提物对细胞存活率的影响 | 第44-46页 |
3.4.3 苦瓜籽水提物对细胞周期的影响 | 第46-47页 |
3.4.4 苦瓜籽水提物对活性氧含量的影响 | 第47页 |
3.4.5 苦瓜籽水提物对线粒体膜电位的影响 | 第47-48页 |
3.4.6 苦瓜籽水提物对细胞蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
3.4.7 苦瓜籽水提物对细胞核形态的影响 | 第49-50页 |
3.5 小结与讨论 | 第50-52页 |
第四章 苦瓜籽水提物通过下调miR-421 诱导HepG2凋亡的机制 | 第52-75页 |
4.1 引言 | 第52页 |
4.2 试验材料 | 第52-55页 |
4.2.1 主要试剂 | 第52页 |
4.2.2 主要仪器 | 第52-53页 |
4.2.3 引物 | 第53-55页 |
4.3 试验方法 | 第55-60页 |
4.3.1 生物信息学分析 | 第55页 |
4.3.2 qPCR芯片 | 第55-57页 |
4.3.3 RT-PCR | 第57-59页 |
4.3.4 Western blot | 第59-60页 |
4.3.5 细胞转染 | 第60页 |
4.4 结果与分析 | 第60-74页 |
4.4.1 苦瓜籽水提物引起miRNA的差异表达 | 第60-61页 |
4.4.2 苦瓜籽水提物对miR-421 和miR1381-3p靶基因表达量的影响 | 第61-69页 |
4.4.3 miR-421 靶基因的鉴定 | 第69-74页 |
4.5 小结与讨论 | 第74-75页 |
第五章 结论与展望 | 第75-77页 |
5.1 主要结论 | 第75页 |
5.2 展望 | 第75-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-84页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其他科研成果 | 第84页 |