| 符号说明 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 1 前言 | 第18-37页 |
| ·牛肉成熟机制研究进展 | 第18-23页 |
| ·成熟过程中影响肉嫩度的因素 | 第18-20页 |
| ·骨架蛋白降解机制 | 第20-22页 |
| ·加快肉品成熟的技术 | 第22-23页 |
| ·电刺激技术在牛肉成熟中的应用 | 第23-26页 |
| ·电刺激的电压对刺激效果的影响 | 第24页 |
| ·电刺激的电流对刺激效果的影响 | 第24页 |
| ·电刺激的频率对刺激效果的影响 | 第24-25页 |
| ·电刺激的波形对刺激效果的影响 | 第25页 |
| ·实施电刺激的时间 | 第25页 |
| ·电极的类型 | 第25页 |
| ·电刺激技术在牛肉成熟中的应用现状 | 第25-26页 |
| ·蛋白质组学在肉品品质评价中的应用研究 | 第26-34页 |
| ·蛋白质组学概述 | 第26页 |
| ·蛋白质组学发展现状 | 第26-27页 |
| ·蛋白质组学的研究策略和技术路线 | 第27-28页 |
| ·蛋白质组研究中的样品制备技术 | 第28页 |
| ·蛋白质的分离 | 第28-30页 |
| ·蛋白质定量分析 | 第30-31页 |
| ·蛋白质的鉴定 | 第31-33页 |
| ·蛋白质组生物信息学 | 第33-34页 |
| ·蛋白质组学的发展趋势 | 第34页 |
| ·研究目的和意义 | 第34-35页 |
| ·主要研究内容 | 第35-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-53页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·试剂和仪器 | 第37-41页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·试剂配制 | 第38-41页 |
| ·方法 | 第41-53页 |
| ·样品处理及指标测定 | 第41-43页 |
| ·双向电泳样品的预处理 | 第43页 |
| ·IPG 干胶条再水化 | 第43-44页 |
| ·等电聚焦电泳 | 第44页 |
| ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第44-46页 |
| ·染色 | 第46页 |
| ·图像扫描与软件分析 | 第46页 |
| ·胶内取点与酶切 | 第46-47页 |
| ·质谱鉴定 | 第47页 |
| ·Real-time PCR 转录水平鉴定 | 第47-52页 |
| ·Western blot 翻译水平鉴定 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-102页 |
| ·电刺激对牛背最长肌食用品质影响 | 第53-55页 |
| ·电刺激对牛背最长肌温度的影响 | 第53页 |
| ·电刺激对牛背最长肌 pH 值的影响 | 第53-54页 |
| ·电刺激对牛背最长肌剪切力值影响 | 第54-55页 |
| ·建立牛背最长肌双向电泳体系 | 第55-61页 |
| ·样品处理方法对双向电泳的影响 | 第55-56页 |
| ·裂解液对双向电泳的影响 | 第56-58页 |
| ·上样量对双向电泳的影响 | 第58-59页 |
| ·聚焦条件对双向电泳的影响 | 第59-60页 |
| ·其它因素对双向电泳的影响 | 第60-61页 |
| ·电刺激对宰后 1d 牛背最长肌差异蛋白点分析及质谱鉴定 | 第61-76页 |
| ·双向电泳图谱 | 第61页 |
| ·双向电泳分离的重复性及效果分析 | 第61-62页 |
| ·比较蛋白质组分析 | 第62-63页 |
| ·差异蛋白点凝胶放大图及 3D 图比较分析 | 第63-65页 |
| ·差异蛋白点质谱鉴定 | 第65-76页 |
| ·电刺激对宰后 1d 牛背最长肌差异蛋白点 Real-time PCR 鉴定 | 第76-81页 |
| ·RNA 质量分析 | 第76-77页 |
| ·特异性扩增分析 | 第77-79页 |
| ·Desmin 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第79页 |
| ·Troponin-T 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第79页 |
| ·Creatine kinase 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第79-80页 |
| ·Peroxiredoxin-6 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第80页 |
| ·Phosphatidylethanolamine-binding protein 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第80-81页 |
| ·电刺激对宰后 3d 牛背最长肌差异蛋白点分析及质谱鉴定 | 第81-96页 |
| ·双向电泳图谱 | 第81-82页 |
| ·双向电泳分离的重复性及效果分析 | 第82页 |
| ·比较蛋白质组分析 | 第82-83页 |
| ·差异蛋白点凝胶放大图及 3D 图比较分析 | 第83-85页 |
| ·差异蛋白点质谱鉴定 | 第85-96页 |
| ·电刺激对宰后 3d 牛背最长肌差异蛋白点 Real-time PCR 鉴定 | 第96-100页 |
| ·RNA 质量分析 | 第96页 |
| ·特异性扩增分析 | 第96-97页 |
| ·Myosin binding protein H 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第97-98页 |
| ·Histone H3.3 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第98页 |
| ·Triosephosphate isomerase 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第98-99页 |
| ·Creatine kinase 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第99页 |
| ·Methyltransferase 基因 Real-time PCR 鉴定 | 第99-100页 |
| ·电刺激宰后差异蛋白点 Desmin 和 Troponin-T 的 Western blot 鉴定 | 第100-102页 |
| ·Desmin 的 Western blot 鉴定 | 第100-101页 |
| ·Troponin-T 的 Western blot 鉴定 | 第101-102页 |
| 4 讨论 | 第102-118页 |
| ·差异蛋白质的生物信息学分析 | 第102-106页 |
| ·Desmin 生物信息学分析 | 第102页 |
| ·Troponin-T 生物信息学分析 | 第102-103页 |
| ·Phosphatidylethanolamine-binding protein 生物信息学分析 | 第103-104页 |
| ·Creatine kinase 生物信息学分析 | 第104页 |
| ·Peroxiredoxin-6 生物信息学分析 | 第104页 |
| ·Myosin binding protein H 生物信息学分析 | 第104-105页 |
| ·Histone H3.3 生物信息学分析 | 第105页 |
| ·Triosephosphate isomerase 生物信息学分析 | 第105页 |
| ·Methyltransferase 生物信息学分析 | 第105-106页 |
| ·电刺激通过糖酵解代谢途径影响嫩度 | 第106页 |
| ·电刺激通过钙蛋白酶途径影响嫩度 | 第106-107页 |
| ·电刺激通过溶酶体途径影响嫩度 | 第107-109页 |
| ·电刺激通过氧化应激途径影响嫩度 | 第109-117页 |
| ·Prx6 在 p38 MAPK 级联途径中的作用机制 | 第113-115页 |
| ·PEBP 在 Ras-MAPK 级联途径中的作用机制 | 第115-116页 |
| ·MT 在 PI3K/Akt 信号通路中的作用机制 | 第116-117页 |
| ·电刺激影响嫩度研究展望 | 第117-118页 |
| 5 结论 | 第118-119页 |
| 创新点 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第139页 |
