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多变量在线监控实现猪α干扰素在毕赤酵母中高效表达

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-12页
   ·干扰素简介第7页
   ·猪α干扰素的研究进展第7-8页
   ·毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统第8-9页
   ·微生物发酵过程的研究现状和发展趋势第9-11页
     ·发酵过程控制概论第9-10页
     ·发酵控制现状和发展趋势第10-11页
   ·立题意义及研究目的第11页
   ·主要研究内容第11-12页
第二章 材料与方法第12-18页
   ·材料第12-13页
     ·微生物菌种第12页
     ·细胞与病毒第12页
     ·毕赤酵母培养基第12页
     ·WISH 细胞培养基第12页
     ·主要仪器第12-13页
   ·培养方法第13-15页
     ·种子培养第13页
     ·5L 发酵罐培养第13-14页
     ·10L 发酵罐培养第14页
     ·WISH 细胞的复苏、传代第14页
     ·VSV 病毒的增殖第14-15页
   ·分析方法第15-18页
     ·O_2 和 CO_2 分压的测定及 OUR、CER 和 RQ(respiratory quotient)的计算第15页
     ·甲醇浓度的离线测定第15页
     ·甲醇浓度的在线测定第15页
     ·菌体浓度的测定第15-16页
     ·目的蛋白的分析第16页
     ·总蛋白浓度的测定第16-17页
     ·重组猪IFNα抗病毒活性的测定第17-18页
第三章 结果与讨论第18-37页
   ·5L 发酵罐条件下猪α干扰素生产条件优化第18-24页
     ·诱导阶段,甲醇浓度对细胞生长和pIFN-α活性的影响第18-20页
     ·不同甲醇浓度条件下总蛋白含量比较第20-21页
     ·SDS-PAGE 电泳图验证第21-22页
     ·不同菌体浓度条件下pIFN-α活性比较第22-23页
     ·多批次发酵实验总结第23页
     ·小结第23-24页
   ·多变量在线测量条件下猪α干扰素的高效表达第24-32页
     ·诱导阶段甲醇浓度在 10g/L 水平下 OUR、CER 及 RQ 的变化趋势第24-25页
     ·诱导阶段甲醇浓度在 15~20g/L 和 0~5g/L 范围内 RQ 的变化趋势第25-26页
     ·诱导阶段甲醇浓度在约 8~12g/L 水平下 RQ 的变化趋势另两批实验验证第26-27页
     ·不同甲醇浓度水平下 OUR 及相应 pIFN-α 活性比较第27-28页
     ·相同甲醇浓度条件下OUR 差异影响pIFN-α活性第28页
     ·期比增殖速度对诱导期pIFN-α活性和OUR 的影响第28-30页
     ·小结第30-32页
   ·10L 发酵罐实验第32-37页
     ·5 升罐和10 升罐前后菌体生长情况比较第32-33页
     ·5 升罐和10 升罐甘油比消耗速度比较第33-34页
     ·5 升罐和10 升罐生长期和诱导期OUR 及总蛋白含量比较第34-35页
     ·5 升罐和10 升罐目标蛋白SDS-PAGE 电泳图对比第35-36页
     ·5L 发酵罐和10L 发酵罐参数比较第36页
     ·小结第36-37页
第四章 结论与展望第37-39页
   ·结论第37页
   ·展望第37-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-42页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第42页

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