摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-12页 |
·干扰素简介 | 第7页 |
·猪α干扰素的研究进展 | 第7-8页 |
·毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统 | 第8-9页 |
·微生物发酵过程的研究现状和发展趋势 | 第9-11页 |
·发酵过程控制概论 | 第9-10页 |
·发酵控制现状和发展趋势 | 第10-11页 |
·立题意义及研究目的 | 第11页 |
·主要研究内容 | 第11-12页 |
第二章 材料与方法 | 第12-18页 |
·材料 | 第12-13页 |
·微生物菌种 | 第12页 |
·细胞与病毒 | 第12页 |
·毕赤酵母培养基 | 第12页 |
·WISH 细胞培养基 | 第12页 |
·主要仪器 | 第12-13页 |
·培养方法 | 第13-15页 |
·种子培养 | 第13页 |
·5L 发酵罐培养 | 第13-14页 |
·10L 发酵罐培养 | 第14页 |
·WISH 细胞的复苏、传代 | 第14页 |
·VSV 病毒的增殖 | 第14-15页 |
·分析方法 | 第15-18页 |
·O_2 和 CO_2 分压的测定及 OUR、CER 和 RQ(respiratory quotient)的计算 | 第15页 |
·甲醇浓度的离线测定 | 第15页 |
·甲醇浓度的在线测定 | 第15页 |
·菌体浓度的测定 | 第15-16页 |
·目的蛋白的分析 | 第16页 |
·总蛋白浓度的测定 | 第16-17页 |
·重组猪IFNα抗病毒活性的测定 | 第17-18页 |
第三章 结果与讨论 | 第18-37页 |
·5L 发酵罐条件下猪α干扰素生产条件优化 | 第18-24页 |
·诱导阶段,甲醇浓度对细胞生长和pIFN-α活性的影响 | 第18-20页 |
·不同甲醇浓度条件下总蛋白含量比较 | 第20-21页 |
·SDS-PAGE 电泳图验证 | 第21-22页 |
·不同菌体浓度条件下pIFN-α活性比较 | 第22-23页 |
·多批次发酵实验总结 | 第23页 |
·小结 | 第23-24页 |
·多变量在线测量条件下猪α干扰素的高效表达 | 第24-32页 |
·诱导阶段甲醇浓度在 10g/L 水平下 OUR、CER 及 RQ 的变化趋势 | 第24-25页 |
·诱导阶段甲醇浓度在 15~20g/L 和 0~5g/L 范围内 RQ 的变化趋势 | 第25-26页 |
·诱导阶段甲醇浓度在约 8~12g/L 水平下 RQ 的变化趋势另两批实验验证 | 第26-27页 |
·不同甲醇浓度水平下 OUR 及相应 pIFN-α 活性比较 | 第27-28页 |
·相同甲醇浓度条件下OUR 差异影响pIFN-α活性 | 第28页 |
·期比增殖速度对诱导期pIFN-α活性和OUR 的影响 | 第28-30页 |
·小结 | 第30-32页 |
·10L 发酵罐实验 | 第32-37页 |
·5 升罐和10 升罐前后菌体生长情况比较 | 第32-33页 |
·5 升罐和10 升罐甘油比消耗速度比较 | 第33-34页 |
·5 升罐和10 升罐生长期和诱导期OUR 及总蛋白含量比较 | 第34-35页 |
·5 升罐和10 升罐目标蛋白SDS-PAGE 电泳图对比 | 第35-36页 |
·5L 发酵罐和10L 发酵罐参数比较 | 第36页 |
·小结 | 第36-37页 |
第四章 结论与展望 | 第37-39页 |
·结论 | 第37页 |
·展望 | 第37-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第42页 |