摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-21页 |
1.1 丙烯酰胺的研究进展 | 第12-15页 |
1.1.1 丙烯酰胺的性质与应用 | 第12-13页 |
1.1.2 食品中丙烯酰胺的形成与防治 | 第13-14页 |
1.1.3 丙烯酰胺的毒性作用 | 第14-15页 |
1.2 细胞氧化应激的概述 | 第15-19页 |
1.2.1 细胞氧化应激现象 | 第15页 |
1.2.2 氧化应激的防护与核转录因子Nrf2 | 第15-18页 |
1.2.3 细胞内谷胱甘肽及其相关酶 | 第18-19页 |
1.3 水飞蓟素的概述 | 第19页 |
1.4 立题目的及意义 | 第19-20页 |
1.5 研究内容 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 试验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 细胞系 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-33页 |
2.2.1 PC12细胞的培养 | 第24-25页 |
2.2.2 细胞毒性试验(MTT法) | 第25-26页 |
2.2.3 细胞形态的观察 | 第26页 |
2.2.4 氧化活性的检测 | 第26-28页 |
2.2.5 实时荧光定量(qRT-PCR)相对定量分析基因mRNA的表达情况 | 第28-30页 |
2.2.6 免疫印迹杂交法(Western blot)分析蛋白的表达情况 | 第30-32页 |
2.2.7 数据统计与分析 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-52页 |
3.1 PC12细胞的培养及生长曲线 | 第33-34页 |
3.2 丙烯酰胺对PC12细胞的毒性作用 | 第34-35页 |
3.3 水飞蓟素对PC12细胞增殖的影响 | 第35页 |
3.4 水飞蓟素对丙烯酰胺所致PC12细胞毒性的影响 | 第35-36页 |
3.5 倒置显微镜观察水飞蓟素对丙烯酰胺所致PC12细胞毒性的影响 | 第36-38页 |
3.6 水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导的PC12细胞损伤中氧化活性的影响 | 第38-40页 |
3.6.1 水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导的PC12细胞损伤中ROS相对含量的变化 | 第38-39页 |
3.6.2 水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导的PC12细胞损伤中MDA含量的变化 | 第39页 |
3.6.3 水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导的PC12细胞损伤中GSH含量的变化 | 第39-40页 |
3.7 qRT-PCR相对定量分析PC12细胞中基因mRNA的表达情况 | 第40-48页 |
3.7.1 PC12细胞总RNA浓度与纯度测定的结果 | 第40-41页 |
3.7.2 qRT-PCR引物的验证结果 | 第41页 |
3.7.3 qRT-PCR检测结果 | 第41-48页 |
3.8 Western bolt法分析PC12细胞中蛋白的表达情况 | 第48-52页 |
3.8.1 PC12细胞中Gpx、GCLC和GCLM蛋白的表达情况 | 第48-49页 |
3.8.2 PC12细胞质中Nrf2蛋白的表达情况 | 第49-50页 |
3.8.3 PC12细胞核中Nrf2蛋白的表达情况 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-55页 |
4.1 水飞蓟素对丙烯酰胺所致PC12细胞氧化损伤的保护 | 第52-53页 |
4.2 水飞蓟素通过核转录因子Nrf2保护PC12细胞免受丙烯酰胺所致的氧化损伤 | 第53-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |