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水飞蓟素对丙烯酰胺所致PC12细胞氧化损伤的保护作用

摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 前言第12-21页
    1.1 丙烯酰胺的研究进展第12-15页
        1.1.1 丙烯酰胺的性质与应用第12-13页
        1.1.2 食品中丙烯酰胺的形成与防治第13-14页
        1.1.3 丙烯酰胺的毒性作用第14-15页
    1.2 细胞氧化应激的概述第15-19页
        1.2.1 细胞氧化应激现象第15页
        1.2.2 氧化应激的防护与核转录因子Nrf2第15-18页
        1.2.3 细胞内谷胱甘肽及其相关酶第18-19页
    1.3 水飞蓟素的概述第19页
    1.4 立题目的及意义第19-20页
    1.5 研究内容第20-21页
2 材料与方法第21-33页
    2.1 试验材料第21-24页
        2.1.1 细胞系第21页
        2.1.2 主要试剂第21-22页
        2.1.3 主要仪器第22-23页
        2.1.4 主要试剂的配制第23-24页
    2.2 试验方法第24-33页
        2.2.1 PC12细胞的培养第24-25页
        2.2.2 细胞毒性试验(MTT法)第25-26页
        2.2.3 细胞形态的观察第26页
        2.2.4 氧化活性的检测第26-28页
        2.2.5 实时荧光定量(qRT-PCR)相对定量分析基因mRNA的表达情况第28-30页
        2.2.6 免疫印迹杂交法(Western blot)分析蛋白的表达情况第30-32页
        2.2.7 数据统计与分析第32-33页
3 结果与分析第33-52页
    3.1 PC12细胞的培养及生长曲线第33-34页
    3.2 丙烯酰胺对PC12细胞的毒性作用第34-35页
    3.3 水飞蓟素对PC12细胞增殖的影响第35页
    3.4 水飞蓟素对丙烯酰胺所致PC12细胞毒性的影响第35-36页
    3.5 倒置显微镜观察水飞蓟素对丙烯酰胺所致PC12细胞毒性的影响第36-38页
    3.6 水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导的PC12细胞损伤中氧化活性的影响第38-40页
        3.6.1 水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导的PC12细胞损伤中ROS相对含量的变化第38-39页
        3.6.2 水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导的PC12细胞损伤中MDA含量的变化第39页
        3.6.3 水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导的PC12细胞损伤中GSH含量的变化第39-40页
    3.7 qRT-PCR相对定量分析PC12细胞中基因mRNA的表达情况第40-48页
        3.7.1 PC12细胞总RNA浓度与纯度测定的结果第40-41页
        3.7.2 qRT-PCR引物的验证结果第41页
        3.7.3 qRT-PCR检测结果第41-48页
    3.8 Western bolt法分析PC12细胞中蛋白的表达情况第48-52页
        3.8.1 PC12细胞中Gpx、GCLC和GCLM蛋白的表达情况第48-49页
        3.8.2 PC12细胞质中Nrf2蛋白的表达情况第49-50页
        3.8.3 PC12细胞核中Nrf2蛋白的表达情况第50-52页
4 讨论第52-55页
    4.1 水飞蓟素对丙烯酰胺所致PC12细胞氧化损伤的保护第52-53页
    4.2 水飞蓟素通过核转录因子Nrf2保护PC12细胞免受丙烯酰胺所致的氧化损伤第53-55页
5 结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第66页

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