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基于适配体识别的棒曲霉素检测方法研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
缩略符号说明第5-8页
1 引言第8-19页
   ·棒曲霉素的研究进展第8-12页
     ·棒曲霉素的来源及分布第8页
     ·棒曲霉素的理化性质第8-10页
     ·棒曲霉素的毒性第10-11页
     ·棒曲霉素的检测标准和方法第11-12页
   ·寡核苷酸适配体及SELEX技术第12-17页
     ·寡核苷酸适配体第12-13页
     ·寡核苷酸适配体的筛选-SELEX技术第13-14页
     ·SELEX的筛选方法第14-15页
     ·SELEX在食品安全检测领域的应用第15-17页
   ·纳米金第17页
     ·纳米金及其应用第17页
     ·纳米金在食品安全检测方面的应用第17页
   ·本课题的立题意义与内容第17-19页
     ·本课题的立题意义第17-18页
     ·本课题的研究内容第18-19页
2 实验材料与方法第19-29页
   ·主要试剂与材料第19页
   ·主要仪器与设备第19页
   ·随机单链DNA文库和引物的构建第19-20页
   ·基于氧化石墨烯的棒曲霉素适配体筛选及鉴定第20-23页
     ·基于氧化石墨烯的SELEX技术第20页
     ·棒曲霉素的适配体筛选第20-23页
     ·棒曲霉素适配体的鉴定第23页
   ·基于适配体识别和纳米金变色效应的棒曲霉素可视化检测方法第23-25页
     ·检测原理第23页
     ·纳米金的制备第23-24页
     ·适配体吸附纳米金浓度的初探第24页
     ·适配体吸附纳米金孵育时间的优化第24页
     ·NaCl浓度的优化第24页
     ·适配体吸附纳米金浓度的优化第24-25页
     ·棒曲霉素的检测第25页
     ·特异性检测实验第25页
     ·苹果汁中棒曲霉素的加标回收测定第25页
   ·基于葡萄糖氧化酶和方酸铁体系的棒曲霉素可视化检测方法第25-29页
     ·检测原理第25-26页
     ·葡萄糖氧化酶和方酸铁体系的验证及反应时间的优化第26页
     ·捕获探针的制备与条件优化第26-27页
     ·氨基化磁珠的制备第27页
     ·分离探针的制备与条件优化第27页
     ·捕获探针与分离探针的连接条件优化第27页
     ·棒曲霉素的检测第27页
     ·特异性检测实验第27页
     ·苹果汁中棒曲霉素的加标回收测定第27-29页
3 结果与讨论第29-51页
   ·基于氧化石墨烯的棒曲霉素适配体的筛选及鉴定第29-37页
     ·ssDNA与氧化石墨烯非固定孵育体系的确定及优化第29-30页
     ·PCR扩增体系优化第30-31页
     ·适配体筛选轮数的确定第31-32页
     ·棒曲霉素适配体的克隆测序结果与分析第32-33页
     ·候选适配体的亲和性分析第33-34页
     ·候选适配体的特异性分析第34页
     ·候选适配体的二级结构分析第34-37页
   ·基于适配体识别和纳米金变色效应的棒曲霉素检测方法第37-42页
     ·纳米金的表征第37页
     ·适配体吸附纳米金浓度的初探优化第37-38页
     ·纳米金适配体孵育时间的优化第38页
     ·NaCl溶液浓度的优化第38-39页
     ·适配体修饰纳米金孵育浓度的优化第39-40页
     ·线性范围和检出限第40页
     ·特异性分析第40-42页
     ·苹果汁中棒曲霉素加标回收实验第42页
   ·基于葡萄糖氧化酶和方酸铁体系的棒曲霉素可视化检测方法第42-51页
     ·葡萄糖氧化酶和方酸体系的验证及优化第42-45页
     ·适配体与葡萄糖氧化酶修饰纳米金的浓度优化第45页
     ·氨基化磁珠的表征第45-46页
     ·亲和素包被氨基化磁珠的用量及温度的优化第46页
     ·生物素化适配体连接已包被磁珠的量的优化第46-47页
     ·捕获探针与分离探针的连接第47-48页
     ·线性范围和检出限第48-49页
     ·特异性分析第49-50页
     ·苹果汁中棒曲霉素加标回收实验第50页
     ·方法比较第50-51页
主要结论与展望第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-61页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第61页

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