| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 牛羊乳掺假及掺假检测 | 第12-14页 |
| 1.1.1 食品安全及乳品掺假 | 第12-13页 |
| 1.1.2 牛羊乳基本组成的比较 | 第13页 |
| 1.1.3 牛羊乳掺假检测 | 第13-14页 |
| 1.2 基于乳小分子或蛋白质大分子的乳制品检测方法 | 第14-18页 |
| 1.2.1 基于乳生物小分子差异的检测方法 | 第14-15页 |
| 1.2.2 基于乳蛋白质差异的检测方法 | 第15-18页 |
| 1.3 基于DNA差异的乳制品检测方法 | 第18-23页 |
| 1.3.1 乳DNA的含量分布及稳定性 | 第18页 |
| 1.3.2 乳DNA提取方法及验证 | 第18-19页 |
| 1.3.3 PCR技术 | 第19页 |
| 1.3.4 目的基因选取 | 第19-20页 |
| 1.3.5 PCR扩增检测方法 | 第20-22页 |
| 1.3.6 乳DNA检测方法的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4 主要研究内容和技术路线 | 第23-26页 |
| 1.4.1 课题研究的目的和意义 | 第23页 |
| 1.4.2 课题主要研究内容 | 第23-24页 |
| 1.4.3 研究总体设计思路 | 第24-26页 |
| 2 牛羊乳DNA提取方法及羊乳中掺入牛乳的常规PCR方法的建立 | 第26-40页 |
| 2.1 引言及技术路线 | 第26页 |
| 2.2 试剂与仪器 | 第26-28页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第28页 |
| 2.3 材料与方法 | 第28-31页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.3.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第31-38页 |
| 2.4.1 牛羊乳DNA提取的完整性鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4.2 牛羊乳DNA浓度的定量 | 第32-34页 |
| 2.4.3 双重PCR体系中不同DNA提取方法的对比 | 第34-36页 |
| 2.4.4 有机溶剂法、快速DNA试剂盒法及磁珠法的比较结果归纳 | 第36页 |
| 2.4.5 磁珠法和快速DNA试剂盒法对比模拟掺假样品中牛源性成分的检测 | 第36-37页 |
| 2.4.6 磁珠法对市售奶制品中牛源性成分的应用性检测 | 第37-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-40页 |
| 3 基于SYBRGreen染料的荧光定量PCR技术检测乳制品掺假 | 第40-51页 |
| 3.1 引言及技术路线 | 第40页 |
| 3.2 试剂与仪器 | 第40-41页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第40-41页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第41页 |
| 3.3 材料与方法 | 第41-42页 |
| 3.3.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.3.2 实验方法 | 第41-42页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第42-50页 |
| 3.4.1 乳DNA中牛、羊源性成分的特异性检测 | 第42-44页 |
| 3.4.2 试剂及扩增条件优化 | 第44-47页 |
| 3.4.3 荧光定量PCR体系对牛、羊乳DNA的灵敏度检测 | 第47页 |
| 3.4.4 单重荧光定量模拟羊乳样品中掺入牛乳最低检测限的确立 | 第47-49页 |
| 3.4.5 单重荧光定量PCR对市售羊乳制品的应用性检测 | 第49-50页 |
| 3.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 4 基于EvaGreen染料的双重荧光定量PCR技术检测乳制品掺假 | 第51-66页 |
| 4.1 引言及技术路线 | 第51页 |
| 4.2 试剂与仪器 | 第51-52页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第51-52页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第52页 |
| 4.3 材料与方法 | 第52-53页 |
| 4.3.1 实验材料 | 第52页 |
| 4.3.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第53-65页 |
| 4.4.1 双重荧光定量PCR体系的建立和验证 | 第53-54页 |
| 4.4.2 引物二聚体的降低实验 | 第54-56页 |
| 4.4.3 双重荧光定量PCR试剂及扩增条件优化 | 第56-61页 |
| 4.4.4 EvaGreen和SYBRGreen的灵敏度比较 | 第61-62页 |
| 4.4.5 双重荧光定量PCR中羊乳掺入牛乳最低检测限的确立 | 第62-63页 |
| 4.4.6 双重荧光定量PCR对市售羊乳制品的应用性检测 | 第63-65页 |
| 4.7 本章小结 | 第65-66页 |
| 5 基于[Ru(bpy)2dppz]2+染料的荧光定量PCR技术检测乳DNA的方法探究 | 第66-75页 |
| 5.1 引言及技术路线 | 第66-67页 |
| 5.2 实验材料 | 第67页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第67页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第67页 |
| 5.3 材料与方法 | 第67-68页 |
| 5.3.1 实验材料 | 第67页 |
| 5.3.2 实验方法 | 第67-68页 |
| 5.4 结果与分析 | 第68-73页 |
| 5.4.1 Ru浓度的测定 | 第68页 |
| 5.4.2 Ru与乳DNA结合稳定性的优化 | 第68-72页 |
| 5.4.3 Ru信号结合牛羊乳DNA基本方法的确立 | 第72-73页 |
| 5.4.4 Ru作用于乳DNA的灵敏度检测 | 第73页 |
| 5.5 本章小结 | 第73-75页 |
| 6 结论 | 第75-77页 |
| 6.1 课题结论 | 第75-76页 |
| 6.2 展望 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第87-89页 |
