| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-25页 |
| 1.1 课题背景及研究目的和意义 | 第10-12页 |
| 1.1.1 课题来源 | 第10页 |
| 1.1.2 课题研究背景 | 第10-11页 |
| 1.1.3 研究目的和意义 | 第11-12页 |
| 1.2 生物膜 | 第12-20页 |
| 1.2.1 生物膜的形成 | 第12-13页 |
| 1.2.2 生物膜的检测方法 | 第13-15页 |
| 1.2.3 影响生物膜形成的因素 | 第15-16页 |
| 1.2.4 生物膜的危害 | 第16-17页 |
| 1.2.5 生物膜的控制方法 | 第17-19页 |
| 1.2.6 生物膜的抗性 | 第19-20页 |
| 1.3 抗菌肽 | 第20-22页 |
| 1.3.1 抗菌肽的定义 | 第20页 |
| 1.3.2 抗菌肽的作用于生物膜的机理 | 第20-21页 |
| 1.3.3 乳酸菌抗菌肽Lac-B23的应用 | 第21-22页 |
| 1.4 课题主要研究内容 | 第22-25页 |
| 1.4.1 主要研究内容 | 第22-24页 |
| 1.4.2 实验技术路线 | 第24-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-46页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第25-27页 |
| 2.1.1 菌株 | 第25页 |
| 2.1.2 培养基 | 第25页 |
| 2.1.3 试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第27页 |
| 2.2 乳酸菌抗菌肽Lac-B23的分离纯化及生物膜模型建立 | 第27-35页 |
| 2.2.1 菌种活化及初发酵液制备 | 第28页 |
| 2.2.2 初发酵液的抑菌实验 | 第28页 |
| 2.2.3 SP-Sepharose Fast Flow分离纯化乳酸菌抗菌肽Lac-B23 | 第28-29页 |
| 2.2.4 收集液的超滤离心浓缩 | 第29-30页 |
| 2.2.5 乳酸菌抗菌肽Lac-B23中蛋白浓度测定 | 第30页 |
| 2.2.6 乳酸菌抗菌肽Lac-B23各纯化阶段效价测定 | 第30-31页 |
| 2.2.7 测定乳酸菌抗菌肽Lac-B23最小抑菌浓度 | 第31页 |
| 2.2.8 荧光假单胞菌的形态学观察 | 第31页 |
| 2.2.9 荧光假单胞菌 16S rDNA序列测定及其系统发育分析 | 第31-34页 |
| 2.2.10 荧光假单胞菌生长曲线测定 | 第34页 |
| 2.2.11 荧光假单胞菌生物膜模型建立 | 第34-35页 |
| 2.3 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对生物膜结构的影响 | 第35-39页 |
| 2.3.1 扫描电镜（SEM）观察生物膜 | 第35-36页 |
| 2.3.2 生物膜代谢活性的测定 | 第36页 |
| 2.3.3 激光共聚焦显微镜（CLSM）观察胞外多糖和蛋白质变化 | 第36页 |
| 2.3.4 苯酚硫酸法定量分析胞外多糖 | 第36-37页 |
| 2.3.5 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对生物膜eDNA分泌的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.6 荧光显微镜验证胞外多糖和蛋白质变化 | 第38-39页 |
| 2.4 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对生物膜内菌体的影响 | 第39-46页 |
| 2.4.1 透射电镜（TEM）观察膜内菌体超微结构 | 第39页 |
| 2.4.2 激光共聚焦显微镜观察生物膜内菌体状态 | 第39-40页 |
| 2.4.3 流式细胞术定量分析生物膜内菌体凋亡 | 第40页 |
| 2.4.4 荧光显微镜观察生物膜内菌体状态变化 | 第40-41页 |
| 2.4.5 半定量RT-PCR检测成膜基因变化 | 第41-45页 |
| 2.4.6 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对荧光假单胞菌运动性影响 | 第45-46页 |
| 第3章 乳酸菌抗菌肽Lac-B23的分离纯化及生物膜模型建立 | 第46-58页 |
| 3.1 乳酸菌抗菌肽Lac-B23制备各阶段抑菌实验 | 第46-47页 |
| 3.2 乳酸菌抗菌肽Lac-B23的分离纯化 | 第47-48页 |
| 3.3 乳酸菌抗菌肽Lac-B23制备各阶段蛋白含量测定 | 第48页 |
| 3.4 乳酸菌抗菌肽Lac-B23制备各阶段效价测定 | 第48-50页 |
| 3.5 最小抑制浓度（MIC） | 第50-51页 |
| 3.6 生物膜模型建立 | 第51-56页 |
| 3.6.1 荧光假单胞菌的形态学观察 | 第51页 |
| 3.6.2 荧光假单胞菌的 16S rDNA序列测定 | 第51-52页 |
| 3.6.3 构建系统发育树 | 第52-53页 |
| 3.6.4 荧光假单胞菌生长曲线测定 | 第53-54页 |
| 3.6.5 荧光假单胞菌生物膜成膜时间筛选 | 第54-56页 |
| 3.7 本章小结 | 第56-58页 |
| 第4章 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对生物膜结构及组成成分的影响 | 第58-68页 |
| 4.1 扫描电镜（SEM）观察生物膜 | 第58-59页 |
| 4.2 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对生物膜代谢活性影响 | 第59-60页 |
| 4.3 激光共聚焦显微镜（CLSM）观察胞外多糖和蛋白质变化 | 第60-62页 |
| 4.4 苯酚硫酸法定量分析胞外多糖 | 第62-63页 |
| 4.4.1 标准曲线绘制 | 第62-63页 |
| 4.4.2 胞外多糖含量的测定 | 第63页 |
| 4.5 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对生物膜eDNA分泌的影响 | 第63-64页 |
| 4.6 荧光显微镜验证胞外多糖和蛋白质变化 | 第64-66页 |
| 4.7 本章小结 | 第66-68页 |
| 第5章 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对生物膜菌体的影响 | 第68-78页 |
| 5.1 透射电镜（TEM）观察 | 第68-69页 |
| 5.2 激光共聚焦显微镜（CLSM）观察生物膜内菌体状态 | 第69-71页 |
| 5.3 流式细胞术定量分析生物膜内菌体凋亡 | 第71-72页 |
| 5.4 荧光显微镜验证生物膜内菌体状态 | 第72-74页 |
| 5.5 半定量RT-PCR检测成膜基因变化 | 第74-75页 |
| 5.6 乳酸菌抗菌肽Lac-B23对荧光假单胞菌运动性影响 | 第75-76页 |
| 5.7 本章小结 | 第76-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 附录 | 第88-89页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
