| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-24页 |
| ·鳜鱼简介 | 第12-13页 |
| ·胰蛋白酶研究现状 | 第13-15页 |
| ·胰蛋白酶原和胰蛋白酶 | 第13页 |
| ·胰蛋白酶分离纯化 | 第13-14页 |
| ·胰蛋白酶（原）基因的研究 | 第14-15页 |
| ·胰蛋白酶应用的研究 | 第15-16页 |
| ·本课题研究的内容与意义 | 第16-17页 |
| 参考文献 | 第17-24页 |
| 第二章 鳜鱼蛋白酶的分离纯化及性质鉴定 | 第24-53页 |
| ·材料与方法 | 第24-34页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·动物 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·实验所用溶液及其制备 | 第25-27页 |
| ·实验所用仪器 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-34页 |
| ·胰蛋白酶活性的测定 | 第27页 |
| ·胰蛋白酶浓度的测定 | 第27-28页 |
| ·SDS-PAGE，Native-PAGE 及Casein-zymography | 第28-29页 |
| ·提取纯化方案 | 第29-32页 |
| ·性质分析 | 第32-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-49页 |
| ·胰蛋白酶的分离纯化 | 第34-40页 |
| ·硫酸分级范围确定 | 第34-35页 |
| ·胰蛋白酶的柱层析分离 | 第35-40页 |
| ·胰蛋白酶的性质研究 | 第40-49页 |
| ·电泳和酶谱 | 第40-41页 |
| ·蛋白酶抑制剂及底物特异性作用 | 第41-43页 |
| ·金属离子对胰蛋白酶活性的影响 | 第43-44页 |
| ·鳜鱼胰蛋白酶的温度范围和温度稳定性 | 第44-45页 |
| ·鳜鱼胰蛋白酶的pH 范围和pH 稳定性 | 第45-47页 |
| ·鳜鱼胰蛋白酶的动力学参数 | 第47-48页 |
| ·鳜鱼胰蛋白酶的免疫印迹反应 | 第48页 |
| ·鳜鱼胰蛋白酶的氨基酸序列测定 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 第三章 鳜鱼胰蛋白酶原的分子克隆及序列分析 | 第53-85页 |
| ·材料与方法 | 第53-61页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·动物 | 第53页 |
| ·菌种及质粒 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-61页 |
| ·总RNA 提取 | 第54-55页 |
| ·引物设计 | 第55-56页 |
| ·鳜鱼胰蛋白酶原的分子克隆 | 第56-59页 |
| ·PCR 扩增产物的电泳检测及目的基因片段的回收 | 第59页 |
| ·基因片段与pBS-T 载体的连接 | 第59-60页 |
| ·CaCl_2 法制备感受态细胞 | 第60页 |
| ·连接产物的转化及重组质粒的鉴定 | 第60页 |
| ·核苷酸序列的测定和分析 | 第60页 |
| ·胰蛋白酶基因推导蛋白质序列分析及结构预测 | 第60-61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-82页 |
| ·总RNA 提取的结果 | 第61页 |
| ·胰蛋白酶原基因的克隆 | 第61-63页 |
| ·胰蛋白酶原中间片段扩增 | 第61-62页 |
| ·胰蛋白酶原3'末端的扩增 | 第62-63页 |
| ·胰蛋白酶原5'末端的扩增 | 第63页 |
| ·胰蛋白酶基因序列分析 | 第63-82页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第63-66页 |
| ·氨基酸序组成分析 | 第66-68页 |
| ·蛋白质信号肽与激活肽分析 | 第68-71页 |
| ·蛋白质酶切位点分析 | 第71-74页 |
| ·二级结构结构预测 | 第74-76页 |
| ·三级结构预测 | 第76-78页 |
| ·系统进化树分析 | 第78-79页 |
| ·氨基酸序列对比分析 | 第79-82页 |
| 参考文献 | 第82-85页 |
| 第四章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第88页 |