| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-13页 |
| ·理化性质 | 第9页 |
| ·生物学功能 | 第9-10页 |
| ·麦芽糖转葡萄糖基酶合成途径及其相关基因 | 第10页 |
| ·麦芽糖转葡萄糖基酶酶的应用 | 第10-11页 |
| ·麦芽糖转葡萄糖基酶分子生物学研究进展及本研究的意义 | 第11-13页 |
| 第二章 材料和方法 | 第13-26页 |
| ·试验材料 | 第13-16页 |
| ·菌株与质粒 | 第13-15页 |
| ·试剂 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15页 |
| ·主要仪器设备 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-26页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第16-18页 |
| ·细菌DNA提取方案 | 第18页 |
| ·TD-PCR扩增麦芽糖转葡萄芽糖基酶基因 | 第18-19页 |
| ·PCR产物的回收 | 第19-20页 |
| ·目的片断与pMD18-T克隆载体连接 | 第20页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| ·重组质粒转化 | 第21-22页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第22页 |
| ·重组质粒核苷酸序列的测定 | 第22页 |
| ·重组质粒的小量提取 | 第22-23页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的回收 | 第23页 |
| ·重组质粒表达载体构建 | 第23-24页 |
| ·重组工程菌株的诱导表达及鉴定 | 第24页 |
| ·变性不连续凝胶电泳的鉴定 | 第24-26页 |
| 第三章 结果与分析 | 第26-36页 |
| ·水生栖热菌AF-03基因组DNA的提取 | 第26页 |
| ·引物的设计 | 第26页 |
| ·TD-PCR体外扩增麦芽糖转葡萄糖基酶基因结果 | 第26-27页 |
| ·重组克隆载体pMD18-T-麦芽糖转葡萄糖基酶切与PCR鉴定 | 第27-28页 |
| ·蓝白斑转化结果 | 第28-29页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第29-31页 |
| ·麦芽糖转葡萄糖基酶基因的表达 | 第31-36页 |
| ·pLY01高效表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·pLY01的酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组载体表达性能鉴定 | 第33-34页 |
| ·不同IPTG浓度对pLY01载体表达的影响 | 第34页 |
| ·不同IPTG浓度对表达的影响 | 第34-36页 |
| 第四章 讨论 | 第36-37页 |
| 第五章 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 附录 | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 作者简介 | 第43页 |