| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 仿刺参 | 第10页 |
| 1.1.1 仿刺参概况 | 第10页 |
| 1.1.2 仿刺参的营养价值与功效 | 第10页 |
| 1.2 仿刺参的养殖现状 | 第10-12页 |
| 1.2.1 国内外仿刺参养殖现状 | 第10-11页 |
| 1.2.2 养殖中出现的问题 | 第11页 |
| 1.2.3 养殖仿刺参病害 | 第11-12页 |
| 1.2.4 仿刺参腐皮综合病及致病菌种类 | 第12页 |
| 1.3 仿刺参的绿色养殖 | 第12-15页 |
| 1.3.1 生物防治的发展及展望 | 第12-13页 |
| 1.3.2 生物防治在水产养殖方面的作用 | 第13页 |
| 1.3.3 拮抗菌的作用机理 | 第13-15页 |
| 1.3.3.1 产生抑菌物质 | 第14页 |
| 1.3.3.2 营养竞争 | 第14页 |
| 1.3.3.3 附着位点竞争 | 第14页 |
| 1.3.3.4 提高机体免疫反应 | 第14页 |
| 1.3.3.5 降解或转化水体中的有害物质 | 第14-15页 |
| 1.3.4 生物防治在刺参养殖方面的发展前景 | 第15页 |
| 1.4 仿刺参微生物多样性研究 | 第15-20页 |
| 1.4.1 体表菌群的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.4.2 肠道菌群的研究现状 | 第16页 |
| 1.4.3 可培养微生物群落多样性 | 第16页 |
| 1.4.4 未可培养微生物群落多样性 | 第16-18页 |
| 1.4.5 未可培养微生物研究方法 | 第18-20页 |
| 1.4.5.1 克隆基因文库法 | 第18页 |
| 1.4.5.2 T-RFLP | 第18-19页 |
| 1.4.5.3 DGGE/TGGE | 第19页 |
| 1.4.5.4 RT-PCR | 第19-20页 |
| 1.5 本论文的研究内容与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 16SRDNA克隆文库分析仿刺参体表菌群多样性 | 第21-36页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.2.1 实验样品 | 第21页 |
| 2.2.2 主要培养基 | 第21页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.3.1 样品处理 | 第23页 |
| 2.3.2 体表细菌总DNA提取 | 第23页 |
| 2.3.3 16S rDNA片段的扩增 | 第23-24页 |
| 2.3.4 PCR产物的纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.5 构建16S rDNA克隆文库 | 第25-29页 |
| 2.3.5.1 CaCl_2法制备感受态细胞 | 第25页 |
| 2.3.5.2 PCR产物与T载体的连接 | 第25-26页 |
| 2.3.5.3 转化 | 第26-27页 |
| 2.3.5.4 阳性克隆的筛选 | 第27-28页 |
| 2.3.5.5 HaeⅢ和HinfⅠ双酶切 | 第28-29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-36页 |
| 2.4.1 体表细菌总DNA提取 | 第29-30页 |
| 2.4.2 16S rDNA片段的扩增及纯化 | 第30-31页 |
| 2.4.3 构建16S rDNA克隆文库 | 第31-36页 |
| 2.4.3.1 连接和克隆转化 | 第31-32页 |
| 2.4.3.2 阳性克隆的筛选 | 第32页 |
| 2.4.3.3 限制性片段多态性分析 | 第32-34页 |
| 2.4.3.4 构建16S rDNA克隆文库过程的探讨 | 第34-36页 |
| 第三章 仿刺参致病菌拮抗菌株的筛选及机理研究 | 第36-58页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料 | 第36-39页 |
| 3.2.1 实验样品 | 第36-37页 |
| 3.2.2 主要培养基 | 第37-38页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第38页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第38-39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-43页 |
| 3.3.1 拮抗菌株筛选 | 第39-40页 |
| 3.3.1.1 划线法 | 第40页 |
| 3.3.1.2 纸片法 | 第40页 |
| 3.3.2 拮抗机理研究 | 第40-43页 |
| 3.3.2.1 营养物质和生存空间的竞争 | 第40页 |
| 3.3.2.2 有机试剂萃取法分析抑菌活性物质 | 第40-41页 |
| 3.3.2.3 硫酸铵沉淀法制备抑菌活性粗提物 | 第41页 |
| 3.3.2.4 胞外酶抑制作用 | 第41-43页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第43-58页 |
| 3.4.1 拮抗菌株筛选 | 第43-47页 |
| 3.4.1.1 纸片法筛选结果 | 第43-44页 |
| 3.4.1.2 划线法筛选结果 | 第44-47页 |
| 3.4.2 拮抗机理研究 | 第47-58页 |
| 3.4.2.1 营养物质和生存空间的竞争 | 第48-51页 |
| 3.4.2.2 有机试剂萃取法分析抑菌活性物质 | 第51-54页 |
| 3.4.2.3 硫酸铵沉淀法制备抑菌活性粗提物 | 第54-55页 |
| 3.4.2.4 胞外酶抑制作用 | 第55-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |