摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 前言 | 第9-18页 |
1.1 结核分枝杆菌 | 第9-16页 |
1.1.1 分枝杆菌属的分类 | 第9-10页 |
1.1.2 结核分枝杆菌生物学特征 | 第10-11页 |
1.1.3 致病机制与所致疾病 | 第11页 |
1.1.4 结核分枝杆菌独特的基因组 | 第11-12页 |
1.1.5 结核分枝杆菌检测的研究进展 | 第12-16页 |
1.2 荧光定量PCR | 第16-17页 |
1.3 原理 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-24页 |
2.1 仪器和器材 | 第18页 |
2.2 试剂 | 第18-19页 |
2.3 样品处理 | 第19页 |
2.3.1 抽样、采样工具 | 第19页 |
2.3.2 样品采集 | 第19页 |
2.3.3 样品贮运 | 第19页 |
2.3.4 样品制备 | 第19页 |
2.4 PCR产物的克隆 | 第19-20页 |
2.4.1 PCR产物的回收 | 第19页 |
2.4.2 PCR产物与克隆载体pGEM-T的连接 | 第19-20页 |
2.4.3 JM l09感受态细胞的制备 | 第20页 |
2.4.4 连接产物转化宿主菌 | 第20页 |
2.5 阳性质粒的鉴定及序列的测定 | 第20-21页 |
2.5.1 质粒的小量提取 | 第20页 |
2.5.2 序列的测定和分析 | 第20-21页 |
2.5.3 标准阳性质粒的制备 | 第21页 |
2.6 方法 | 第21-24页 |
2.6.1 DNA提取 | 第21-22页 |
2.6.2 样本的处理 | 第22页 |
2.6.3 反应体系的配制 | 第22页 |
2.6.4 荧光定量PCR的检测 | 第22-23页 |
2.6.5 结果判定 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-31页 |
3.1 标准曲线的绘制 | 第24页 |
3.2 特异性试验 | 第24-25页 |
3.3 重复性试验 | 第25页 |
3.4 敏感性试验 | 第25-26页 |
3.5 临床乳样检验 | 第26-27页 |
3.6 验证试验 | 第27-30页 |
3.7 标准的建立 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-34页 |
4.1 研究意义 | 第31-32页 |
4.2 环介导等温扩增技术的应用 | 第32页 |
4.3 荧光定量PCR与LAMP的应用 | 第32-33页 |
4.4 展望 | 第33-34页 |
5 全文总结 | 第34-35页 |
致谢 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
附录 | 第40-47页 |