| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第15-31页 |
| 1.1 内含肽 | 第15-21页 |
| 1.1.1 内含肽起源及结构 | 第15-16页 |
| 1.1.2 内含肽作用机制 | 第16-17页 |
| 1.1.3 内含肽应用 | 第17-21页 |
| 1.2 D-氨基酸氧化酶 | 第21-24页 |
| 1.2.1 D-氨基酸氧化酶概述 | 第21页 |
| 1.2.2 D-氨基酸氧化酶来源及特性 | 第21-23页 |
| 1.2.3 D-氨基酸氧化酶催化机制及生理功效 | 第23页 |
| 1.2.4 D-氨基酸氧化酶应用 | 第23-24页 |
| 1.3 透明颤菌血红蛋白 | 第24-27页 |
| 1.3.1 透明颤菌血红蛋白来源发展 | 第24-25页 |
| 1.3.2 透明颤菌血红蛋白催化机制 | 第25-26页 |
| 1.3.3 透明颤菌血红蛋白应用 | 第26-27页 |
| 1.4 酪氨酸羟化酶 | 第27-29页 |
| 1.4.1 酪氨酸羟化酶概述 | 第27页 |
| 1.4.2 酪氨酸羟化酶催化机制 | 第27-28页 |
| 1.4.3 酪氨酸羟化酶功能影响 | 第28-29页 |
| 1.5 课题研究意义及内容 | 第29-31页 |
| 第二章 D-氨基酸氧化酶与血红蛋白融合表达 | 第31-69页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料及仪器 | 第31-36页 |
| 2.2.1 菌株与载体 | 第31-32页 |
| 2.2.2 试剂 | 第32-36页 |
| 2.3 表达载体的构建与表达 | 第36-50页 |
| 2.3.1 常规表达载体的构建 | 第36-40页 |
| 2.3.2 pET28a-DAAO-VHb表达载体构建 | 第40-42页 |
| 2.3.3 pETDuet-1-VHb-I~N-I~C-DAAO表达载体构建 | 第42-46页 |
| 2.3.4 重组蛋白的表达 | 第46-47页 |
| 2.3.5 SDS-PAGE聚丙烯酰胺电泳 | 第47页 |
| 2.3.6 融合蛋白的放大培养 | 第47-48页 |
| 2.3.7 融合蛋白的纯化 | 第48-49页 |
| 2.3.8 DAAO酶活测定 | 第49页 |
| 2.3.9 标准曲线绘制 | 第49-50页 |
| 2.3.10 圆二色谱 | 第50页 |
| 2.4 结果讨论与分析 | 第50-68页 |
| 2.4.1 融合表达载体pET28a-DAAO-VHb的构建 | 第50-53页 |
| 2.4.2 表达菌BL21(DE3)/pET28a-DAAO-VHb预表达 | 第53-54页 |
| 2.4.3 表达菌BL21(DE3)/pET28a-DAAO-VHb表达优化 | 第54-57页 |
| 2.4.4 表达菌BL21(DE3)/pET28a-DAAO-VHb蛋白纯化 | 第57-58页 |
| 2.4.5 表达载体pETDuet-1-VHb-I~N-I~C-DAAO的构建 | 第58-61页 |
| 2.4.6 表达菌BL21(DE3)/pETDuet-1-VHb-I~N-I~C-DAAO预表达 | 第61-64页 |
| 2.4.7 表达菌BL21(DE3)/pETDuet-1-VHb-I~N-I~C-DAAO表达优化 | 第64-65页 |
| 2.4.8 表达菌BL21(DE3)/pETDuet-1-VHb-I~N-I~C-DAAO蛋白纯化 | 第65-66页 |
| 2.4.9 标准曲线绘制 | 第66页 |
| 2.4.10 酶活表征 | 第66-67页 |
| 2.4.11 圆二色谱测定 | 第67-68页 |
| 2.5 本章小结 | 第68-69页 |
| 第三章 D-氨基酸氧化酶、血红蛋白、酪氨酸羟化酶融合表达 | 第69-95页 |
| 3.1 引言 | 第69页 |
| 3.2 实验材料及仪器 | 第69-70页 |
| 3.2.1 菌株与载体 | 第69页 |
| 3.2.2 酶及试剂 | 第69页 |
| 3.2.3 培养基及仪器 | 第69-70页 |
| 3.2.4 所用的引物设计 | 第70页 |
| 3.3 表达载体的构建与表达 | 第70-78页 |
| 3.3.1 pET28a-DAAO-VHb-TH表达载体构建 | 第70-71页 |
| 3.3.2 pETDuet-1-TH-I~N-I~C-DAAO-VHb表达载体构建 | 第71-74页 |
| 3.3.3 pETDuet-1-VHb-TH-I~N-I~C-DAAO表达载体构建 | 第74-77页 |
| 3.3.4 融合蛋白表达及电泳分析 | 第77页 |
| 3.3.5 融合蛋白扩大培养及纯化 | 第77-78页 |
| 3.3.6 TH酶活测定 | 第78页 |
| 3.3.7 L-Tyr标准曲线的制作 | 第78页 |
| 3.4 结论与分析 | 第78-93页 |
| 3.4.1 pET28a-DAAO-VHb-TH表达载体构建 | 第78-79页 |
| 3.4.2 表达菌BL21(DE3)/pET28a-DAAO-VHb-TH预表达 | 第79-80页 |
| 3.4.3 表达菌BL21(DE3)/pET28a-DAAO-VHb-TH表达优化 | 第80-82页 |
| 3.4.4 表达菌BL21(DE3)/pET28a-DAAO-VHb-TH蛋白纯化 | 第82-83页 |
| 3.4.5 pETDuet-1-TH-I~N-I~C-DAAO-VHb载体构建 | 第83-84页 |
| 3.4.6 表达菌BL21(DE3)/pETDuet-1-TH-I~N-I~C-DAAO-VHb预表达 | 第84-85页 |
| 3.4.7 pETDuet-1-VHb-TH-I~N-I~C-DAAO表达载体构建 | 第85-87页 |
| 3.4.8 表达菌BL21(DE3)/pETDuet-1-VHb-TH-I~N-I~C-DAAO预表达 | 第87-88页 |
| 3.4.9 表达菌BL21(DE3)/pETDuet-1-VHb-TH-I~N-I~C-DAAO表达优化 | 第88-91页 |
| 3.4.10 表达菌BL21(DE3)/pETDuet-1-VHb-TH-I~N-I~C-DAAO蛋白纯化 | 第91-92页 |
| 3.4.11 标准曲线绘制 | 第92页 |
| 3.4.12 酶活表征 | 第92-93页 |
| 3.5 本章小结 | 第93-95页 |
| 第四章 结论 | 第95-97页 |
| 4.1 结论 | 第95-96页 |
| 4.2 创新点 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第105-107页 |
| 作者及导师简介 | 第107-108页 |
| 附件 | 第108-109页 |
