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植物甾醇单体及氧化物对酿酒酵母的作用机理研究

摘要第1-5页
Abstract第5-15页
1 文献综述第15-33页
   ·植物甾醇概述第15-18页
     ·植物甾醇的来源、结构与吸收第15-16页
     ·植物甾醇与心血管疾病第16-17页
     ·植物甾醇的抗癌作用第17-18页
     ·植物甾醇的抗氧化作用第18页
   ·甾醇氧化物第18-22页
     ·甾醇氧化物的来源第18-20页
     ·甾醇氧化物引起的毒理和病理作用第20-22页
   ·细胞凋亡概论第22-26页
     ·细胞凋亡的概念第22页
     ·细胞凋亡途径第22-24页
     ·细胞凋亡的检测方法第24-26页
   ·酵母细胞凋亡第26-33页
     ·酵母细胞凋亡的研究背景第26-27页
     ·酵母细胞凋亡的诱导因素第27-28页
     ·酵母细胞凋亡的检测方法第28-29页
     ·酵母细胞凋亡通路第29-33页
2 植物甾醇单体及氧化物的制备第33-41页
   ·引言第33-34页
   ·材料与方法第34-36页
     ·材料与试剂第34页
     ·仪器设备第34页
     ·植物甾醇单体的制备第34页
     ·植物甾醇氧化物的制备第34-36页
   ·结果与分析第36-40页
     ·植物甾醇单体的制备分析第36-37页
     ·植物甾醇氧化物的制备分析第37-40页
   ·讨论第40-41页
3 菜油甾醇在氧化应激条件下对酵母细胞的保护机理研究第41-52页
   ·引言第41-42页
   ·材料与方法第42-44页
     ·材料与试剂第42页
     ·酵母菌株及培养基第42页
     ·仪器设备第42页
     ·酵母细胞培养及生长曲线的测定第42-43页
     ·点实验第43页
     ·存活率检测第43页
     ·ROS检测第43页
     ·抗氧化酶的检测第43-44页
     ·脂质过氧化的检测第44页
   ·结果与分析第44-49页
     ·酿酒酵母BY4741生长曲线的测定第44-45页
     ·菜油甾醇可以降低酵母细胞对过氧化氢的敏感性第45页
     ·菜油甾醇抑制由过氧化氢引起的酵母细胞死亡第45-47页
     ·菜油甾醇抑制活性氧的积累第47-48页
     ·菜油甾醇增加酵母细胞中抗氧化酶的活性第48-49页
     ·菜油甾醇降低脂质过氧化程度第49页
   ·讨论第49-52页
4 7-酮基胆固醇诱导caspase依赖型酵母凋亡第52-64页
   ·引言第52页
   ·材料与方法第52-55页
     ·材料与试剂第52-53页
     ·酵母菌株及培养基第53页
     ·仪器设备第53页
     ·酵母细胞培养及生长曲线的测定第53-54页
     ·存活率检测第54页
     ·Annexin V和PI染色第54页
     ·活性氧的检测第54页
     ·染色质染色第54页
     ·caspase抑制剂实验第54-55页
   ·结果与分析第55-62页
     ·酿酒酵母1812生长曲线的测定第55-56页
     ·7-酮基胆固醇对酵母存活率的影响第56页
     ·7-酮基胆固醇引起的细胞凋亡的检测第56-59页
     ·7-酮基胆固醇对活性氧积累的影响第59-60页
     ·caspase抑制剂对酵母细胞生长的影响第60-61页
     ·7-酮基胆固醇诱导的细胞死亡依赖于YCA1,不依赖于AIF1和YBH3第61-62页
   ·讨论第62-64页
5 7-酮基植物甾醇诱导的酵母凋亡及机理研究第64-81页
   ·引言第64-65页
   ·材料与方法第65-68页
     ·材料与试剂第65页
     ·酵母菌株及培养基第65-66页
     ·仪器设备第66页
     ·酵母细胞培养第66页
     ·存活率检测第66页
     ·点实验第66-67页
     ·DAPI染色第67页
     ·Annexin V/PI共染色第67页
     ·活性氧的检测第67页
     ·TUNEL染色第67-68页
   ·结果与分析第68-78页
     ·7-酮基植物甾醇引起的细胞死亡第68-69页
     ·7-酮基植物甾醇引起的活性氧积累第69-71页
     ·7-酮基植物甾醇引起的细胞死亡是以凋亡的方式进行的第71-73页
     ·7-酮基植物甾醇诱导的酵母细胞死亡依赖于YCA1不依赖于核酸内切酶G第73-78页
   ·讨论第78-81页
6 电化学检测酵母细胞凋亡第81-96页
   ·引言第81-82页
   ·材料与方法第82-84页
     ·材料与试剂第82页
     ·酵母菌株及培养基第82页
     ·仪器设备第82-83页
     ·酵母细胞培养及过氧化氢诱导凋亡第83页
     ·存活率检测第83页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡第83页
     ·DAD修饰的玻璃碳电极的制备第83-84页
     ·SWASV检测Cu~(2+)和细胞凋亡第84页
     ·电化学装置第84页
     ·点实验检测 7-酮基植物甾醇和 7-酮基胆固醇引起的酵母凋亡第84页
     ·电化学检测 7-酮基植物甾醇和 7-酮基胆固醇引起的酵母凋亡第84页
   ·结果与分析第84-93页
     ·电极的修饰及最优条件的确定第84-86页
     ·电化学检测PS标品第86-87页
     ·过氧化氢处理酵母细胞的存活率检测第87-88页
     ·电化学检测正常细胞中的PS第88-89页
     ·流式细胞仪检测过氧化氢引起的酵母凋亡第89-90页
     ·电化学检测过氧化氢引起的酵母凋亡第90-91页
     ·点实验检测 7-酮基植物甾醇和 7-酮基胆固醇引起的酵母凋亡第91-92页
     ·电化学检测 7-酮基植物甾醇和 7-酮基胆固醇引起的酵母凋亡第92-93页
   ·讨论第93-96页
结论第96-98页
参考文献第98-117页
致谢第117-119页
作者简介第119-120页
博士期间主要科研成果第120页

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