摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-15页 |
1 文献综述 | 第15-33页 |
·植物甾醇概述 | 第15-18页 |
·植物甾醇的来源、结构与吸收 | 第15-16页 |
·植物甾醇与心血管疾病 | 第16-17页 |
·植物甾醇的抗癌作用 | 第17-18页 |
·植物甾醇的抗氧化作用 | 第18页 |
·甾醇氧化物 | 第18-22页 |
·甾醇氧化物的来源 | 第18-20页 |
·甾醇氧化物引起的毒理和病理作用 | 第20-22页 |
·细胞凋亡概论 | 第22-26页 |
·细胞凋亡的概念 | 第22页 |
·细胞凋亡途径 | 第22-24页 |
·细胞凋亡的检测方法 | 第24-26页 |
·酵母细胞凋亡 | 第26-33页 |
·酵母细胞凋亡的研究背景 | 第26-27页 |
·酵母细胞凋亡的诱导因素 | 第27-28页 |
·酵母细胞凋亡的检测方法 | 第28-29页 |
·酵母细胞凋亡通路 | 第29-33页 |
2 植物甾醇单体及氧化物的制备 | 第33-41页 |
·引言 | 第33-34页 |
·材料与方法 | 第34-36页 |
·材料与试剂 | 第34页 |
·仪器设备 | 第34页 |
·植物甾醇单体的制备 | 第34页 |
·植物甾醇氧化物的制备 | 第34-36页 |
·结果与分析 | 第36-40页 |
·植物甾醇单体的制备分析 | 第36-37页 |
·植物甾醇氧化物的制备分析 | 第37-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
3 菜油甾醇在氧化应激条件下对酵母细胞的保护机理研究 | 第41-52页 |
·引言 | 第41-42页 |
·材料与方法 | 第42-44页 |
·材料与试剂 | 第42页 |
·酵母菌株及培养基 | 第42页 |
·仪器设备 | 第42页 |
·酵母细胞培养及生长曲线的测定 | 第42-43页 |
·点实验 | 第43页 |
·存活率检测 | 第43页 |
·ROS检测 | 第43页 |
·抗氧化酶的检测 | 第43-44页 |
·脂质过氧化的检测 | 第44页 |
·结果与分析 | 第44-49页 |
·酿酒酵母BY4741生长曲线的测定 | 第44-45页 |
·菜油甾醇可以降低酵母细胞对过氧化氢的敏感性 | 第45页 |
·菜油甾醇抑制由过氧化氢引起的酵母细胞死亡 | 第45-47页 |
·菜油甾醇抑制活性氧的积累 | 第47-48页 |
·菜油甾醇增加酵母细胞中抗氧化酶的活性 | 第48-49页 |
·菜油甾醇降低脂质过氧化程度 | 第49页 |
·讨论 | 第49-52页 |
4 7-酮基胆固醇诱导caspase依赖型酵母凋亡 | 第52-64页 |
·引言 | 第52页 |
·材料与方法 | 第52-55页 |
·材料与试剂 | 第52-53页 |
·酵母菌株及培养基 | 第53页 |
·仪器设备 | 第53页 |
·酵母细胞培养及生长曲线的测定 | 第53-54页 |
·存活率检测 | 第54页 |
·Annexin V和PI染色 | 第54页 |
·活性氧的检测 | 第54页 |
·染色质染色 | 第54页 |
·caspase抑制剂实验 | 第54-55页 |
·结果与分析 | 第55-62页 |
·酿酒酵母1812生长曲线的测定 | 第55-56页 |
·7-酮基胆固醇对酵母存活率的影响 | 第56页 |
·7-酮基胆固醇引起的细胞凋亡的检测 | 第56-59页 |
·7-酮基胆固醇对活性氧积累的影响 | 第59-60页 |
·caspase抑制剂对酵母细胞生长的影响 | 第60-61页 |
·7-酮基胆固醇诱导的细胞死亡依赖于YCA1,不依赖于AIF1和YBH3 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
5 7-酮基植物甾醇诱导的酵母凋亡及机理研究 | 第64-81页 |
·引言 | 第64-65页 |
·材料与方法 | 第65-68页 |
·材料与试剂 | 第65页 |
·酵母菌株及培养基 | 第65-66页 |
·仪器设备 | 第66页 |
·酵母细胞培养 | 第66页 |
·存活率检测 | 第66页 |
·点实验 | 第66-67页 |
·DAPI染色 | 第67页 |
·Annexin V/PI共染色 | 第67页 |
·活性氧的检测 | 第67页 |
·TUNEL染色 | 第67-68页 |
·结果与分析 | 第68-78页 |
·7-酮基植物甾醇引起的细胞死亡 | 第68-69页 |
·7-酮基植物甾醇引起的活性氧积累 | 第69-71页 |
·7-酮基植物甾醇引起的细胞死亡是以凋亡的方式进行的 | 第71-73页 |
·7-酮基植物甾醇诱导的酵母细胞死亡依赖于YCA1不依赖于核酸内切酶G | 第73-78页 |
·讨论 | 第78-81页 |
6 电化学检测酵母细胞凋亡 | 第81-96页 |
·引言 | 第81-82页 |
·材料与方法 | 第82-84页 |
·材料与试剂 | 第82页 |
·酵母菌株及培养基 | 第82页 |
·仪器设备 | 第82-83页 |
·酵母细胞培养及过氧化氢诱导凋亡 | 第83页 |
·存活率检测 | 第83页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第83页 |
·DAD修饰的玻璃碳电极的制备 | 第83-84页 |
·SWASV检测Cu~(2+)和细胞凋亡 | 第84页 |
·电化学装置 | 第84页 |
·点实验检测 7-酮基植物甾醇和 7-酮基胆固醇引起的酵母凋亡 | 第84页 |
·电化学检测 7-酮基植物甾醇和 7-酮基胆固醇引起的酵母凋亡 | 第84页 |
·结果与分析 | 第84-93页 |
·电极的修饰及最优条件的确定 | 第84-86页 |
·电化学检测PS标品 | 第86-87页 |
·过氧化氢处理酵母细胞的存活率检测 | 第87-88页 |
·电化学检测正常细胞中的PS | 第88-89页 |
·流式细胞仪检测过氧化氢引起的酵母凋亡 | 第89-90页 |
·电化学检测过氧化氢引起的酵母凋亡 | 第90-91页 |
·点实验检测 7-酮基植物甾醇和 7-酮基胆固醇引起的酵母凋亡 | 第91-92页 |
·电化学检测 7-酮基植物甾醇和 7-酮基胆固醇引起的酵母凋亡 | 第92-93页 |
·讨论 | 第93-96页 |
结论 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-117页 |
致谢 | 第117-119页 |
作者简介 | 第119-120页 |
博士期间主要科研成果 | 第120页 |